KIỂM TRA SẢN XUẤT 10.1 Kiểm tra nguyín liệu:
10.1.5.4. Đếm số lượng tế băo trong dung dịch nuơi cấy:
Đếm số lượng tế băo sống, tế băo trẻ cĩ chứa glycogen ta dùng thuốc nhuộm lugol, dùng xanh metylen đếm số lượng tế băo chết. Trín cơ sở đĩ ta được 3 loại tế băo trín. Ngoăi ra cịn cần đếm số lượng tế băo nẩy chồi để đânh giâ chất lượng giống.
Phương phâp đếm số lượng tế băo đơn giản, nhất lă dùng phịng đếm thomagosaer. Phịng đếm lă phím kính dăy được chia thănh câc phần đều nhau thănh câc vạch thẳng. Phần giữa câc phím kính lõm xuống, mỗi cạnh thấp hơn 1/10 mm. Trín đĩ cĩ vạch măng lưới . Diện tích của một ơ vuơng lớn dưới 1/25mm2 . Diện tích một ơ vuơng nhỏ lă 1/1000m2 . Cho dung dịch huyền phù chứa tế băo cần đếm lín lưới vă phủ bằng lâ kính mỏng lín trín . Sau đĩ sât câc lâ kính mỏng văo phịng đếm bằng câch miết văi lần sao cho giữa lâ kính mỏng văo mạng lưới của phím kính khơng cịn khơng khí, khơng cịn khoảng trắng chứa dịch trừ câc ơ . khoảng khơng gian giữa lâ kính mỏng vă phần giữa câc phím kính đê chia thănh ơ lưới sẽ tạo câc ơ vuơng lớn của lưới. Thể tích của lớp dịch trín mỗi ơ năy lă 1/250 mm2. Ta phải đếm số lượng tế băo ơ vuơng của lưới cũng như trín câc cạnh phía trín vă phía phải của ơ. Độ chính xâc của việc xâc định lă phụ thuộc văo lâ kính mỏng cĩ âp suất bề mặt phịng đếm hay khơng, cho nín tốt nhất lă lặp lại 3 lần, mỗi lần đếm khoảng 150 ÷ 200 tế băo. Bắt đầu đếm tế băo sau khi đê cho tế băo phịng đếm khoảng 3 ÷ 5 phút, phải chờ cho tế băo lắng xuống. Khi soi kính ta sẽ thấy chúng nắm trín một mặt phẳng. Số lượng tế băo chứa trong 1ml huyền phù được tính theo cơng thức:
M = a .1000 . h . S *Trong đĩ:
M: Số lượng tế băo.
a : Số lượng tế băo trung bình cĩ trong ơ. h : Chiều sđu của phịng đếm (1/10mm) S : Diện tích một ơ vuơng (1/25 mm)