Cân 100 g mẫu rau, xay nhỏ trong 100 mL Aceton, thêm 100ml Aceton đem khuấy từ trong 15 phút. Tiến hành lọc chân khơng qua giấy lọc 0.6mm, dịch lọc thu được cho vào becher 250 mL, phần bã cho vào erlen 250 mL, thêm 50mL Aceton, khuấy từ trong 10 phút, lọc thu dịch lọc. Trộn hai phần dịch lọc lại thêm 25 - 30 g muối NaCl (tùy vào lượng nước cĩ trong mẫu), khuấy cá từ để hịa tan hồn tồn muối. Dịch sau khuấy từ được cho vào phễu chiết, chờ một thời gian cho tách pha thu pha hữu cơ phía trên. Pha nước phía dưới cho vào becher, thêm 50 mL aceton, được đem đi khuấy từ. Tiếp tục tách pha thu pha hữu cơ ở trên. Trộn chung pha hữu cơ ở các lần tách pha lại với nhau, sau đĩ tiến hành cơ đặc chân khơng dịch trích điều kiện nhiệt độ 35oC, vận tốc quay 120 vịng/phút. Dịch sau cơ quay được tráng lại nhiều lần bằng Acetonitrile. Định mức dịch trích bằng nước cất 2 lần, sử dụng bình định mức 100 mL, đánh siêu âm để đuổi bọt khí và lọc lại bằng màng lọc 0.2µm (đường kính: 13 mm, hãng Agilent). Tiến hành phân tích với thiết bị HPLC, chế độ vận hành thiết bị như khi chạy đường chuẩn.
2.5. ỨNG DỤNG QUY TRÌNH XỬ LÝ VÀ PHÂN TÍCH CARBARYL, ĐỂ XÁC
ĐỊNH HIỆU SUẤT PHÂN HUỶ CARBARYL TRONG CẢI XANH SAU QUÁ TRÌNH CHIẾU XẠ CHIẾU XẠ
2.5.1. Nghiên cứu ảnh hưởng của liều chiếu tới mức độ phân hủy Carbaryl trong nước
Chiếu xạ các mẫu dung dịch 6, 10, 12, 20ppm Carbaryl trong nước với các liều chiếu 1, 3 kGy. Phân tích các mẫu trên cùng với mẫu đối chứng (mẫu khơng chiếu xạ).
Tỷ số diện tích peak của mẫu đã chiếu xạ với mẫu đối chứng xác định hiệu suất phân hủy Carbaryl.
2.5.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của liều chiếu tới mức độ phân hủy Carbaryl trong cải xanh xanh
Chiếu xạ mẫu cải xanh ở liều chiếu cao hơn ngưỡng cho phép:
Chuẩn bị mẫu chiếu xạ: cân 100g cải xanh, thêm Carbaryl với lượng gấp đơi dư lượng tối đa cho phép trên cải xanh (20mL dung dịch Carbaryl 100ppm), để qua đêm để thuốc ngấm vào rau, sau đĩ đem mẫu đi chiếu xạ. Liều chiếu 1.5 và 3 kGy.
Phân tích mẫu cải xanh đã chiếu xạ cùng với mẫu đối chứng (mẫu cải xanh cĩ tẩm thêm Carbaryl nhưng khơng chiếu xạ). Tỷ số diện tích peak của mẫu đã chiếu xạ với mẫu đối chứng xác định hiệu suất phân hủy Carbaryl trong rau.
Chiếu xạ mẫu cải xanh ở các liều chiếu thấp (bằng và nhỏ hơn ngưỡng cho phép):
Chuẩn bị mẫu cải xanh tương tự như trên nhưng chỉ tẩm thêm Carbaryl với lượng bằng dư lượng tối đa cho phép trên rau (10mL dung dịch Carbaryl 100ppm), để qua đêm và đem mẫu đi chiếu xạ. Chiếu xạ ở các liều 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 và 1 kGy.
Phân tích và đánh giá kết quả như trên.
2.6. KHẢO SÁT QUY TRÌNH PHÂN TÍCH VITAMIN C BẰNG THIẾT BỊ SẮC KÝ