VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1. đối tượng, nguyên liệu nghiên cứu
đối tượng nghiên cứu: ựà ựiểu từ 0 Ờ 3 tháng tuổi mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli nuôi tại trạm nghiên cứu ựà ựiểu Ba Vì Ờ Hà Nộị
Nguyên liệu nghiên cứu: dụng cụ, máy móc, hoá chất trong phòng thắ nghiệm.
3.2. địa ựiểm nghiên cứu
- Trạm nghiên cứu ựà ựiểu Ba Vì Ờ Hà Nộị
- Phòng thắ nghiệm bộ môn Nội chẩn - Dược - độc chất - Khoa Thú y - Trường đại học Nông nghiệp - Hà nộị
- Phòng thắ nghiệm bộ môn Bệnh lý - Khoa Thú y - Trường đại học Nông nghiệp - Hà nộị
- Phòng thắ nghiệm bộ môn Vi sinh vật Ờ Truyền nhiễm - Khoa Thú y - Trường đại học Nông nghiệp - Hà nộị
- Bộ môn Vi trùng - Viện Thú y Quốc giạ
3.3. Nội dung và phương pháp nghiên cứu
3.3.1. điều tra tình hình mắc bệnh trên ựàn ựà ựiểu từ 0-3 tháng tuổi từ năm 2006 Ờ 2010 năm 2006 Ờ 2010
điều tra qua số liệu thống kê của phòng kỹ thuật - Trạm nghiên cứu ựà ựiểu Ba Vì Ờ Hà Nộị
3.3.2. Theo dõi các chỉ tiêu lâm sàng ở ựà ựiểu từ 0 Ờ 3 tháng tuổi bị viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli ruột tiêu chảy do Ẹcoli
- Thân nhiệt (oC): dùng nhiệt kế ựo ở trực tràng (sáng, trưa, chiều). - Tần số hô hấp (lần/phút): ựùng ống nghe nghe âm phổị
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 29 - Theo dõi thể trạng, số lần ựi ỉa trong ngày, tình trạng phânẦ bằng quan sát, theo dõi hàng ngàỵ
3.3.3. Theo dõi một số chỉ tiêu sinh lý, sinh hoá máu ở ựà ựiểu từ 0 Ờ 3 tháng tuổi bị viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli tháng tuổi bị viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli
3.3.3.1. Các chỉ tiêu sinh lý máụ
- Số lượng hồng cầu (triệu/ mm3): dùng buồng ựếm Newbauer. - Số lượng bạch cầu (nghìn/ mm3): dùng buồng ựếm Newbauer. - Công thức bạch cầu (%): theo sự phân loại của Schilling.
- Tỷ khối huyết cầu (Hematocrit - TKHC) (%): theo phương pháp Wintrobẹ - Hàm lượng huyết sắc tố (Hemoglobin-Hb) (g%): theo phương pháp Shallị - Lượng huyết sắc tố trung bình của hồng cầu (pg): biểu thị lượng huyết sắc tố trong một hồng cầu và tắnh theo công thức.
Số gam % huyết sắc tố ừ 10
Lượng huyết sắc tố trung bình của hồng cầu (pg) =
Số triệu hồng cầu/mm3
- Thể tắch trung bình của hồng cầu (Vhc): đánh giá ựộ lớn của hồng cầụ đơn vị tắnh là ộm3 và tắnh theo công thức.
Tỷ khối hồng cầu (Hb) ừ 10
Thể tắch trung bình của hồng cầu =
Số triệu hồng cầu/mm3
- Sức kháng hồng cầu (%NaCl): là sức kháng của màng hồng cầu ở nồng ựộ muối NaCl loãng.
3.3.3.2. Các chỉ tiêu sinh hoá máu
- Hàm lượng protein tổng số trong huyết thanh và các tiểu phần protein: theo phương pháp ựiện di trên phiến accetatcelulọ
- độ dự trữ kiềm trong máu (mg%): theo phương pháp Nevodop. - Hàm lượng ựường huyết (mmol/l): bằng máy Glucomettez.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 30 - Hàm lượng Natri và Kali trong huyết thanh: bằng phương pháp quang kế ngọn lửạ
- Xác ựịnh hàm lượng men sGOT và sGTP: theo phương pháp Reitmann và Frankel cải tiến.
3.3.4. Xác ựịnh tổn thương bệnh lý ựường tiêu hóa ở ựà ựiểu từ 0 - 3 tháng tuổi bị viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli tuổi bị viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli
- Mổ khám kiểm tra bệnh tắch ựại thể: mổ khám toàn diện và quan sát tổn thương ựại thể.
- Xác ựịnh tổn thương vi thể ựường ruột: làm tiêu bản tổ chức ruột bằng phương pháp mô học thông thường.
3.3.5. Xây dựng phác ựồ ựiều trị thử nghiệm
Thắ nghiệm chia làm 2 lô, mỗi lô 10 ựà ựiểu từ 0 Ờ 3 tháng tuổi mắc bệnh viêm ruột tiêu chảy do Ẹcoli và mỗi lô thắ nghiệm ựược xây dựng một phác ựồ ựiều trị khác nhaụ
+ Lô I: dùng kháng sinh Imipeneme tiêm bắp với liều 50mg/kgP/ngày, liệu trình 5 ngày liêu tục, kết hợp với thuốc trợ sức, trợ lực, nâng cao sức ựề kháng.
+ Lô II: Sử dụng Norfloxacin uống với liều 10mg/kgP/ngày, liệu trình 5 ngày liêu tục, kết hợp với thuốc trợ sức, trợ lực, nâng cao sức ựề kháng.
Trong quá trình ựiều trị chúng tôi tiến hành theo dõi số con khỏi bệnh và thời gian khỏi bệnh. Từ ựó tắnh tỷ lệ khỏi bệnh cho mỗi phác ựồ ựiều trị.
3.3.6. Xử lý số liệu
Số liệu thu ựược trong quá trình nghiên cứu ựược xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học theo chương trình Excel và Minitab:
- Số trung bình: n X X n 1 i i ∑ = =
Trong ựó: Xi: giá trị các mẫu quan sát X: số trung bình
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 31
n: dung lượng mẫu
- độ lệch chuẩn: ( ) 1 n X Xi 2 − − Σ = δ Với n < 30 - Sai số trung bình: mx = ổ 1 n S − Với n < 30
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 32