- Thermonuclease cụa S aureus: cũng như tât cạ các vi sinh vaơt khác S aureus đeău có theơ toơng hợp DNAse ngối bào, như có đieơm khác bieơt so với tât cạ các loài vi sinh vaơt khác,
19. Thử nghieơm oxydase
Nguyeđn taĩc: thử nghieơm này nhaỉm phát hieơn heơ enzym oxydase cụa vi sinh vaơt.
Cơ sở sinh hoá: Thử nghieơm oxydase nhaỉm múc đích phát hieơn enzym oxydase, moơt sạn phaơm noơi bào cụa vi sinh vaơt. Phạn ứng oxydase xãy ra do sự có maịt cụa heơ thông cytochrom oxydase oxyhoá các cytochrom dáng khử bởi oxy phađn tử.
Tât cạ các vi sinh vaơt nhaơn naíng lượng từ các nguoăn vaơt vaơt chât baỉng cơ chê hođ hâp, đađy là quá trình oxy hoá. Heơ thông hođ hâp là moơt chuoơi các enzym và các chât chịu trách nhieơm cho sự vaơn chuyeơn đieơn tử từ các cơ chât đên oxy phađn tử. Oxy là chât nhaơn proton hydro cuôi cùng trong chuoơi hođ hâp đeơ táo thành nước hay hydro peroxyde, sạn phaơm cuôi cùng được hình thành phú thuoơc vào từng loài vi sinh vaơt và heơ thông enzym cụa chúng.
Acid pyruvic Acid pyruvic
Glucose Gluconic acid 2-keto - Gluconic acid 2-keto-6-phospho-Gluconic acid
40 Heơ thông cytochrom thường hieơn dieơn chư trong các loài vi sinh vaơt hieău khí hay kỵ khí tuỳ nghi. Các vi sinh vaơt kỵ khí baĩt buoơc khođng có heơ thông này. Có nhieău lối heơ thông cytochrom oxyadse khác nhau tuỳ thuoơc vào từng loài vi sinh vaơt, moơt sô loài chư có moơt oxydase trong khi moơt sô loài khác có hai hay ba oxydase. Cytochrom oxydase là heơ enzym cuôi cùng trong toàn boơ heơ thông cytochrom, ngoài ra còn có các cytochrom khác như b, c1,c.
Phát hieơn heơ thông cytochrom oxydase nhờ thuôc thử p-phenylenediamin, đađy là moơt dăn xuât từ hợp chât phenol amin. Cytochrom oxydase khođng phạn ứng trực tiêp với thuôc thử này mà phại qua trung gian oxyhoá cytochrom c. Quá trình này như sau:
Cytochrom oxydase
2 cytochrom c khử + 2H+ + ½ O2 2 Cytochrom c oxy hoá + H2O
oxy hoá
2 Cytochrom c oxy hoá + thuôc thử hợp chât có màu xanh
Hợp chât có màu xanh này là moơt indolphenol blue, đađy là moơt lối thuôc nhuoơm có nhađn quinon.
Các tiên hành: Nuođi cây vi sinh vaơt tređn mođi trường nutrien agar qua đeđm, lây moơt ít sinh khôi vi sinh vaơt baỉng que cây vòng được làm baỉng nhựa hay goê đaịt leđn giây lĩc mày traỉng, đánh dâu vị trí đaịt sinh khôi vi sinh vaơt. Nhỏ leđn vị trí đáng dâu moơt giĩt thuôc thừ N,N,N’,N’- tetramethyl-p-phenylenediamine (TMPD), quan sát sau vài phút. Phạn ứng oxydase dương tính khi sinh khôi vi sinh vaơt chuyeơn thành này xanh dương đaơm. Phạn ứng ađm tính khi khođng có hieơn tượng chuyeơn màu.
http://www.ebook.edu.vn 39