- Đẩy lùi các vi sinh vật: độ ẩm và dinh dưỡng trong vùng rhizosphere tạo ra thường
5. Chỉ tiê uN tổng số
Nguyên lý và lý thuyết chung
Nitơ (đạm) là một trong những nguyên tố dinh dưỡng quan trọng của thực vật. Hầu hết các nitơ trong đất đều ở dạng hữu cơ (95-99%), chỉ một phần ở dạng vô cơ (1-5%). Đa số các đất, hàm lượng nitơ trong chất mùn chiếm khoảng 5% chất mùn. Cây trồng chỉ sử dụng nitơ trong đất khi đã chuyển hoá thành dạng vô cơ (nitơ hữu cơ trong mùn--- axit amin---amit---amoni nitrat). Mức độ phân giải phụ thuộc vào bản chất của dạng nitơ hữu cơ (nếu C/N càng cao, nitơ hữu cơ càng khó phân giải), vào nhiệt độ, độ ẩm, pH…. của đất.
Nitơ tổng là một chỉ tiêu thường được phân tích để đánh giá độ phì nhiêu tiềm tàng của đất. Để phân tích người ta thường phân huỷ chất hữu cơ chuyển nitơ thành dạng amoni. Quá trình phân huỷ này có rất nhiều phương pháp khác nhau:
8. Dùng H2SO4 đặc kết hợp với chất xúc tác. Phương pháp Kenđan (Kjendahl,1883) dùng H2SO4 đặc đun sôi với chất xúc tác là selen hoặc CuSO4.
9. Dùng H2SO4 đặc kết hợp với chất oxi hoá mạnh. Chiurin(1933) dùng H2SO4 đặc đun sôi với K2Cr2O7 hay CrO3. Hay có thể kết hợp với KClO4 và đun sôi (Ghinbuoc, Meseriacov, 1963).
Sau khi chuyển nitơ sang dạng amoni người ta dùng phương pháp chuẩn độ hoặc so màu để xác định lượng nitơ tổng số trong đất.
Nguyên tắc phương pháp Kenđan (Kjeldahl)
Khi cho chất hữu cơ tác dụn với acid sunfuric đun sôi, cacbon và hidro của chất hữu cơ được oxi hoá đến CO2 và H2O, nitơ còn lại ở dạng khử và chuyển sang dạng amonium sunfat.
2CH3CHNH2COOH + 13 H2SO4 (NH4)2SO4 + 6CO2 + 16H2O + 12SO2
Định lượng nitơ: Sau khi chuyển nitơ sang dạng amoni để xác định được nitơ dùng phương pháp chuẩn độ hay so màu.
Dụng cụ - hoá chất
Cân phân tích độ chính xác 0.2 mg
Bình semi-micro Kjendahl dung tích 100 ml và bếp công phá mẫu có tủ hút. Bột cất NH3 semi-micro Kjendahl
Buret dùng chuẩn độ Erlen 250 ml
Pipette: 10 ml
Hoá chất
Chỉ thị Nessler: 15 g HgI2 và 10 g KI hoà trong 500 ml nước cất rồi cho vào 40 g NaOH. Khuấy cho tan, để lắng vài ngày gạn dung dịch trong bình màu nâu để dùng. Nếu không có sẵn HgI2 thì pha như sau: 9 g HgCl2 với 15.5 g KI hoà vào 500 ml nước cất. Thêm 40 g NaOH khuấy đều cho tan. Đề sau vài ngày và gạn nước trong để dùng.
H3BO3 3 %: Cân 30 g H2BO3 tinh khiết cho vào nước cất định mức đến 1000 ml. HCl 0.02 N : 1.62 ml HCl đậm đặc pha trong 1000 ml nước cất.
Dung dịch hấp thụ: 100 ml H3BO3 với 1 ml Nessler .
4.3 Thực hành
Cân 10 g đất vào bình định mức 100ml.
- Thêm 1 muỗng hỗn hợp CuSO4 : K2SO4 (1: 4), 50 g CuSO4 với 200 g K2SO4 nghiền trộn đều trong cối sứ rồi cho vào lọ dùng dần.
- Thêm 10 ml H2SO4 , để yên cho xúc tác khoảng 15 phút .
Thông thường dung dịch đang nóng sẽ có màu xanh (nếu nguội thì dung dịch sẽ chuyển sang không màu). Sau đó đem đun cho đến khi hỗn hợp chuyển sang màu trắng xanh (khoảng 30 phút), tiếp tục để nguội tự nhiên khoảng 15 phút.
- Chuyển toàn bộ hỗn hợp vào trong bình chứa của máy xác định N2 (Kjendhal) - Rửa nhiều lần bằng H2O cất. Đưa bình vào trong hệ thống máy định lượng N2. Chuẩn dung dịch từ xanh sang màu tím trở lại với dung dịch HCl 0,02 N. Ghi lại thể tích HCl đã dùng. Áp dụng công thức tính suy ra % N tổng (Đất vùng nhiệt đới thường có % N<0,2%).
H
Sơ lược về trình tự thực hiện khi làm N tổng
Tính toán kết quả % N = (a - b) x N x 14 x V x 100 x K 1000 x v x m % N = (a - b) x N x 0.14 x V x K v x m Trong đó:
a: thể tích dung dịch acid tiêu chuẩn tiêu tốn khi chuẩn độ mẫu (ml) b: thể tích dung dịch acid tiêu chuẩn tiêu tốn khi chuẩn độ trắng (ml) V: Thể tích toàn bộ dung dịch công phá (ml)
H : Chạy mẫu bằng máy Kjeldahl
v: Thể tích toàn bộ dung dịch trích chuẩn độ (ml) N: nồng độ đương lượng dung dịch chuẩn acid m: khối lượng mẫu phân tích (g)
K: hệ số khô kiệt của đất.