µEOF = (L.l)/ t0 V= 64 5 56/ t0
3.1.7.Khảo sát ảnh hưởng của nồng độ chất tạo mixen SDS
Chất hoạt động bề mặt SDS được xem như pha tĩnh giả của sự tách vì thực chất nó vẫn chuyển động cùng với dòng điện di. Nồng độ SDS trong dung dịch đệm điện di có ảnh hưởng mạnh tới độ điện li hiệu dụng của các β-Lactam bởi nó liên quan đến sự
hình thành hạt Mixen cũng như nồng độ Mixen trong dung dịch đệm điện di. Để khảo sát ảnh hưởng của SDS đến quá trình điện di, nồng độ SDS đã bị thay đổi tại ba giá trị là 75 mM; 100 mM và 125 mM. Các điều kiện khảo sát:
- 7 chất kháng sinh β-Lactam cùng nồng độ 5 mg/l, 25 mM đệm Borat, pH = 7.75
- Thế điện di 20kV, bơm mẫu áp suất 50 mbar, thời gian bơm mẫu 8s, nhiệt độ mao quản
280C
Hình 3.4 Sắc đồ điện di của β-Lactam tại nồng độ SDS = 75 mM;100 mM và 125 mM Bảng 3.2 Kết quả khảo sát ảnh hưởng nồng độ SDS đến thời gian lưu của β-Lactam
Nồng độ SDS(mM) t Thời gian di chuyển của β-Lactam (phút)
0 AMO CEP AMP PENG OXA CEF CLO
100 5.9 8.74 11.32 11.68 12.31 13.17 13.4 14.12
125 6.1 9.397 12.45 12.802 14.085 14.414 15.011 17.372
Hình 3.5 Ảnh hưởng của nồng độ SDS trong dung dịch đệm điện di đến độ điện di hiệu dụng của β-Lactam
11.5 1.5 2 2.5 3 3.5 75 100 125 SDS (mM) AMO CEP AMP PENG OXA CEF CLO
Thay đổi nồng độ chất hoạt động bề mặt SDS, gây ra sự thay đổi hấp thụ lên thành mao quản qua tương tác ionic hay hiệu ứng kị nước. Các chất hoạt động bề mặt được dùng trong MEKC cũng có thể tương tác với thành ống mao quản và cũng có thể ảnh hưởng nhất định đến dòng EOF, làm thay đổi sự tương tác hấp phụ giữa chất tan và thành ống mao quản. Hướng di chuyển của chất tan và của các Mixen cũng bị thay đổi trong sự phụ thuộc vào điện tích của Mixen và tốc độ của dòng EOF Chất hoạt động bề mặt là SDS là dạng anionic làm tăng dòng EOF, sẽ di chuyển về anot ( cực dương) nghĩa là ngược chiều với hướng của dòng EOF.
Theo lý thuyết [7,8]
Độ phân giải R cũng là một thông số quan trọng của kỹ thuật MEKC. Độ phân
giải Rij của hai chất , ví dụ như I và J trong hệ MEKC cũng được biểu thị bằng công thức
sau đây theo ba thành phần cơ bản.