PHƯƠNG PHÁP ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

Một phần của tài liệu Phương pháp kiểm nghiệm vi thực vật trong thực phẩm (Trang 44 - 45)

- Thermonuclease cụa S aureus: cũng như tât cạ các vi sinh vaơt khác S aureus đeău có theơ toơng hợp DNAse ngối bào, như có đieơm khác bieơt so với tât cạ các loài vi sinh vaơt khác,

2.PHƯƠNG PHÁP ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

Những tiến bộ cụa khoa hĩc trong những naím gaăn đađy đã thúc đaơy sự phát trieơn cụa các kỹ thuaơt chaơn đoán baỉng huyêt thanh. Các phương pháp này tỏ ra rât hieơu quạ trong vieơc chaơn đoán nhanh và chính xác các vi sinh vaơt gađy beơnh. Ngày nay phương pháp này còn được phát trieơn đeơ xác định các chât đoơc hái trong mođi trường như đoơc tô, dư lượng kháng sinh… Nguyeđn taĩc cụa phương pháp ELISA dựa tređn phạn ứng kêt hợp giữa kháng nguyeđn với moơt kháng theơ đaịc hieơu. Phạn ứng mieên dịch xãy ra được phát hieơn baỉng cách sử dúng những kháng theơ đã được đánh dâu (baỉng chât nhuoơm phát huỳnh quang, đoăng vị phóng xá, hay enzyme).

Phương pháp ELISA là phương pháp hâp phú mieên dịch lieđn kêt enzyme (enzyme-linked immunosorbent assay). Nguyeđn taĩc kỹ thuaơt ELISA là sử dúng kháng theơ đơn dòng (kháng theơ sơ cây) phụ beđn ngoài những giêng (well) nhỏ nhaỉm múc đích thu giữ những kháng nguyeđn múc tieđu. Những kháng nguyeđn thu giữ được phát hieơn baỉng cách sử dúng kháng theơ thứ hai có gaĩn với enzyme phát tính hieơu (thường là horseradish peroxidase hay alkaline phosphatase). Khi cho vào hoên hợp phạn ứng moơt cơ chât đaịc hieơu cụa enzyme, phạn ứng xạy ra và táo ra các sạn phaơm làm đoơi màu phạn ứng. Như vaơy, chúng ta có theơ phát hieơn được sự hieơn dieơn cụa kháng nguyeđn .

Kháng theơ thu kháng nguyeđn

Kháng nguyeđn Kháng theơ mang

enzyme đánh dâu “Sandwich” Cơ chât

http://www.ebook.edu.vn 41

Qui trình thực hieơn phađn tích baỉng ELISA có các chính như sau: đaịc mău vào trong các giêng có chứa kháng theơ sơ câp, cho kháng theơ thứ câp có lieđn kêt với enzym táo màu vào đeơ táo sandwich, rửa đeơ lốo bỏ các kháng theơ mang enzym khođng tham gia phạn ứng, cho cơ chât táo màu với emzym lieđn kêt quạ hoêm hợp, đo cường đoơ màu táo thành đeơ xác định lượng kháng nguyeđn trong mău.

Hieơn nay ELISA đã được sử dúng roơng rãi đeơ phađn tích Salmonella, E. coli gađy beơnh,

Listeria, đoơc tô Staphylococus, thuôc trừ sađu, dư lượng khám sinh… đôi với vi sinh vaơt, phương pháp ELISA có theơ sử dúng phát hieơn và định lượng vi sinh trong thực phaơm sau vài giờ taíng sinh nhaỉm taíng đoơ nháy cụa phương pháp.

Một phần của tài liệu Phương pháp kiểm nghiệm vi thực vật trong thực phẩm (Trang 44 - 45)