Giới hạn phát hiện LOD (Limit of detection) là l−ợng nhỏ nhất của chất phân tích có thể phát hiện đ−ợc đảm bảo sự khác biệt với mẫu trắng tới 95%.
Thông th−ờng pic của chất phân tích có chiều cao gấp 3 lần nhiễu đ−ờng nền thì có thể coi là đ−ợc phát hiện. Để xác định LOD, chúng tôi sử dụng chất chuẩn với các nồng độ khác nhau, sau đó tiến hành xác định trên máy, từ những kết quả đạt đ−ợc ở các nồng độ khác nhau này tìm ra giới hạn phát hiện của ph−ơng pháp.
Kết quả nghiên cứu đ−ợc trình bầy trong bảng 8.
Bảng 8. Xác định giới hạn phát hiện LOD.
STT Nồng độ chuẩn (ng/ml) Tỷ lệ tín hiệu/ nhiễu đ−ờng nền
(S/N)
1 1,00 3,02
2 2,00 5,13
3 5,00 21,23
4 10,00 50,25
Từ bảng trên cho thấy ở nồng độ 1,00 ng/ml tỷ lệ tín hiệu/ nhiễu bằng 3,02 lớn hơn 3 đảm bảo cho khả năng phát hiện ổn định vì vậy chúng tôi chọn LOD= 1,00 ng/ml.
Giới hạn xác định LOQ (Limit of quantification) là l−ợng nhỏ nhất của chất cần phân tích có trong mẫu thử có thể định l−ợng đ−ợc trong điều kiện tiến hành phép thử. Thông th−ờng LOQ đ−ợc lấy từ 3 đến 5 lần LOD. Trong ph−ơng pháp này để đảm bảo chắc chắn khả năng định l−ợng chúng tôi chọn LOQ = 5.LOD. D−ới đây là sắc đồ xác định LOD
6.000 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00100 100 200 300 400 500 600 Time--> Ion 86.00 (85.70 to 86.70): TN15(161108).D 13.95 6.000 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 Time--> Abundance Ion 293.00 (292.70 to 293.70): TN15(161108).D 19.03
Hình2.Sắc ký đồ xác định LOD (chuẩn 2ng/ml, nội chuẩn 100ng/ml)