* Nguyên lý: Định lượng vitamin C dựa trên tính khử của nó đối với thuốc thử 2,6 diclorophenol indophenol. Dạng oxy hóa của thuốc thử 2,6 diclorophenol indophenol có màu xanh bị khử bởi acid ascorbic có trong dịch chiết của nguyên liệu thàng dung dịch không màu. Ởđiểm cân bằng tất cả acid ascorbic thì thuốc thử dư thừa không bị
khử có màu hồng. * Tiến hành
Cân khoảng 5g mẫu có chứa acid ascorbic đã được thái nhỏ, chuyển sang cối sứ cùng với 20ml HCl 1%, chắt lấy dịch ngâm giữ lại trong cốc, đem phần thịt nghiền mịn, xong chuyển sang bình định mức 100ml cùng với dung dịch HCl 1% vừa chiết ra. Rửa cối và tráng dụng cụ ít nhất 3 lần, mỗi lần với một ít acid oxalic 1% và cũng dồn
vào bình định mức. Dùng acid oxalic đểđưa thể tích lên vạch 100ml. Lắc kỹ, chuyển qua cốc khô 100ml, để yên 15 phút rồi lọc qua giấy lọc khô.
Tiến hành định phân mẫu đối chứng: Lấy 8 ml acid oxalic 1%, 2ml HCl1% cho vào bình tam giác dung tích 100ml, dùng microburet với 2,6 diclorophenol indophenol 0.001N để chuẩn độđến lúc xuất hiện màu hồng bền sau ba mươi giây.
Chuẩn độ mẫu thật: Dùng pipet lấy 10ml dịch lọc chứa Vitamin C cho vào bình tam giác dung tích 100ml, tiến hành chuẩn độ như mẫu đối chứng.
Tính kết quả
Số mg Vitamin C trong 100g mẫu được tính như sau:
Trong đó: a :số ml trung bình khi định chuẩn mẫu vật
b: số ml trung bình khi định chuẩn mẫu đối chứng
0,088: số mg acid ascorbic tương đương với 1ml dung dịch chuẩn 2,6 doclorophenol indophenol
V: thể tích dịch chiết ban đầu (V = 100ml)
v: thể tích dung dịch chiết lấy đểđịnh chuẩn (10ml) m: trọng lượng mẫu vật cân lúc đầu (g)