Dùng điện cực miễn dịch dựa trên nguyên tắc ELISA để kiểm tra hàm lượng cloramphenicol trong thủy sản.
Các giếng được phủ lớp kháng thể kháng cloramphenicol (cloramphenicol chuẩn hoặc dung dịch chuẩn). Cloramphenicol gắn enzym và kháng thể kháng cloramphenicol được bổ sung vào giếng. Cloramphenicol tự do và cloramphenicol gắn kết enzym sẽ cạnh tranh các vị trí kết gắn của kháng thể kháng cloramphenicol (phản ứng miễn dịch enzym cạnh tranh). Đồng thời các kháng thể được bổ sung vào được cố định lại bởi các kháng thể trên thành giếng. Cloramphenicol kết gắn enzym bị dư thì sẽ được loại bỏ bằng cách rửa. Bổ sung vào giếng cơ chất của enzym (ure peroxyde) và chất tạo màu (tetramethyl benzidin) và ủ. Enzym gắn kết sẽ chuyển hĩa chất tạo sắc vốn khơng màu thành sản phẩm cĩ màu xanh. Khi bổ sung chất kết thúc phản ứng sẽ chuyển từ màu xanh sang màu vàng. Đo cường độ màu trên máy đo màu quang điện ở bước sĩng 450 nm, thì nhận thấy cường độ màu tỷ lệ nghịch với hàm lượng cloramphenicol cĩ trong mẫu.
Giai đoạn ủ được thực hiện trong máy ủ ổn định nhiệt độ. Kết quả phản ứng được đọc bằng máy đọc theo nguyên tắc so màu và so sánh với đồ thị chuẩn để xác định
Loại thiết bị này cịn được sử dụng để kiểm tra một số chất khác bằng các loại chất chuẩn khác nhau (các kit chuẩn) với giới hạn phát hiện rất thấp.
Bảng 5.2: Một số các kit chuẩn sử dụng và giới hạn phát hiện:
Loại kit Giới hạn phát hiện
• cloramphenicol - mẫu sữa - mẫu thịt, trứng - mẫu tơm 0.15 ppb 0.10 ppb 0.05 ppb • clenbuterol
- mẫu nước tiểu - mẫu thịt 0.10 ppb 0.04 ppb • diethylstilbestrol 0.02 ppb • Histamin - cá tuyết - bột cá 20 ppb125 ppb