4. KẾT QUẢ NGHIấN CỨU
4.1.3. Hiệu lực hạn chế tuyến trựng nốt sưng (Meloidogyne incognita) của
một số thảo mộc ngoài nhà lưới
ðỏnh giỏ khả năng hạn chế số lượng tuyến trựng Meloidogyne sp. gõy hại rễ hồ tiờu của thảo mộc TM1(bó sở) và TM2 (bó trẩu). Kết quả thớ nghiệm (bảng 4.6) cho thấy với liều lượng sử dụng 20 và 30 gam/chậu (loại 5 kg
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...44 ủất/chậu) thỡ sau 1 thỏng số lượng tuyến trựng giảm ủi một cỏch ủỏng kể, hiệu lực của thảo mộc TM 1 là 43,6% và 55,4%, của thảo mộc TM 2 là 33,4% và 42,5% (tương ứng).
Hiệu lực hạn chế số lượng tuyến trựng sau 2 thỏng xử lý tương ứng với 2 liều lượng (20 và 30 g/chậu) của thảo mộc TM 1 là 49,8% và 59,8%, cũn của TM 2 là 40,8% và 42,1%. ðến thời ủiểm sau 3 thỏng xử lý với liều lượng 20 và 30 gam/chậu thỡ hiệu lực của thảo mộc TM 2 ủạt 50,1% và 65,8%, của thảo mộc TM 1 là 49,6% và 52,8% .
Khi liều lượng thảo dược sử dụng tăng từ 20 gam lờn 30 gam/chậu thỡ hiệu quả hạn chế tuyến trựng cũng tăng lờn ủối với cả 2 loại thảo mộc tham gia thớ nghiệm. ðối với TM1 tăng từ 43,6% lờn 55,4% sau 1 thỏng xử lý và từ 50,1% tăng lờn 65,8% sau 3 thỏng. Với TM2 sau xử lý 1 thỏng từ 33,4% lờn 42,5% và sau 3 thỏng tăng từ 49,6% lờn 52,8%.
Bảng 4.6. Hiệu quả hạn chế số lượng tuyến trựng M. incognita
trong ủất trồng cà chua của một số loại thảo mộc (Nhà lưới Viện BVTV, 2010)
Hiệu quả giảm số lượng tuyến trựng sau cỏc thỏng lõy nhiễm Sau 1 thỏng Sau 2 thỏng Sau 3 thỏng Cụng thức Liều lượng g/chậu Số TT (con /100g ủất) Hiệu lực (%) Số TT (con /100g ủất) Hiệu lực (%) Số TT (con /100g ủất) Hiệu lực (%) TM 1 20 212,4 43,6ab 233,0 49,8ab 286,2 50,1b TM 1 30 168,0 55,4a 186,6 59,8a 199,8 65,8a TM 2 20 250,8 33,4b 274,6 40,8b 294,6 49,6b TM 2 30 216,6 42,5ab 268,6 42,1b 275,8 52,8b
ð.C K. bún 376,6 - 464,2 - 585,2 -
LSD 5% 14,82 15,36 10,8
CV % 32,9 30,2 18,6
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...45 Kết quả một thớ nghiệm khỏc tiến hành trong năm 2010. Khi nhiễm với số lượng 2.500 tuyến trựng Meloidogyne incognita, ở nhiệt ủộ khụng khớ trung bỡnh trong suốt thời gian thớ nghiệm là 26,50C và ẩm ủộ trung bỡnh là 81,4%. Kết quả thớ nghiệm qua theo dừi vào thời ủiểm 25 và 45 ngày sau xử lý ủược trỡnh bày trong bảng 3.7.
Khi sử dụng TM1 với liều lượng 30g/chậu thỡ số lượng nốt sưng giảm từ 24,7 xuống cũn 23,6 nốt sưng/bộ rễ. Khi liều lượng dựng là 40g/chậu thỡ số nốt sưng giảm từ 21,7 xuống cũn 13,6 nốt sưng/bộ rễ và khi dựng với lượng 50 g/chậu thỡ số liệu tương ứng là từ 17,3 xuống cũn 11,0 nốt sưng/bộ rễ.
Cũn trong cựng thời ủiểm theo dừi, khi liều lượng TM1 tăng lờn thỡ số nốt sưng trờn rễ giảm ủi rừ rệt. Tại thời ủiểm 25 ngày, với liều lượng dựng là 30; 40 và 50 g/chậu, số lượng nốt sưng tương ứng là 24,7; 21,7 và 17,3 nốt sưng/bộ rễ, cũn ủối chứng khụng xử lý lờn tới 32,3 nốt sưng. ðến 45 ngày sau xử lý, thỡ tương ứng với cỏc mức liều lượng là 214,9; 167,2 và 104,9 nốt sưng/bộ rễ, trong khi ủối chứng lờn tới 1.324, 4 nốt sưng/bộ rễ.
ðỏnh giỏ hiệu lực hạn chế tuyến trựng Meloidogyne incognita của thảo mộc TM1 (bó sở) trong ủiều kiện nhà lưới, kết quả (bảng 3.7) cho thấy với liều lượng TM1 sử dụng là 30g/chậu thỡ hiệu lực làm giảm số lượng tuyến trựng tăng từ 19, 5% sau 25 ngày xử lý lờn 83, 8% sau 45 ngày xử lý. Với liều lượng sử dụng là 40g/chậu thỡ hiệu lực tăng từ 38,5% lờn 87,4% và ở liều lượng 50g/chậu thỡ hiệu lực ủạt từ 63.7% tăng lờn 92.1%.
Kết quả theo dừi thu ủược ủối với thảo mộc TM2 (bó trẩu) cũng cú xu hướng tương tự nhưủối với thảo mộc TM 1 (bó sở), cụ thể:
+ Khi sử dụng TM 2 với liều lượng 30g, 40g và 50 g/chậu thỡ ở 25 ngày sau xử lý cú số nốt sưng tương ứng là 21,0; 17,7 và 12,7 nốt sưng/bộ rễ. Nhưng ủến thời ủiểm 45 ngày sau xử lý thỡ số nốt sưng chỉ cũn 20,3; 14,3 và 13,7 nốt sưng/bộ rễ.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...46 + Hiệu lực hạn chế tuyến trựng nốt sưng Meloidogyne incognita trờn rễ cà chua của thảo mộc TM2 ở 25 ngày sau xử lý tương ứng với cỏc liều lượng TM1 ủó sử dụng là 30, 40 và 50 g/chậu ủạt 64,5; 43,4 và 29,5%, nhưng ủến thời ủiểm 45 ngày sau xử lý thỡ hiệu quả ủạt tương ứng là 82,4%, 85,7% và 90,0%. Như vậy, hiệu quả hạn chế tuyến trựng nốt sưng của TM2 khi dựng ở liều lượng cao (50 g/chậu) lại cú biểu hiện chậm hơn so với TM 1.
Bảng 4.7. Hiệu quả hạn chế số lượng tuyến trựng nốt sưng M.incognita trờn rễ cà chua của TM1 và TM2
(Nhà lưới Viện BVTV, 2010)
Hiệu quả sau 25 ngày Hiệu quả sau 45 ngày Cụng thức Số TT trước nhiễm Số nốt sưng/ bộ rễ Số TT/ bộ rễ Hiệu lực (%) Số nốt sưng/ Bộ rễ Số TT/ bộ rễ Hiệu lực (%) CT1 2.500 24,7a 61,8a 19,5b 23,6a 214,9a 83,7a CT2 2.500 21,7b 47,2b 38,5b 13,6b 167,2b 87,4ab CT3 2.500 17,3c 27,9c 63,7a 11,0c 104,9d 92,1b CT4 2.500 21,0b 64,5a 16,0a 20,3a 232,6a 82,4b CT5 2.500 17,7c 43,4b 43,5b 14,3b 188,7b 85,7b CT6 2.500 12,7d 29,5c 61,6c 13,7b 132,1c 90,0a CT7 (ð/c) 2.500 32, 3 76,8 - 81,7 1.324.4 - Ghi chỳ: CT 1: Bó sở 30 g/chậu CT 4: Bó trẩu 30 g/chậu CT 2: Bó sở 40 g/chậu CT 5: Bó trẩu 50 g/chậu CT 3: Bó sở 50 g/chậu CT 6: Bó trẩu 40 g/chậu CT 7: ðối chứng (khụng xử lý) TT: Tuyến trựng
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...47 So sỏnh khả năng hạn chế số lượng tuyến trựng phỏt sinh giữa TM1 và TM2 thỡ chế phẩm thảo dược TM1 cú xu hướng cho hiệu quả cao hơn so với TM2. Tuy nhiờn, qua xử lý thống kờ thỡ khụng cú sự sai khỏc cú ý nghĩa. Hiệu lực của TM 2 ở thời ủiểm sau 45 ngày sau xử lý tương ứng với cỏc liều lượng sử dụng 30, 40 và 50 g/chậu ủạt 82,4%, 85,7% và 90,0%. cũn hiệu lực của TM 1 là 83,7%, 87,4% và 92,1%.
Như vậy, cả 2 loại thảo dược TM1 và TM2 ủều cú hiệu quả cao trong hạn chế tuyến trựng nốt sưng Meloidogyne incognita. Qua quan sỏt thực tế cũng nhận thấy ở cỏc cụng thức xử lý thảo mộc TM1 và TM2 thỡ cõy cà chua cú bộ rễ phỏt triển khỏe, rễ non dài và cú màu trắng ủẹp.
19.5 83.7 38.5 87.4 63.7 92.1 16 82.4 43.5 85.7 61.6 90 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
HQ sau 25 ngày HQ sau 45 ngày
H i ệ u l ự c (% ) Cụng thức thớ nghiệm CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6
Hỡnh 4.1. Hiệu quả hạn chế tuyến trựng nốt sưng Meloidogyne incognita
trờn rễ cà chua của TM1 và TM2 sau 25 ngày và 45 ngày xử lý
Trỡnh bày kết quả thớ nghiệm năm 2010 trờn hỡnh 4.1. cũng cho thấy cả hai loại thảo dược TM1 và TM2 ủều cú hiệu quả cao trong hạn chế tuyến trựng nốt sưng Meloidogyne sp. Với liều lượng 50g/chậu cho hiệu lực hạn chế
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...48 tuyến trựng cao nhất ủạt 92,1% (với TM1- bó sở) và 90,0% (với TM 2- bó trẩu). Nhưng với liều lượng xử lý 40g/chậu thỡ hiệu lực hạn chế tuyến trựng nốt sưng tương ứng ủạt 87, 4% và 85, 7% .
4.2. Khả năng tồn tại của nấm ủối khỏng Trichoderma trong mụi trường cú
thảo mộc
Theo nhiều tỏc giả trong và ngoài nước, việc phối trộn giữa cỏc tỏc nhõn sinh học hoặc giữa tỏc nhõn sinh học với thảo mộc cần phải cú sự nghiờn cứu cụ thể về sự tương tỏc giữa cỏc tỏc nhõn. Vỡ giữa chỳng cú thể cú tỏc ủộng ức chế, kỡm hóm sự phỏt triển hoặc làm mất ủi hiệu quả hạn chế dịch hại của nhau so với khi sử dụng riờng rẽ.
Thừa hưởng kết quả nghiờn cứu ủó cú của Viện Bảo vệ thực vật ủó thu thập và tuyển chọn ủược 2 chủng nấm ủối khỏng cú hoạt lực cao là
Trichoderma harzianum và Trichoderma viride. ðể tỡm hiểu khả năng phối trộn giữa nấm Trichoderma với cỏc thảo mộc, ủúng gúp tư liệu ủịnh hướng cho việc phỏt triển chế phẩm sinh học phục vụ sản xuất, chỳng tụi ủó tiến hành ủỏnh giỏ khả năng tồn tại của nấm trong mụi trường cú thảo mộc.
Kết quả thớ nghiệm ủối với chủng nấm Trichoderma viride (bảng 4.8) cho thấy chủng nấm này cú khả năng phỏt triển tốt trờn mụi trường Czapek- Dox cú bổ sung 3,0% dịch chiết bó trẩu TM2. Cụ thể sau 3 ngày nuụi cấy ủường kớnh khuẩn lạc của nấm Trichoderma ủạt 7,5 cm, ủối chứng ủạt 8,9 cm và sau 5 ngày cả cụng thức thớ nghiệm và cụng thức ủối chứng ủường kớnh khuẩn lạc khụng sai khỏc, khuẩn lạc mọc trựm kớn ủĩa petri, ủạt tới 9,0cm.
Tuy nhiờn, khi ủỏnh giỏ sự phỏt triển của nấm Trichoderma viride trờn mụi trường bổ sung 3,0% dịch chiết bó sở TM1. Kết quả theo dừi nhận thấy nấm ủối khỏng hoàn toàn khụng cú dấu hiệu phỏt triển ở tất cả cỏc cụng thức.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...49 Như vậy, dịch chiết bó sở TM1 ủó ức chế hoàn toàn sự phỏt triển của nấm ủối khỏng Trichoderma viride. Vỡ vậy, khụng thể hỗn hợp giữa nấm
Tr. viride với thảo mộc TM1 khi sử dụng.
Bảng 4.8. Hiệu quả của dịch chiết bó trẩu (TM2) tới sự phỏt triển của nấm Trichoderma viride
(Viện BVTV, 2010)
ðường kớnh khuẩn lạc sau thời
gian nuụi cấy (cm) Cụng thức
3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày
T0C RH(%)
Mụi trường Czapek cú chứa
3,0 % dịch chiết của TM 2 7,5 9,00 9,00 9,00 ðối chứng (mụi trường Czapek cú chứa 3% nước cất) 8,9 9,00 9,00 9,00 LSD0.5 ns ns ns Ns CV (%) 6,8 - - - 28,6 81,8
Thớ nghiệm với chủng nấm Trichoderma harzianum, kết quả cho thấy nấm ủối khỏng phỏt triển tốt trờn mụi trường cú thảo mộc là bó trẩu TM2, cho dự hỗn hợp vào mụi trường với liều lượng cao tới 50 g/lớt mụi trường.
Với liều lượng thảo mộc là 15 g/lit mụi trường thỡ chỉ sau 4 ngày thỡ ủường kớnh khuẩn lạc ủó ủạt mức tối ủa 9,0 cm. Nếu liều lượng thảo mộc TM2 là 30- 50 g/lớt mụi trường thỡ sau 5 ngày thớ nghiệm ủường kớnh khuẩn lạc cũng ủạt tới 9,0 cm.
Khi phối trộn với liều lượng TM2 là 50g/lớt mụi trường thỡ sau 5 ngày khuẩn lạc vẫn ủạt tới 8,3 cm. Như vậy, thảo mộc là bó trẩu (TM2) hoàn toàn khụng cú hiện tượng ức chế hoặc gõy ảnh hưởng ủến sự tồn tại và phỏt triển của nấm Trichoderma harzianum (bảng 4.9).
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...50
Bảng 4.9. Sự phỏt triển của nấm Trichoderma harzianum
trờn mụi trường chứa thảo dược TM2 với liều lượng khỏc nhau (Viện BVTV, thỏng 4/2010)
ðường kớnh khuẩn lạc sau nuụi cấy (cm) Cụng thức
(g/lớt) 2 ngày 3 ngày 4 ngày 5 ngày T
0C RH(%)
15 2,7a 6,8a 9,0a 9,0a
30 1,8b 4,9b 7,6b 9,0a
50 1,2c 3,8c 5,9c 8,3b
ð/C 2,5a 6,9a 9,0a 9,0a
LSD 0.05 0,23 0,35 0,3 0,3
CV (%) 13,6 7,5 4,5 4,5
23,13 76,5
Kết quả một thớ nghiệm khỏc (bảng 4.10) cũng cho thấy chủng nấm ủối khỏng Tr. harzianum cũng phỏt triển tốt trờn mụi trường Czapek-Dox cú chứa 20% thảo dược TM2. Sau 10 ngày lõy nhiễm nhưng nấm Trichoderma vẫn phỏt triển bỡnh thường như khi cấy riờng rẽ. ðường kớnh khuẩn lạc sau 5 ngày cũng ủạt tới 9 cm mọc trựm kớn ủĩa petri nhưủối chứng khụng phối trộn thảo mộc TM2. Như vậy, thảo mộc khụng ức chế khả năng sự phỏt triển của nấm.
Từ kết quả thớ nghiệm cho thấy mục ủớch cần hướng tới là lựa chọn nguyờn liệu hỗn hợp cho thớch hợp. Nếu kết hợp trừ tuyến trựng và nấm bệnh hại rễ cõy trồng theo phương thức hỗn hợp thỡ chỉ cú thể hỗn hợp giữa nấm ủối khỏng với bó trẩu và thanh hao hoa vàng. Nếu nhu cầu sản xuất với mục ủớch chỉ cần hạn chế tuyến trựng thỡ chỉ sử dụng riờng nguyờn liệu bó sở.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...51
Bảng 4.10. Sự phỏt triển của nấm T. harzianum
trờn mụi trường Czapeck-Dox phối trộn 20% thảo mộc TM2 (Viện BVTV, thỏng 4 /2010)
ðường kớnh tản nấm ở cỏc ngày sau khi cấy (cm)
Cụng thức thớ nghiệm
3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày
T. harzianum + thảo mộc TM2 7,9 9,00 9,00 9,00
T. harzianum (ủối chứng) 8,1 9,00 9,00 9,00
4.3. XÁC ðỊNH TỶ LỆ HỖN HỢP GIỮA NẤM ðỐI KHÁNG VÀ THẢO
MỘC ðà LỰA CHỌN ðỂ Cể HIỆU LỰC PHềNG TRỪ CAO
Việc phối trộn giữa nấm ủối khỏng và thảo mộc theo một tỷ lệ nhất ủịnh, sao cho phỏt huy ủược hiệu quả diệt tuyến trựng của thảo mộc, hạn chế sự phỏt triển xõm nhiễm nấm bệnh hại của nấm ủối khỏng. Trong cỏc năm qua, việc nghiờn cứu theo hướng này nhằm ủịnh hướng tỡm hiểu khả năng phỏt triển chế phẩm sinh học bảo vệ thực vật.
ðể gúp phần cú thờm tư liệu làm cơ sở cho việc nghiờn cứu phỏt triển chế phẩm, ủề tài ủó tiến hành với 3 tổ hợp phối trộn theo cỏc tỷ lệ khỏc nhau giữa thảo mộc và nấm ủối khỏng Trichoderma. Cụ thể:
Tổ hợp 1: gồm 10% T. harzianum + 90% thảo mộc TM2 Tổ hợp 2: gồm 5% T. harzianum + 95% thảo mộc TM2 Tổ hợp 3: gồm 2% T. harzianum + 98% thảo mộc TM2
Kết quả thớ nghiệm ủỏnh giỏ hiệu lực hạn chế tuyến trựng Meloidogyne
incognita trờn cà chua trong nhà lưới tại Viện Bảo vệ thực vật trong năm 2010 ủó cho thấy:
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...52 Theo dừi số lượng tuyến trựng Meloidogyne incognita phỏt sinh và tớnh toỏn hiệu quả hạn chế số lượng tuyến trựng trờn rễ cà chua ở cỏc tổ hợp phối trộn khỏc nhau trong ủiều kiện nhà lưới (bảng 4.11) cho thấy:
Bảng 4.11. Hiệu quả hạn chế tuyến trựng nốt sưng M. incognita
của cỏc tổ hợp phối trộn giữa nấm ủối khỏng và thảo mộc TM 2 trong nhà lưới ( Viện BVTV, thỏng 7-8/2010)
Hiệu quả sau 1 thỏng Cụng thức Thành phần tổ hợp chế phẩm Số lượng tuyến trựng nhiễm
trước bún/ chậu Số tuyến trựng/ bộ rễ Hiệu quả (%) CT1 10% T. harzianum + 90% thảo mộc TM2 1.360 887,00 b 52,52 CT2 5% T. harzianum và 95% thảo mộc TM2 1.360 370,00 c 80,19 CT3 2% T. harzianum 98% thảo mộc TM2 1.360 124,20 d 92,07 CT4 Khụng cú chế phẩm (ủối chứng) 1.360 1.868,00 a - LSD 0.05 9,7 CV (%) 9,9 Ghi chỳ: TT: Tuyến trựng Với tỷ lệ phối trộn là 10% nấm T. harzianum và 90% thảo mộc TM2 thỡ sau 1 thỏng xử lý, số tuyến trựng trờn rễ là 887 con/bộ rễ. Hiệu quả hạn chế tuyến trựng so với ủối chứng ủạt 52,52 % sau 1 thỏng xử lý.
Tổ hợp phối trộn gồm 5% nấm ủối khỏng T. harzianum và 95% thảo mộc TM2 thỡ số lượng tuyến trựng xõm nhiễm vào rễ cõy ủạt 370 con/bộ rễ sau 1 thỏng xử lý. Hiệu quả hạn chếủạt ủược sau 1 thỏng xử lý là 80,19 %.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ nụng nghiệp ...53 Khi phối trộn 2% nấm T. harzianum và 98% thảo mộc TM2 thỡ số tuyến trựng xõm nhiễm giảm thấp hơn nhiều, chớ cú 124,2 con/bộ rễ. Trong khi ủú ở ủối chứng số lượng tuyến trựng xõm nhiễm trờn rễ lờn tới 1.868