Cân 100 g mẫu rau, xay nghiền nhỏ bằng 200 mL acetone, đem lắc trong 15 phút. Tiến hành lọc chân không qua giấy lọc 0,6mm, thu dịch lọc vào becher 250 mL. Cân 25 - 30 g muối NaCl (tùy vào lượng nước có trong mẫu) cho vào dịch trích, khuấy cá từ để hòa tan hoàn toàn muối. Dịch sau khuấy từ được cho vào phễu chiết, thu lớp dung môi phía trên. Sau đó, tiến hành cô quay chân không dịch trích ở nhiệt độ 35oC, vận tốc quay: 120 vòng/phút. Dịch sau cô quay được tráng lại bằng acetonitrile. Định mức dịch trích bằng nước cất 2 lần, sử dụng bình định mức 100 mL, được đánh siêu âm để đuổi bọt khí và lọc lại bằng màng lọc 0,2µm (đường kính: 13 mm, hãng Agilent). Tiến hành phân tích với thiết bị HPLC theo chế độ vận hành như trên.
2.4.8. Xác định độ thu hồi mẫu của quy trình phân tích Carbaryl, Dimethoate: Dimethoate:
Độ thu hồi mẫu khi bổ sung chuẩn vào dịch trích: sử dụng 4 mẫu, mỗi mẫu gồm 100g dưa leo. Tiến hành trích mẫu, mẫu thứ nhất không bổ sung gì cả, các mẫu còn lại sau khi lọc thu được dịch trích thì lần lượt bổ sung vào các dịch lọc 2,5; 5; 10 mL dung dịch Carbaryl 100ppm. Thực hiện các bước tiếp theo như trình bày ở trên, sau đó phân tích bằng HPLC. Xác định diện tích peak các mẫu không bổ sung, có bổ sung Carbaryl trên rau và mẫu chuẩn Carbaryl có cùng nồng độ để xác định độ thu hồi mẫu.
Độ thu hồi mẫu khi bổ sung chuẩn lên dưa leo và để qua đêm: sử dụng các mẫu: 100g dưa leo, 100g dưa leo có tẩm thêm 2,5; 5; 10 mL dung dịch Carbaryl 100ppm. Tiến hành trích mẫu, phân tích bằng HPLC, như đã mô tả ở trên. Xác định diện tích peak các mẫu không bổ sung, có bổ sung Carbaryl trên rau và mẫu Carbaryl trong nước có cùng nồng độ tương đương để so sánh xác định độ thu hồi mẫu (Recovery): 100 ) ( 1 ⋅ − = A A A R o
Trong đó: A1 – diện tích peak mẫu có bổ sung thêm Carbaryl. Ao – diện tích peak mẫu không bổ sung chuẩn. A – diện tích peak chuẩn bổ sung vào rau. R – độ thu hồi mẫu.
Từ đó so sánh giữa độ thu hồi mẫu khi bổ sung chuẩn trực tiếp lên rau và khi bổ sung vào dịch trích, kết luận ảnh hưởng của quá trình trích và lọc đến độ thu hồi mẫu.
Thực hiện thí nghiệm tương tự cho Dimethoate.