50 àl IS ( 1000ng/ml) 10ml HCLO 4 0.1M
2.3.8So sánh kết quả phân tích với một số phòng thí nghiệm khác
Để so sánh kết quả phân tích tại phòng thí nghiệm, chúng tôi sử dụng mẫu thức ăn gia súc do khách hàng gửi đến, mẫu đ−ợc tách thành ba phần sau khi đã đồng nhất; một phần phân tích tại phòng thí nghiệm, hai phần còn lại đem gửi tại hai phòng thí nghiệm là Phòng phân tích thức ăn chăn nuôi - Viện Chăn nuôi – Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn và phòng thí nghiệm Trung tâm Dịch vụ phân tích thí nghiệm (ASE) tại Thành phố Hồ Chí Minh. Hai phòng thí nghiệm này sử dụng hai ph−ơng pháp: tại Viện Chăn nuôi ph−ơng pháp kiểm tra là ELIZA; tại ASE sử dụng ph−ơng pháp sắc ký khí khối phổ (GC/MS) là ph−ơng pháp nh− chúng tôi xây dựng. Kết quả cho thấy trong bảng sau:
Bảng 11. So sánh kết quả phân tích
Kết quả các mẫu phân tích (ppb)
STT Tên phòng
thử nghiệm TA2 M1(AA) M2 (AB)
Ph−ơng pháp thử
1 NACEFA 0,51 KPH KPH GC/MS
2 ASE -- KPH KPH GC/MS
3 Viện Chăn
nuôi D−ơng tính Âm tính Âm tính ELIZA
TA2; M1(AA); M2(AB): ký hiệu các mẫu phân tích
NACEFA: Trung tâm Phân tích và Giám định thực phẩm Q.G Viện CNTP ASE: Trung tâm Dịch vụ phân tích thí nghiệm- TP Hồ Chí Minh.
8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 0 2000 4000 6000 8000 10000 12000 14000 16000 18000 20000 22000 24000 26000 28000 30000 32000 34000 36000 38000 40000 42000 44000 46000 48000 Time--> Abundance TIC: TACN(161108).D 6.61 6.99 7.29 7.34 8.03 8.95 10.31 13.94 14.27 14.40 15.96 16.18 17.41 17.54 17.81 18.08 18.60 18.87 19.03 19.34 6.000 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 100 200 300 400 500 600 Time--> Abundance Ion 86.00 (85.70 to 86.70): TACN(161108).D 13.94 6.000 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 Time--> Abundance Ion 293.00 (292.70 to 293.70): TACN(161108).D 19.03
Nhận xét: Với 3 mẫu gửi đi kiểm tra, hai mẫu M1 mã hoá AA, M2 mã hoá AB cả ba phòng thí nghiệm đều không phát hiện có Clenbuterol. Mẫu TA2 phòng thí nghiệm thức ăn chăn nuôi kiểm tra bằng ph−ơng pháp ELIZA phát hiện d−ơng tính phù hợp với kiểm tra tại phòng thí nghiệm có kết quả là 0,51 ng/g.
Phần III: Kết luận, kiến nghị
Đề tài đã hoàn thành các nội dung nghiên cứu đã ký kết trong Hợp đồng nghiên cứu khoa học và phát triển công nghệ số 89.08.RD/HĐ- KHCN gồm:
1. Đã xây dựng đ−ợc qui trình tách, làm sạch và làm giàu Clenbuterol từ mẫu .
2. Đã xác định đ−ợc điều kiện phù hợp để xác định Clenbuterol trên máy sắc ký khí khối phổ (GC/MS) bao gồm cột tách, các chế độ nhiệt cho buồng bơm mẫu, ch−ơng trình nhiệt cho cột tách, tốc độ dòng khí mang...
3. Đã xác định đ−ợc hiệu suất thu hồi mẫu ổn định trong khoảng qui định cho phép từ 80 đến 120%, giới hạn phát hiện (LOD) bằng 1ng/ml và giới hạn xác định (LOQ= 5 LOD) của ph−ơng pháp.
4. Đã xây dựng đ−ợc qui trình chuẩn để phân tích Clenbuterol ; áp dụng qui trình để khảo sát một số mẫu thịt, thức ăn gia súc trên địa bàn Hà Nội ; đã tiến hành so sánh kết quả kiểm tra với một số phòng thí nghiệm khác tại Hà Nội và Thành phố Hồ Chí Minh.
Kiến nghị
Tài liệu tham khảo
1. Đỗ Quang Huy(2000), Sắc ký khí lý thuyết và thực hành. Hà nội 2000. 2. Võ Công Sáu, Nghiên cứu xác định Chloraphenicol trong mẫu sinh học
bằng ph−ơng pháp sắc ký- khối phổ, Hà Nội 2003.
3. Anders Blomgren, Christine Berggren, Anna Holmberg, Fredrik Larsson, Brorje Sellergren, Kees Ensing. Extraction of clenbuterol from calf urine using a molecularly imprinted polymer followed by quantitation by high – performance liquid chromatography with UV detection. Journal of chromatography A 975, 157-164.
4. Christine Berggren, Sami Bayoudh, David Sherrington, Kees Ensing. Use of moleculary imprinted solid- phase extraction for the selective clean- up of clenbuterol from calf urine. Journal of Chromatography A, 889 (2000) 105-110.
5. E. Ciranni Signoretti, C. D Arpino and F. la Torre. Determination by hight – performance liquid chromatography of clenbuterol in commercial syrup formulations. Journal of Chromatography, 473, 301- 304.
6. FAO/WHO (1994), Residues of some veterinary drugs in animals and food, Rom, pp1-10.
7. F. Saltron, Y.Berthoz, R. Rues, N. Auguin, L. Belhade, Jurnal Mass Spectrom. 31 (1996) 810
8. G. Van Vyncht, S. Preece, P. Gaspar, G maghuin- Rogister, E. DePauw. Gas and liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry for the multiresidue analysis of beta- agonists in biological matrices. Journal of Chromatography A, 750, 43-49.
9. Imad K. Abukhalaf, Daniel A. von Deutsch, Bryan A. Parks, Larry Wineski... Comparative analytical quantitation of clenbuterol in biological matrices using GC-MS and EIA. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
10.J.E. Roybal (1998) Chloraphenycol and related drugs- Analytical procedures of drugs residues in food of animal origin. Pp..227-260. 11.JP. Hanrahan, in JP Hanrahan(Ed.), beta- Agonists and Their Effects on
Animal Growth and Carcass Quality, Elsevier, Amsterdam, 1987. 12.J. Girault, P. Gobrn and JB. Fourtillan, Bioned Environ Mass Spectrom,
19(1990) 80.
13.Kijal D.L (1994) Confirmation of CAP residues in bovine milk by Gas Chromatography Mass Spectrometry. AOAC pp34-40.
14.Limin he, Yijuan Su, Zhenling Zeng, Yahong Liu, Xiahui Huang. Determination of ractopamine and clenbuterol in feeds by gas chromatography – mass spectrometry. Animal feed science and technology 132 (2007) 316-323.
15.Luca Amendola, Cristiana Colamonici, Francesca Rossi, Francesco Botre. Determination of clenbuterol in human urin by GC- MS-MS-MS: confirmation analysis in antidoping control. Journal of Chromatography B, 773, 7-16.
16.Milagro Reig, Natalia Batlle, Jose Luis navarro, Fidel Toldra. Stability of Beta – agonist methyl boronic derivatives beforre gas chromatography – mass spectrometry analysis.
17.Munm.R.K., Holland D.C., Roybal S.E.,...Gas Chromatographic determinatin of CAP residues in shrimp. AOAC pp596-601.
18.M.C. Dumasia, E.Houghton. Screening and confirmatory analysis of beta- agonists, beta- antagonists and their metabolites in horse urin by capillary gas chromatography – mass spectrometry. Journal of Chromatography, 564, 503-513.
19.P. Delahaut, M. Dubois, I Pri-Bar, O. Buchman, G. Degand and F. Ectors, Food Additives Contam. 8(1991),43.
20.R.J.Heitzman (Ed.), Residues in Food Producing Animals and their Products – Referen Materials and Methods, Commission of the Eropean Communities, Luxemborg, 1992, p,39.
21.T.Nagata, H.Oka(1996), Detection of residues CAP, florfonicol and thiamphenicol in yellow tail fish musclee by Capyllary Gas Chromatography- Mass Spectromestry. Agric.Food Chem, 44(5). Pp. 1280-1284.
22.T Visser, M J Verdenbregt and A. P J M de Jong, L A van Ginkel, H J van Rossum and R W Stephany. Cryotrapping gas chromatography – fourier trasform infrared spectrometry: anew technique to confirm the presence of beta- agonists in animal material. Analytica Chumuca Acta, 275, 205-214.
23.Weilin L. Shelver and David J Smith.. Enzyme – Linked Immunosorbent Assay Development for the beta- Adrenergic Agonist Zilpaterol. Agriculture and Food Chemistry. 52, 2159-2166.
24.Yantu Zhang, Zhujun Zhang, Yonghua Sun and Yue Wei. Development of Analytical Beta-Agonist Residues in Animal Tissues by high- performance liquid chromatography with On- line Electrogenerated Chemiluminescence detection. Agricultural and Food Chemistry 55 (2007), 4949-4956.
25.http://tintuc .timnhanh.com 07/6/2006.
Chất Clenbiterol có thể gây ngộ độc cấp ở ng−ời trong thịt heo 26.http://www.qđn.vn 18/01/2007.
Xử lý nghiêm doanh nghiệp dùng hooc mon trong chăn nuôi. 27.http://www.nld.com.vn. 20/01/2007
Chất Clenbuterol có trong phụ gia. 28.http://www.vista.gov.vn 04/4/2007
Danh mục các chữ viết tắt
Eliza Enzyme Linked Immunosorbent Assays
EIA Enzyme Immunosorbent Assay
GC/MS Gas Chromatography/ Mass Spectrophotomet
HPLC High Performant Liqiud Chromatography
LC Liquid Chromatography
LOD Limit of Detection
LOQ Limid of Quantitation
LC/MS Liquid Chromatography/ Mass Spectrophotomet
RIA Radio Immuno Assay
PAN Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
SPE Solid Phase Extract
TLC Think Layer Chromatography
TĂCN Thức ăn chăn nuôi
NN & PTNT Nông nghiệp và phát triển nông thôn
NACEFA National Center for Food Analysis and Assesment
VSAT Vệ sinh an toàn
KPH Không phát hiện
MSTFA N- Methyl- N- (trimethylsilyl) trifluoro acetomide
Mục lục Mục Tên đề mục Trang Lời cảm ơn Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng biểu I Phần I: Tổng quan 1
1.1 Cơ sở pháp lý của đề tài 1