2.3.2.1. Sự hình thành kháng thể kháng virus dịch tả vịt * Miễn dịch chủ ựộng tự nhiên:
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 27
kháng virus dịch tả vịt trong cơ thể. Theo kết quả nghiên cứu của một số tác giả thì vịt khỏi bệnh có thể bị mắc trở lạị Bệnh tái phát thường ở thể ẩn, không có triệu chứng rõ. Nếu khám vịt ốm, chỉ thấy bên dưới lưỡi có nốt rộp, từ nốt rộp có tác giả ựã phân lập ựược virus dịch tả vịt. Do mang ựặc tắnh của một virus Herpes, nên khi gặp ựiều kiện thuận lợi, virus lại tiếp tục phát triển và gây bệnh làm thành nốt rộp mớị Tác giả ựã ựề xuất phương pháp kiểm tra bệnh tắch dịch tả vịt ẩn tắnh bằng cách khám nốt rộp ở mặt dưới của lưỡi (Trần Minh Châu, 1987) [11].
*Miễn dịch chủ ựộng nhân tạo:
Vịt có ựược khả năng miễn dịch này nhờ ựược tiêm vacxin. Hiệu lực và ựộ dài ựáp ứng miễn dịch phụ thuộc vào nhiều yếu tố như loại vacxin, ựường ựưa vacxin vào cơ thể, ... Trên thực tế, khả năng ựáp ứng miễn dịch của ựàn vịt khi sử dụng vacxin dịch tả vịt vô hoạt thấp hơn khi dùng vacxin nhược ựộc. Việc tiêm nhắc lại nhiều lần hoặc tiêm nhắc lại với số lượng lớn kháng nguyên làm sản sinh ra một lượng kháng thể lớn hơn (Fenner & cs, 1974) [40].
Về ựường ựưa vacxin, Shawky S.A và Shandhu T.S (1997) [54]cho rằng: ựường ựưa vacxin vào cơ thể tốt nhất là tiêm bắp hoặc tiêm dưới da; phương pháp nhỏ mắt, nhỏ mũi ựòi hỏi nhiều thời gian mà hầu như không gây ựược miễn dịch . Tuy nhiên tại Việt Nam, nghiên cứu về hiệu lực phòng bệnh của vacxin dịch tả vịt khi áp dụng quy trình tiêm chủng khác nhau trong sản xuất, Nguyễn đức Hiền (1999) [19] cho biết với phương pháp nhỏ mắt hay tiêm bắp hoặc phối hợp cả hai phương pháp trên ựều ựáp ứng miễn dịch không khác nhau nhiềụ Tuổi tiêm chủng ựầu tiên là 14 ngày tuổi thì có ảnh hưởng tốt ựến hiệu quả sử dụng vacxin.
* Miễn dịch bị ựộng tự nhiên:
Kháng thể của vịt mẹ ựược truyền cho vịt con qua lòng ựỏ trứng. Ở những vịt con một ngày tuổi, hàm lượng kháng thể dịch tả vịt trong máu xấp xỉ bằng hàm lượng kháng thể trong lòng ựỏ. Theo thời gian, hàm lượng kháng thể sẽ giảm dần
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 28
và chỉ tồn tại ở vịt con tối ựa là tới ngày 21. Dù vịt con có ựược hưởng kháng thể từ vịt mẹ, nhưng nếu bị nhiễm nhiều virus thì vẫn có thể bị chết vì bệnh dịch tả vịt. Như vậy, kháng thể do vịt mẹ truyền cho chỉ bảo vệ ựược vịt con trong những ngày ựầu sau khi nở nếu chúng bị nhiễm một lượng virus rất ắt (Fenner & cs, 1974) [40], (Leibovitz, 1991) [48].
* Miễn dịch bị ựộng nhân tạo:
Là trường hợp can thiệp vào ựàn vịt (ựã bị mắc bệnh dịch tả vịt tự nhiên) bằng kháng thể dịch tả vịt. Tuy nhiên, việc tạo miễn dịch dạng này không tồn tại lâu trong cơ thể và cũng không mang lại nhiều ý nghĩa trong thực tiễn.
2.3.2.2. Các loại kháng thể chống virus dịch tả vịt.
để chống virus dịch tả vịt, có 2 loại kháng thể ựược sản sinh ra là kháng thể dịch thể và kháng thể tế bào
* Kháng thể dịch thể: là các globulin miễn dịch hoạt ựộng chủ yếu khi virus còn trong máụ Chúng phong bế sự hấp thụ virus lên bề mặt tế bào, ngăn cản sự hoà màng vỏ virus vào màng tế bào, ngăn cản virus phá vỡ màng của hốc thực bào hoặc phá màng phân tử vỏ của virus, ngăn cản sự tái sao của chúng (Vũ Triệu An, 1997) [1].
Trong miễn dịch dịch thể, hàm lượng kháng thể sinh ra nhiều hay ắt phụ thuộc vào loại kháng nguyên ựược sử dụng, số loại kháng nguyên, số lần ựược kắch thắch và khả năng ựáp ứng miễn dịch của con vật. đối với bệnh dịch tả vịt, lượng kháng thể dịch thể ựược sinh ra trong những trường hợp vịt bị nhiễm bệnh tự nhiên thường thấp và chỉ tồn tại trong một thời gian ngắn (Trần Minh Châu, 1987) [11].
*Kháng thể tế bào: ựáp ứng miễn dịch tế bào là phương thức bảo vệ chắnh của cơ thể chống lại virus thông qua những tế bào lympho ựộc Tc (hay CTL: Cytotoxic T Lymphocite). đa số các tế bào này mang dấu ấn CD8+ (Cluster of
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 29
Differenciation 8+: glucoprotein bề mặt tế bào thường có trên tế bào Tc nhận biết phân tử MHC lớp I trên tế bào ựắch) và hoạt ựộng theo cơ chế có hạn bởi MHC (Major Histocompatibility Complex: phức hợp mô Ờ những phân tử có mặt trên tế bào làm nhiệm vụ trình diện kháng nguyên) nghĩa là chúng chỉ có tác dụng khi tế bào bị nhiễm mang cùng phân tử MHC Ị Hầu hết các tế bào trong cơ thể ựều có MHC I nghĩa là có thể bị Tc tấn công khi bị nhiễm virus. Cơ chế hoạt ựộng của CTL là gây chết tế bào bị nhiễm theo chương trình (apoptosis) ựồng thời tiết cytokin như IFN (Interferon), TNF (tumoz necrosin factor: yếu tố hoại tử u) ựể ức chế virus tái sao và hoạt hoá những tế bào khác tăng biểu lộ các phân tử MHC. Nhưng chắnh cơ chế này trong một số trường hợp lại gây ra sự phá huỷ tế bào rộng lớn hơn. Trong nhiều trường hợp, sự phối hợp của cả hai ựáp ứng miễn dịch dịch thể và miễn dịch tế bào là nguyên nhân của trạng thái bệnh lý nặng nề. Guiping Y & cs (2007) [42], bước ựầu nghiên cứu về khả năng chết theo chương trình (apoptosis) của tế bào lympho ở vịt ựã gây ra bởi sự tiêm truyền virus dịch tả vịt dẫn ựến sự phân huỷ tế bào lymphọ Sự chết theo chương trình của tế bào lympho có thể ựóng vai trò quan trọng trong sinh bệnh học của bệnh dịch tả vịt. đáp ứng miễn dịch tế bào có vai trò quan trọng trong miễn dịch của cơ thể với virus dịch tả vịt (Dardini, ẠH., and W. R. Hess, 1968) [37]. Qua kết quả nghiên cứu của Jansen thấy rằng: một số vịt sau khi ựược tiêm vacxin có hàm lượng kháng thể dịch thể rất thấp nhưng khi ựem thử thách với virus dịch tả vịt cường ựộc thì vẫn ựược bảo hộ. Jansen cho rằng trường hợp này có vai trò ựáng kể của kháng thể tế bào và nhấn mạnh ựến tầm quan trọng của việc dùng virus cường ựộc ựể thử hiệu lực vacxin.
2.3.2.3. độ dài miễn dịch
Khi ựưa vacxin vào cơ thể, kháng thể chưa sinh ra ngay lập tức mà phải sau một thời gian tiềm tàng, dài hay ngắn phụ thuộc vào kháng nguyên chứa trong vacxin và sự xâm nhập của kháng nguyên vacxin lần ựầu hay lần thứ hai,
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 30
thứ ba,...Sau ựó kháng thể mới ựược sinh ra, lượng kháng thể tăng dần, ựạt mức cao nhất 2-3 tuần rồi giảm dần và mất ựi sau vài tháng hoặc vài năm.
Sử dụng vacxin lần ựầu ựáp ứng miễn dịch ựược gọi là sơ cấp hay tiên phát. Sử dụng vacxin lần hai ựáp ứng miễn dịch ựược gọi là thứ cấp hay thứ phát. Trong ựáp ứng miễn dịch thứ phát, thời gian tiềm tàng ngắn hơn, lượng kháng thể sinh ra nhiều hơn và thời gian xuất hiện kháng thể sớm hơn.
Sự khác biệt của ựáp ứng miễn dịch sơ cấp và thứ cấp là do vai trò của các tế bào nhớ miễn dịch. Trong ựáp ứng miễn dịch thứ cấp, các tế bào này phát triển nhanh và mạnh, tạo ra một lớp tế bào sản xuất kháng thể nhanh và nhiều hơn nên kháng thể xuất hiện sớm, hàm lượng nhiều hơn rõ rệt. Nếu cách lần dùng vacxin ựầu tiên 3-4 tuần, sử dụng tiếp lần thứ hai thì ựáp ứng miễn dịch sẽ nhanh hơn, mạnh hơn, có thể gấp hàng trăm lần và thời gian miễn dịch dài hơn. đây là cơ sở khoa học cho việc tiêm phòng vacxin nhắc lại tạo mức ựộ miễn dịch cao cho cơ thể.
Khi kiểm tra hàm lượng kháng thể trong cơ thể ựã sử dụng vacxin kết hợp với phương pháp công cường ựộc, người ta nhận thấy rằng: không phải kháng thể cứ xuất hiện trong máu là con vật ựược bảo vệ khỏi sự tấn công của mầm bệnh cường ựộc mà lượng kháng thể phải ựạt ựến một trị số nhất ựịnh thì cơ thể mới có mức ựộ miễn dịch bảo vệ. Trị số kháng thể này ựược gọi là ngưỡng bảo hộ. Hàm lượng kháng thể càng cao hơn ngưỡng bảo hộ thì mức ựộ miễn dịch của cơ thể càng cao và ngược lạị
Mỗi loại vacxin khi ựưa vào cơ thể sẽ gây ra ựáp ứng miễn dịch và trạng thái miễn dịch ở ựộng vật ựược duy trì một thời gian nhất ựịnh gọi là ựộ ựài miễn dịch. Tuỳ từng loại vacxin mà thời gian này daì hay ngắn khác nhau, khi hết thời gian ựó, cơ thể không còn khả năng chống lại mầm bệnh nữa, vì vậy người ta phải tiến hành tái chủng.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 31
cứ khoảng một thời gian nhất ựịnh nên tái chủng vacxin một lần cho ựộng vật tuỳ theo loại vacxin, tuỳ theo ựộng vật và tình hình dịch tễ.
Vacxin vô hoạt, nhất là vacxin vi khuẩn thường có thời gian miễn dịch ngắn, 3-9 tháng. Vacxin nhược ựộc, nhất là vacxin virus thường cho ựáp ứng miễn dịch mạnh, ổn ựịnh và thời gian miễn dịch keó dài, có thể ựược một năm thậm chắ suốt ựờị
Trần Minh Châu (1987) [11] nghiên cứu về ựộ dài miễn dịch của vịt khi ựược tiêm vacxin dịch tả vịt nuôi cấy trên phôi vịt cho biết: vịt con của vịt mẹ chưa ựược miễn dịch, khi ựược tiêm vacxin có khả năng sản sinh miễn dịch chủ ựộng nhưng sức miễn dịch không bền. Vịt con ựược miễn dịch chắc chắn trong vòng 45 ngày, sau ựó chỉ miễn dịch ựược 50% ựến 3 tháng tuổị Vịt mẹ có nhiều kháng thể thì vịt con cũng nhận ựược kháng thể tiếp thu nhiều hơn. Kháng thể càng nhiều thì sự tồn tại của nó trong vịt con cũng dài hơn và mất hết vào lúc 20-30 ngày tuổị Trong ựàn vịt con có kháng thể tiếp thu, khi ựược tiêm vacxin thì kháng thể vẫn ựược sản sinh rạ Trong trường hợp vịt mẹ ựã ựược tiêm vacxin trước khi ựẻ 6 tháng, kháng thể tiếp thu ở vịt con ắt hơn, nên vịt con sinh ra kháng thể nhiều hơn. Trong trường hợp vịt mẹ mới ựược tiêm vacxin, vịt con ựược hưởng nhiều kháng thể từ mẹ thì sức miễn dịch chủ ựộng của chúng bị giảm ựi nên sức ựề kháng của chúng cũng giảm. Như vậy, thời gian tiêm phòng cho vịt mẹ ảnh hưởng rõ rệt ựến sự miễn dịch chủ ựộng của vịt con khi ựược tiêm vacxin lúc một ngày tuổị
Mức ựộ ựáp ứng miễn dịch của vịt với virus dịch tả vịt có thể ựược ựánh giá bằng phương pháp huyết thanh học và công cường ựộc.
* Phương pháp huyết thanh học:
Kháng thể bảo hộ ựàn vịt với virus dịch tả vịt là kháng thể trung hoà. Khả năng bảo hộ cơ thể chống virus cường ựộc có mối tương quan với hiệu giá kháng thể (Brand C J., and D. Ẹ Docherty, 1984) [36]. Vậy có thể sử dụng phản
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 32
ứng huyết thanh học ựể ựánh giá mức ựộ miễn dịch của ựàn vịt . Phản ứng trung hoà ựược sử dụng rộng rãi ựể phát hiện kháng thể trung hoà trong huết thanh.
Theo OIE (2006) [52]sử dụng phản ứng trung hoà ựể xác ựịnh hàm lượng kháng thể kháng vacxin dịch tả vịt, nếu chỉ số trung hoà NI (Neutranisation Index) từ 0-1,5 thì ựược coi là âm tắnh, trên 1,75 coi là dương tắnh.
Woolcock P.R. and J. Fabricant (1991) [59] khi làm phản ứng trung hoà theo phương pháp huyết thanh pha loãng, virus cố ựịnh; vào ngày 21 sau khi tiêm vacxin nếu hiệu giá kháng thể trong huyết thanh ựạt từ 1/59-1/250 thì vacxin ựược coi là có hiệu lực, bảo hộ ựược ựàn vịt.
*Phương pháp công cường ựộc:
được sử dụng với mục ựắch xác ựịnh mức ựộ ựáp ứng miễn dịch của cơ thể sau khi tiếp xúc với virus vacxin. Phương pháp này ựánh giá ựúng mức ựộ bảo hộ cho ựàn vịt. Tuy nhiên, do một số khó khăn ựặc biệt là vấn ựề an toàn dịch bệnh nên không phải lúc nào phương pháp này cũng ựược sử dụng.
Người ta có thể xác ựịnh hàm lượng kháng thể trong cơ thể vịt sau khi ựược tiêm vacxin cùng với những chỉ tiêu trên làm căn cứ ựể xác ựịnh ựộ dài miễn dịch và thời gian cần thiết cho việc tiêm nhắc lại ựối với loại vacxin ựó.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ kinh tế nông nghiệp ... 33