PHẦN THỰC NGHIỆM
2.3.1.Thu nhận các dịch chiết
Mẫu cây tươi mới thu hái được sấy khô đem nghiền nhỏ rồi ngâm kiệt với metanol ở nhiệt độ phòng cho đến khi nhạt màu. Dịch chiết được cất loại dung môi ở áp suất giảm. Cặn dịch chiết metanol được chiết lần lượt với n- hexan, etylaxetat, metanol và thu được các cặn chiết tương ứng, làm khan bằng Na2SO4. Việc thu nhận các dịch chiết từ cây Đơn tướng quân (Syzygium
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
formosum Wall.,) tóm tắt trong sơ đồ 2.1.
Sơ đồ 2.1: Sơ đồ ngâm chiết mẫu cây Đơn tướng quân (Syzygium formosum Wall., )
1. MeOH
2. Cất loại dung môi dưói áp suất giảm 3. Cặn
Sy.H Sy.E Sy.M
Các phân đoạn dịch chiết nói trên được làm khan bằng Na2SO4 , lọc rồi cất kiệt dung môi dưới áp suất giảm, cặn được sấy khô và cân đến khối lượng không đổi. Như vậy từ lá cây Syzygium formosumWall., sẽ có 3 loại cặn chiết được ký hiệu là:
Sy. H, Sy. E, Sy. M
Ký hiệu:
Sy. H: Cặn chiết n-Hexan của lá Syzygium formosum Wall Sy. E: Cặn chiết EtOAc của lá cây Syzygium formosumWall Sy. M: Cặn chiết MeOH của lá cây Syzygium formosumWall
Mẫu khô nghiền nhỏ
n- hexan Etylaxetat Metanol
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Kết quả thu nhận các dịch chiết từ lá cây Đơn tướng quân ở Thái Nguyên được nêu trong bảng 2.1
Bảng 2.1 : Khối lượng các cặn chiết thu được từ cây Đơn tướng quân ( Syzygium formosum Wall.,)
Mẫu thu vào tháng 02/2009
Khối lượng mẫu khô (g)
Khối lượng cặn chiết thu được (g)
n-hexan EtOAc MeOH
Lá 1200 15,3 ( Sy.H) 48,2 ( Sy.E) 52,1 (Sy.M) 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 2.3.2.1. Phát hiện các hợp chất sterol
Lấy 0,01g cặn của các phân đoạn, thêm 2ml dung dịch NaOH 10% đun cách thuỷ đến khô. Hoà tan cặn trong 3ml cloroform - lấy dịch cloroform để làm phản ứng định tình các sterol và thuốc thử Lieberman - Bourchardt (gồm hỗn hợp 1ml anhydric acetic + 1ml cloroform để lạnh ở 00C, sau đó cho thêm 1 giọt H2SO4 đậm đặc). Lấy 1ml dịch cloroform rồi thêm 1 giọt thuốc thử, dung dịch xuất hiện màu xanh trong 1 thời gian là phản ứng dương tình.