3. đỐI TƯỢN G NỘI DUN G PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.2.2. Phương pháp xác ựịnh số lượng các vi sinh vật tổng số trong không khắ chuồng nuô
khắ chuồng nuôi
ạ Xác ựịnh số số lượng vi khuẩn có trong không khắ chuồng nuôi gà trước và sau khi chiếu tia cực tắm.
Sử dụng phương pháp lắng bụi của Kock. Mỗi lô sẽ ựược kiểm tra 5 vị trắ khác nhau là bốn góc chuồng và một vị trắ ở giữa chuồng, mỗi vị trắ ựặt 3 hộp thạch dinh dưỡng, ựường kắnh 90mm. Ba loại hộp thạch dinh dưỡng ựó là: một hộp thạch thường cho toàn bộ vi khuẩn hiếu khắ, một hộp thạch Mac Conkey (MC) cho trực khuẩn Gram (-) dễ mọc và một hộp thạch Sabouraud cho vi nấm. Các hộp thạch sẽ ựược mở nắp lần lượt sau khi ựược ựặt ựầy ựủ tại 5 vị trắ của chuồng nuôi và ựể yên trong 5 phút, sau ựó ựược ựậy nắp lại cũng lần lượt, hộp nào mở nắp trước thì ựược ựậy nắp trước. Thắ nghiệm ựược lặp lại 3 lần với tổng số mẫu tại mỗi lô là 45 mẫu thạch thường và 45 mẫu thạch Mac Conkeỵ Các ựĩa lồng ựã hứng vi khuẩn ở môi trường xét nghiệm ựược ựặt vào tủ ấm trong 24 giờ, rồi lấy ra, ựọc kết quả. Xác ựịnh số loại khuẩn lạc và số giống vi khuẩn trên ựĩa thạch. Chọn mỗi loại khuẩn lạc một khuẩn lạc thuần ựem nuôi cấy trong môi trường nước thịt và các môi trường thạch ựể tủ ấm 370C trong 24 giờ. Sau ựó nuôi cấy và phân lập các giống vi khuẩn trên môi trường thạch Mac conkey, thử các phản ứng sinh hóa như phản ứng lên
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...40 men ựường, phản ứng Indol, phản ứng Oxydaza, Catalaza ựể xác ựịnh giống vi khuẩn theo các biện pháp thường quy trong phòng thắ nghiệm của bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm Ờ Khoa thú y - Trường đại học Nông nghiệp Hà Nộị
đếm số số lượng khuẩn lạc mọc trên mỗi hộp thạch. Tổng số vi khuẩn/m3 không khắ tại mỗi cụm ựược xác ựịnh theo công thức sau:
Sxk x Ax X 100 100 =
Trong ựó: X là tổng số vi khuẩn/m3 không khắ tại cụm khảo sát (CFU/m3). A là tổng số khóm vi khuẩn mọc trên ba loại môi trường
S là diện tắch của hộp petri chứa môi trường, ựược xác ựịnh bằng công thức S = πR2 (R tắnh bằng cm) = 3.1416 x 92
k là hệ số ( k = 1, thời gian ựặt thạch là 5 phút )
Số lượng vi sinh vật có trong 1m3 không khắ trong chuồng nuôi ựược tắnh bằng trung bình cộng của số lượng vi sinh vật có trong 1m3 của 5 cụm khảo sát.
b. Xác ựịnh số lượng vi khuẩn có trong lớp ựộn chuồng nuôi gà trước và sau khi chiếu tia cực tắm.
Lấy mẫu chất ựộn nền chuồng cho vào túi nilon vô trùng. Trước khi nuôi, mỗi lô lấy mẫu ựộn chuồng tại 5 vị trắ khác nhau 4 góc và ở giữa chuồng. Trong khi nuôi gà, lấy mẫu trước và sau khi chiếu ựèn cực tắm tại các lô: Lô ựối chứng tiến hành lấy ở các vị trắ như lấy mẫu không khắ, các lô thắ nghiệm tiến hành lấy mẫu tại 2 vị trắ gần ựèn và xa ựèn (cả trước khi chiếu và sau khi chiếu ựều lấy ở 2 vị trắ này). Sau khi lấy mẫu nền chuồng, tiến hành pha mẫu lấy ựược ựến nồng ựộ 10-8, sau ựó tiến hành cấy láng trên hai môi trường thạch thường và thạch Mac conkey, mỗi mẫu cấy các nồng ựộ như sau: thạch thường cấy ở nồng ựộ 10-8 và 10-7, thạch Mac conkey cấy ở các nồng ựộ 10-6 và 10-5. Các ựĩa mẫu sau khi lấy về và sau khi cấy láng ựược ựể ở tủ ấm
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...41 370C trong 24 giờ rồi tiến hành ựếm số khuẩn lạc. đánh giá số lượng khuẩn lạc trong môi trường chuồng trước khi nuôi và so sánh số lượng khuẩn lạc trước và sau khi chiếu ựèn cực tắm ựể xác ựịnh khả năng khử trùng chuồng trại của tia cực tắm.
Tổng số vi khuẩn trong 1g mẫu ựược tắnh theo công thức:
∑ C N = ( n
1 + 0.1 n2 ) x dl x v
Trong ựó: C là số khuẩn lạc ựếm ựược trên các ựĩa ựã chọn ở nồng ựộ thắch hợp; n1 và n2 là số ựĩa ở hai nồng ựộ pha loãng liên tiếp ựã chọn thứ nhất và thứ haị
dl : hệ số pha loãng ựã chọn. v : Lượng mẫu cấy
c. Xác ựịnh các chỉ tiêu sản xuất của gà
- Tỷ lệ nuôi sống ựược xác ựịnh bằng cách hàng ngày ựếm chắnh xác số con chết của từng lô thắ nghiệm, tỷ lệ nuôi sống (từng tuần) ựược tắnh theo công thức:
Số gà sống ựến cuối kỳ (con) Tỷ lệ nuôi sống (%) =
Số gà có mặt ựầu kỳ (con) x 100
-Khối lượng cơ thể hay sinh trưởng tắch luỹ của gà ựược xác ựịnh bằng cách hàng tuần cân từng con gà thắ nghiệm vào buổi sáng nhất ựịnh trong tuần trước khi ăn.
- Lượng thức ăn thu nhận
Hàng ngày, cân thức ăn ựổ vào máng cho gà ăn và sau 24 giờ cân lượng thức ăn thừa ựể tắnh lượng thức ăn thu nhận (LTĂTN) theo công thức:
Lượng thức ăn cho ăn (g) Ờ lượng thức ăn thừa (g) LTĂTN(g/con/ngày) =
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...42 - Hiệu quả sử dụng thức ăn (HQSDTĂ) chắnh là tiêu tốn thức ăn cho một kg tăng khối lượng cơ thể và ựược tắnh theo công thức:
Lượng thức ăn thu nhận (kg) HQSDTĂ (kgTĂ/ kg tăng khối lượng) =
Khối lượng gà tăng (kg)
- Tỷ lệ gà bị khoèo chân xác ựịnh theo công thức:
Số con khoèo chân Tỷ lệ gà khoèo chân (%) =
Số gà theo dõi X 100
Kết thúc thắ nghiệm, chọn 5 gà trống và 5 gà mái ở mỗi lô có khối lượng cơ thể trung bình, khảo sát theo phương pháp giết mổ khảo sát của Auaas R và Wilke R, 1978.
+ Khối lượng sống (kg): là khối lượng sau khi gà ăn 12 giờ.
+ Khối lượng thân thịt (kg): là khối lượng gà sau khi cắt tiết, vặt lông bỏ nội tạng, cắt ựầu ở ựoạn giữa xương chẩm và xương atlat, cắt chân ở ựoạn khớp khuỷụ
Khối lượng thân thịt (g) Tỷ lệ thân thịt (%) =
Khối lượng sống (g)
x 100
Khối lượng thịt ựùi trái (g) x 2 Tỷ lệ thịt ựùi (%) =
Khối lượng thân thịt (g)
x 100
Khối lượng thịt ngực trái (g) x 2 Tỷ lệ thịt lườn (%) =
Khối lượng thân thịt (g)
x 100
Khối lượng mỡ bụng (g) Tỷ lệ mỡ bụng (%) =
Khối lượng thân thịt (g)
x 100 * Chỉ số sản xuất (PN) ựược xác ựịnh bằng công thức:
Khối lượng cơ thể (g) x % nuôi sống PN =
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...43
d. Xác ựịnh ảnh hưởng của tia cực tắm ựến trao ựổi khoáng và bệnh còi xương của gà
để ựánh giá các chỉ tiêu Ca, P trong huyết thanh, khoáng tổng số trong xương ựùi, lấy máu ngẫu nhiên của 5 cá thể từ mỗi lô ựể phân tắch. Hàm lượng canxi huyết thanh ựược xác ựịnh theo phương pháp quang phổ hấp phụ nguyên tử trên máy AAS-3110. Hàm lượng photpho huyết thanh ựược xác ựịnh theo phương pháp quang phổ kế trên máy quang phổ kế tử ngoại và khả kiến U-2000 (Hitachi, Nhật Bản). định lượng khoáng tổng số trong xương ựùi (tibia): theo TCVN số 4327-2007: Xương ựùi sau khi làm sạch, sấy ở nhiệt ựộ 103 ổ 20 C từ 2 - 4 giờ, sau khi sấy, lấy mẫu ra ựể nguội trong bình hút ẩm, làm như thế nhiều lần cho ựến khi khối lượng không ựổi, ựó là mẫu ựã ựược loại nước (mẫu khô). Khoáng tổng số (tro khô) ựược xác ựịnh bằng cách ựưa mẫu ựã sấy khô vào lò nung, với nhiệt ựộ 5500C cho ựến khi khoáng hóa, sấy cho ựến khi khối lượng không ựổi: Công thức tắnh:
m1 Ờ m2
Khoáng tổng số (%) = --- x 100 m
Trong ựó: m1 là khối lượng chén với mẫu thử sau khi nung m2 là khối lượng chén
m là khối lượng mẫụ
Các chỉ tiêu về khoáng tổng số trong xương ựùi: canxi, photpho huyết thanh ựược phân tắch tại Phòng thắ nghiệm trung tâm - Trường đại học Nông nghiệp Hà Nộị
- Các số liệu thu thập ựược, ựược sử lý theo các phương pháp thống kê sinh học dựa trên phần mềm Minitab 14. Các tham số thống kê bao gồm: dung lượng mẫu (N), số trung bình (X ), sai số của số trung bình (mx), ựộ lệch tiêu chuẩn (Sx), hệ số biến ựộng (Cv%).
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...44