- Phân tích sự phân bố và thành phầnloài nấm thuộc họ Xylariaceae.
2.6.5. Nghiên cứu sự mọc của nấm trên môi trường thạch và giá thể
* Trên môi trường thạch
Chúng tôi tiến hành nghiên cứu tốc độ mọc trên môi trường thạch khoai tây. Phương pháp tiến hành như sau:
Giống gốc thuần khiết của các chủng được phân lập từ giá thể có sợi nấm trên môi trường PDA (Potato Dextrose Agar) trong buồng cấy vô trùng. Thành phần môi trường PDA (cho 1 lít) bao gồm: khoai tây (đã gọt vỏ, cắt nhỏ): 200g, glucose : 20g, agar : 20g, nước cất vừa đủ 1 lít.
Sau đó, giống gốc nấm trên môi trường thạch nghiêng được cắt thành từng miếng kích thước 0,5 cm rồi cấy truyền sang môi trường thạch trong bình tam giác ở trung tâm bình để nghiên cứu tốc độ sinh trưởng của hệ sợi. Mỗi ngày theo dõi 2 lần, mỗi lần cách nhau 12 giờ.
Tốc độ mọc hệ sợi nấm được tính theo Schwantes (1971) [73]: V = X/T Trong đó:
- V: tốc độ mọc của hệ sợi (m/h).
- X: bán kính của bề mặt thạch (m).
- T: thời gian sợi nấm mọc kín bề mặt thạch (h). * Trên môi trường nhân giống cấp II
26
Giá thể được dùng làm môi trường cấp II là thóc luộc. Phương pháp luộc thóc như sau: thóc trước khi luộc được đãi sạch trấu và tạp chất, sau đó tiến hành luộc thóc, khi thấy sôi lăn tăn và đều khắp nồi thì tiến hành rút bớt lửa, khi thấy hạt thóc nứt được 1/2 hạt thì cho nồi ra khỏi bếp hoặc tắt lửa, ủ khoảng 20 phút đến khi hạt thóc nứt được 2/3 hạt thì tiến hành đổ thóc ra và dùng quạt thổi thật mạnh sao cho thóc ráo nước và nguội thật nhanh. Thóc sau đó được đóng vào các bình tam giác, làm nút bông và khử trùng ở 1 atm trong 1,5 giờ.
27
CHƢƠNG 3