KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Đặc điểm chung của đối tƣợng nghiờn cứu
3.4. Tổng hợp kết quả cỏc phƣơng phỏp và thời gian đƣợc ỏp dụng cỏc kỹ thuật xột nghiệm trongchẩn đoỏn V cholerae
Kờt quả phõn tớch, so sỏnh đỏnh giỏ cỏc phương phỏp và thời gian ỏp dụng cỏc kỹ thuật chẩn đoỏn V. cholerae chỳng tụi tổng hợp ( Bảng 3.26)
Bảng 3.26. Tổng hợp kết quả cỏc phƣơng phỏp và thời gian thực hiện
Phƣơng phỏp XN Đỏnh giỏ Dƣơng tớnh Tỷ lệ % Thời gian thực hiện 1 Soi tươi Di động nhanh 28 10,37 20 phỳt Bất động khỏng huyết thanh 18 6,66 15 phỳt
2 Nhuộm Gram Gram õm, hỡnh cong 45 16,66 20 phỳt
3 Test nhanh Dương tớnh 17 6,29 15 phỳt
4 Nuụi cấy Ngưng kết KHT 16 5,93 24 – 48 giờ
5 PCR Dương tớnh 16 5,93 4 giờ
Tổng hợp kết quả giữa cỏc phương phỏp và thời gian ỏp dụng cỏc kỹ thuật xột nghiệm trong chẩn đoỏn V. Cholera ( Bảng 3.26; biểu đồ 3.13 ) cú ý nghĩa quan trọng trong việc lựa chọn cỏc kỹ thuật phự hợp theo điều kiện của từng phũng xột nghiệm. Với bảng tổng hợp này chỳng tụi đó đưa ra chỉ tiờu đỏnh giỏ, tỷ lệ dương tớnh, thời gian thực hiện, với mục đớch làm cơ sở để cỏn bộ xột nghiệm nghiờn cứu ỏp dụng sàng lọc nhanh nhất cỏc mẫu nghi ngờ dương tớnh. Nếu mẫu õm tớnh sẽ cú ngay phỏc đồ điều trị theo hướng chẩn đoỏn khỏc, nếu nghi ngờ sẽ cú phỏc đồ điều trị ngay đồng thời phải tỡm hiểu ngay yếu tố dịch tễ nguồn lõy bệnh. Kỹ thuật nuụi cấy và kỹ thuật PCR cú tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh là 5,93% sau đến kỹ thuật test nhanh tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh là 6,29%.
Bảng 3.27. Một số phƣơng phỏp cú thể ỏp dụng để chẩn đoỏn nhanh
Phƣơng phỏp
XN Đỏnh giỏ Tỷ lệ Thời gian
thực hiện
Soi tươi Di động nhanh 10,37 20 phỳt
Bất động KHT Khụng di động 6,66 15 phỳt
Nhuộm Gram Gram õm, hỡnh cong 16,66 20 phỳt
Test nhanh Dương tớnh 6,29 15 phỳt
Tổng thời gian thực hiện: 75 phỳt
Bảng cỏc kỹ thuật ( Bảng 3.27 ) đưa ra để cỏc cỏn bộ xột nghiệm nghiờn cứu cú thể ỏp dụng, cỏc kỹ thuật đơn giản, thời gian thực hiện nhanh, giỏ thành phự hợp, nếu ỏp dụng cỏc phương phỏp nờu trong bảng thời gian 1giờ cho phộp đưa ra kết quả cú ý nghĩa sàng lọc mẫu nghi ngờ rất tốt.
Phương phỏp soi tươi đỏnh giỏ dương tớnh bằng quan sỏt tớnh di động cho thấy tỷ lệ dương tớnh là 10,37% thời gian thực hiện 20 phỳt đõy là kỹ thuật đơn giản dễ thực hiện, dụng cụ là lam kớnh, kớnh hiển vi là đó thực hiện được.
Phương phỏp nhuộm Gram đỏnh giỏ dương tớnh bằng quan sỏt hỡnh thể cong và bắt màu Gram õm, thời gian thực hiện 20 phỳt, tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh 16,66% là kỹ thuật dễ thực hiện cú ý nghĩa trong việc sàng lọc mẫu tại cơ sở.
Phương phỏp test nhanh cú độ nhạy và độ đặc hiệu tương đối cao dựng để ỏp dụng sàng lọc mẫu rất tốt, trong nghiờn cứu tỷ lệ phỏt hiện nghi ngờ dương tớnh là 6,29% cho kết quả nhanh sau 15 phỳt.
Tổng thời gian thực hiện của 4 phương phỏp xột nghiệm trờn là 75 phỳt với tỷ lệ phỏt hiện cao nhất là 6,29 %.
16 16 17 18 28 28 45 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
Nuụi cấy PCR Test
nhanh
Soi tươi + Khỏng
huyết thanh
Soi tươi Nhuộm Gram
Biểu đồ 3.13. Biểu đồ tổng hợp cỏc phƣơng phỏp chẩn đoỏn V. cholerae
Bảng 3.28. Bảng so sỏnh kỹ thuật nuụi cấy với bảng lựa chọn ƣu tiờn chẩn đoỏn nhanh V. cholerae O1
Phƣơng phỏp XN n
Dƣơng tớnh
Âm tớnh
1 Kỹ thuật nuụi cấy ( Tiờu chuẩn vàng ) 270 16 254 P > 0,05 2 Bảng ỏp dụng chẩn đoỏn nhanh (bảng 3.27) 270 17 253
So sỏnh phương phỏp nuụi cấy với bảng ngắn gọn của 4 phương phỏp ( Bảng 3.27 ) với P > 0,05 khụng cú sự khỏc biệt ý nghĩa thống kờ trong việc chẩn đoỏn V. cholera giữa 2 bảng.
Qua nghiờn cứu cho thấy mỗi phương phỏp đều cú mặt mạnh nhưng vẫn cú mặt hạn chế, vỡ vậy cần phối hợp đồng thời cỏc phương phỏp chẩn đoỏn trong phũng thớ nghiệm như vậy sẽ tăng thờm hiệu quả tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh.
Trong 10 năm gần đõy dịch tả hầu như khụng xuất hiện, đụi khi cú một vài bệnh nhõn dương tớnh nhưng mang tớnh rải rỏc khụng thành dịch, nờn tài liệu tham khảo gần như khụng cú tài liệu mới. Cỏc tài liệu phần lớn đỏnh giỏ về đặc điểm dịch tễ của cỏc vụ dịch, về nghiờn cứu ứng dụng cỏc phương phỏp chẩn đoỏn nhanh V. cholerae ỏp dụng thực tế tại cỏc phũng xột nghiệm tuyến huyện thỡ chưa cú đề tài nào đỏnh giỏ đầy đủ, nếu cú thỡ cũng chỉ đưa ra số liệu đỏnh giỏ một phương phỏp nhưng chỉ phự hợp với phũng thớ nghiệm tuyến Trung ương hoặc tuyến tỉnh.
Với kết quả nghiờn cứu của chỳng tụi thực hiện trờn địa bàn của phũng thớ nghiệm tuyến tỉnh, việc đỏnh giỏ so sỏnh hiệu quả cỏc phương phỏp cú ý nghĩa rất quan trọng từ đú sẽ lựa chọn được phương phỏp phự hợp nhất nhằm sàng lọc mẫu ngay tại cơ sở. Chỳng tụi hy vọng trong thời gian tới sẽ ứng dụng triển khai được những phương phỏp đó nghiờn cứu để giỳp cỏc phũng xột nghiệm tuyến huyện làm được một số kỹ thuật, từ đú sẽ cú số liệu đỏnh giỏ rộng hơn, đỏp ứng thực tiễn, tiết kiệm chi phớ ớt nhất cho đơn vị, giỳp cho thầy thuốc cú hướng điều trị bệnh kịp thời, đặc biệt giỳp cỏc nhà dịch tễ cú hướng xử lý nhanh và khoanh vựng ổ dịch giảm lõy lan trong cộng đồng.
KẾT LUẬN
Nghiờn cứu, đỏnh giỏ cỏc phương phỏp phỏt hiện Vibrio cholerae O1 trờn 270 mẫu phõn của bệnh nhõn mắc bệnh tiờu chảy cấp cú triệu chứng lõm sàng nghi mắc bệnh tả thời gian từ thỏng 3 đến thỏng 7 năm 2008, chỳng tụi cú một số kết luận sau:
1. Tỷ lệ bệnh nhõn dương tớnh Vibrio cholerae O1 được chẩn đoỏn xỏc định là 5,93 %.
2. Đỏnh giỏ cỏc kỹ thuật phỏt hiện V. cholerae O1 cho thấy:
2.1. Kỹ thuật nuụi cấy (được coi là tiờu chuẩn vàng ) tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh là 5,93%
2.2. Kỹ thuật PCR tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh là 5,93% phỏt hiện kết quả nhanh sau 4 – 5 giờ, cú độ nhạy và độ đặc hiệu cao nhưng đũi hỏi trang thiết bị và sinh phẩm đắt tiền, phương phỏp này phỏt hiện được cả bệnh nhõn dương tớnh khi đó dựng thuốc khỏng sinh.
2.3. Kỹ thuật test nhanh cú độ nhạy và độ đặc hiệu tương đối cao tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh 6,29 % như vậy so với kỹ thuật nuụi cấy cú độ sai lệch dương tớnh là 0,36 %, kỹ thuật cho kết quả nhanh, dễ thực hiện, khụng đũi hỏi trang thiết bị .
2.4. Kỹ thuật soi tươi đỏnh giỏ bằng di động tỷ lệ dương tớnh là 10,37 % cú độ sai lệch so với kỹ thuật nuụi cấy là 4,44% nhưng nếu sử dụng thờm khỏng huyết thanh đặc hiệu để bất động vi khuẩn thỡ tỷ lệ sai lệch giảm từ 4,44 % xuống cũn 0,73% rất cú ý nghĩa trong chẩn đoỏn bệnh cũng như hướng điều trị.
2.5. Kỹ thuật nhuộm soi bằng quan sỏt tớnh chất bắt màu và hỡnh thể vi khuẩn tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh là 16,66 % so với kỹ thuật nuụi cấy tỷ lệ sai lệch là 10,73 %
3. Lựa chọn những kỹ thuật hiệu quả, phự hợp để ỏp dụng sàng lọc chẩn đoỏn nhanh V. cholerae O1 tại labo tuyến huyện trong giai đoạn hiện nay: 3.1. Kỹ thuật soi tươi kết hợp khỏng huyết thanh đặc hiệu của V. cholerae
O1 cho kết quả phỏt hiện là 6,66 % thời gian kết hợp để thực hiện là 25 phỳt, sự kết hợp của phương phỏp này cú ý nghĩa rất cao trong việc phỏt hiện nhanh, phự hợp với phũng thớ nghiệm tuyến huyện vỡ khỏng huyết thanh dễ mua cú bỏn trờn thị trường và đặc biệt trong nước đó sản xuất, giỏ thành rẻ phự hợp với tuyến cơ sở.
3.2. Kỹ thuật nhuộm soi thời gian thực hiện 15 phỳt, tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh 16,66 % thực hiện kỹ thuật mang tớnh định hướng giỳp cho cỏc kỹ thuật tiếp theo
3.3. Test nhanh tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh 6,29 % cho kết quả nhanh dễ thực hiện, độ nhạy cũng như độ đặc hiệu tương đối cao. Bảng 3.27. Đó đưa ra số liệu nghiờn cứu cụ thể cho từng phương phỏp ( Soi tươi, soi tươi bất động khỏng huyết thanh, nhuộm Gram, test nhanh ), nờn cú sự phối hợp chặt chẽ giữa cỏc phương phỏp để giảm bớt tỷ lệ sai lệch trong phỏt hiện, với thời gian 55 phỳt nếu thực hiện đủ cỏc phương phỏp theo bảng trờn thỡ tỷ lệ phỏt hiện dương tớnh Vibrio cholerae O1 là 6,29 % gúp phần đỏng kể kịp thời điều trị sớm cho bệnh nhõn , mặt khỏc cú biện phỏp ngăn ngừa lõy lan dịch trong cộng đồng.
ĐỀ NGHỊ
1. Cỏc phũng xột nghiệm vi sinh cần ỏp dụng đồng thời cỏc phương phỏp để nõng cao tỷ lệ phỏt hiện Vibrio cholerae O1 trong mẫu bệnh phẩm.
2. Tăng cường năng lực cho phũng thớ nghiệm: Húa chất, thiết bị, con người. Tổ chức tốt mạng lưới những cỏn bộ làm cụng tỏc xột nghiệm thường xuyờn trao đổi, thống nhất phương phỏp, học tập và trao đổi kinh nghiệm lẫn nhau.