trường khác nhau
Trong tế bào nấm men, sterol tồn tại dưới dạng sterol tự do và dạng ester của nó (steryl). Dạng sterol tự do cư trú chủ yếu trong màng tế bào, trong các vi cấu trúc (raft) và chịu trách nhiệm điều hòa tính lỏng của màng. Hàm lượng sterol và tỷ lệ sterol tự do trong tế bào phụ thuộc vào điều kiện nuôi cấy.
Trong nghiên cứu này, chúng tôi lựa chọn chủng Y. lipolytica W29 để nghiên cứu hàm lượng sterol tự do cũng như tổng số khi nuôi cấy trên các môi trường khác nhau và tìm hiểu sự liên hệ giữa chúng tới tính thấm của màng tế bào đối với phân tử β-carotene.
Hình 3.12: Hàm lượng sterol trên các môi trường khác nhau (chủng Y. lipolytica W29) Kết quả cho thấy hàm lượng sterol tổng số thu được cao nhất trên môi trường YNBO, thấp nhất trên môi trường YPD; đồng thời sterol tự do chiếm
96% đối với môi trường YPD, 63% đối với môi trường YNBO và 56% đối với môi trường YPO.
Sterol có vai trò như chất điều hòa tính lỏng của màng tế bào. Khi bổ sung sterol vào màng tế bào sẽ làm cho màng trở nên lỏng hơn. Tuy nhiên, tới một giới hạn nào đó, khi hàm lượng sterol tăng thì màng tế bào chuyển từ trạng thái lỏng sang trạng thái đông rắn. Điều này được chứng minh khi đo tính linh động của màng tế bào sử dụng phương pháp mồi huỳnh quang (Tạ và cộng sự, 2010). Điều này cũng có thể giải thích khả năng xâm nhập dễ dàng của β- carotene qua màng tế bào trong trường hợp nuôi trên môi trường YNBO.
CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN
1. Đã tiến hành mô tả hình thái khuẩn lạc, hình thái tế bào của các chủng Y. lipolytica và S. cerevisiae.
2. Đã xây dựng đường cong sinh trưởng của các chủng Y. lipolytica và S. cerevisiae trên các môi trường nuôi cấy khác nhau, xác định được thời gian để chủng nấm men đi vào pha cân bằng trên môi trường có nguồn cacbon là lipid khoảng 24 giờ, trên môi trường có nguồn cacbon là đường khoảng 19 giờ.
3. Quá trình phân tích sterol trên màng, chúng tôi nhận thấy rằng % sterol tự do của chủng nấm men trên môi trường có nguồn cacbon là đường sẽ nhiều hơn % sterol của chủng nấm men nuôi trên môi trường có nguồn cacbon là lipid. Kết quả phân tích hàm lượng β-carotene thấm qua màng tế bào trên môi trường có nguồn cacbon là lipid cao hơn trên môi trường có nguồn cacbon là đường. Hàm lượng β-carotene thấm qua màng này phụ thuộc vào nồng độ sterol trong tế bào.
KIẾN NGHỊ
1. Ngoài yếu tố môi trường nuôi cấy, có thể khảo sát thêm các yếu tố ngoại cảnh như: pH, oxy, nhiệt độ… đến việc hình thành sterol trên màng.
2. Khảo sát trên nhiều chủng nấm men hơn để có những đánh giá tổng quát hơn về tính chất bề mặt của màng tế bào.
3. Đánh giá thêm ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy tới tính toàn vẹn cũng như trao đổi điện tử trong màng.
4. Đối với chủng Y. lipolytica có khả năng sử dụng nguồn cacbon là lipid, có thể nghiên cứu để sử dụng chủng nấm men này trong xử lý ô nhiễm các chất thải dầu.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Nguyễn Như Hiền, Trịnh Xuân Hậu (2006): Giáo trình sinh học tế bào, nhà xuất bản Giáo Dục.
2. Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyền, Phạm Văn Ty (2002): Vi sinh vật học, nhà xuất bản Giáo Dục.
3. Lương Đức Phẩm (2006): Nấm men công nghiệp, nhà xuất bản Khoa Học Kỹ Thuật.
Tiếng Anh
1. Michel E van der Rest et al., 1995, The plasma membrane of
Saccharomyces cerevisiae, Vol 59, 304 – 318.
2. Thi Minh Ngoc Ta et al., 2010, New insights into effect of medium- chain-length lactones on yeast membranes. Importance of the culture medium, Appl Microbiol Biotechnol, Vol. 87, No. 3, 1089-1099.
3. France Thevenieau et al., 2009, Applications of non-conventional yeast
Yarrowia lipolytica, 590 – 610.
4. H. Katsuki và Konrad Bloch, 1967, Studies on the biosynthesis of ergosterol in yeast, The journal of biological chemistry, Vol. 242, No. 2, 222-227.
5. M.A.Z. Coelho, P.F.F. Amaral and I. Belo,2010,Yarrowia lipolytica: an industrial workhorse, Applied Microbiology and Microbial Biotechnology, 930-944.