- Thường phun rhodamine, hoặc hơ trong hơi iod để xác định các vạch lipid sau giai đoạn tách bằng sắc
c) Phân tách lipid bay hơi bằng phương pháp sắc ký khí-lỏng. ký khí-lỏng.
Được sử dụng phân tích hỗn hợp lipid cĩ độ bay hơi
khác nhau được dịng khí trơ (helium) vận chuyển và tách riêng biệt từng phân đoạn trong cột sắc ký.
Bình thường lipid ở dạng bay hơi nên phả xử lý trong
hỗn hợp methanol/HCl hoặc methanol/NaOH ở nhiệt độ
cao biến chúng thành dẫn xuất methyl ester (thay vì ở dạng ester với glycerol) trước khi đưa hỗn hợp lipid vào cột tách.
Sau đĩ tiêm mẫu vào cột sắc ký, nung làm bay hơi các
dẫn xuất methyl ester.
Những acid béo ngấm mạnh vào nền cột sẽ được khí
mang ra khỏi cột nhanh nhất.
Sự phân tách phụ thuộc vào nền hấp phụ của cột và
điểm sơi của từng phần lipid riêng trong hỗn hợp cần tách.
d) Xác định cấu trúc lipid bằng phương pháp thủy giải đặc hiệu. thủy giải đặc hiệu.
• Sử dụng enzyme phospholipase thủy giải cắt
đặc hiệu một cách chọn lọc liên kết trong phân tử phospholipid, tạo ra sản phẩm cĩ độ hịa
tan và đặc tính tách sắc ký khác nhau(Ví dụ: dùng phospholipase C cắt phosphocholine tách khỏi phosphatidylcholine), cho phép xác định thành phần cấu trúc lipid.
• Ngồi ra, phương pháp khối phổ kế cũng
được dùng để xác địng bộ khung carbon và vị trí liên kết đơi của lipid.
Tài liệu tham khảo:
1. Hố sinh y học – Bộ mơn hố sinh - ĐHYD
2. Giáo trình sinh hố hiện đại - Nguyễn Tiến Thắng 3. Giáo trình sinh hố cơ bản – Đồng Thị Thanh Thu 3. Giáo trình sinh hố cơ bản – Đồng Thị Thanh Thu 4. Hố sinh cơng nghiệp – Lê Ngọc Tú
5. www.sinhhocvietnam.com
www.khoahoc.com www.H2vn.com