Phenol có mặt trong nƣớc thải công nghiệp, do đó có thể tìm thấy phenol trong nƣớc mặt và nƣớc ngầm. Sự có mặt của phenol trong nƣớc có thể ảnh hƣởng đến màu sắc và mùi vị của nƣớc kể cả ở nồng độ rất thấp. Đem chƣng cất ngay hoặc bảo quản lạnh [36].
Tách các hợp chất phenol khỏi tạp chất và chất bảo quản mẫ u bằng chƣng cất . Vì tốc độ bay hơi của các hợp chất phenol chậm nên thể tích phần cất phải bằng thể tích mẫu đem chƣng cất [36].
Giai đoạn 1: Lấy mẫu và bảo quản mẫu Giai đoạn 2: Chƣng cất nhƣ [36].
Lấy khoảng 300ml mẫu nƣớc hoặc một thể tích phù hợp, lọc để loại các chất cặn lơ lửng. Lấy chính xác 250ml nƣớc lọc (dd Xa) chuyển vào bình cất, cất đến khi gần cạn,
thêm tiếp khoảng 250ml nƣớc cất, cất tiếp (để đuổi hết phenol) và thu vào bình. Chuyển toàn bộ dung dịch cất vào bình định mức 500ml (dd Xb), định mức đến vạch. Dung dịch mẫu sau khi chƣng cất có hàm lƣợng phenol bị pha loãng n lần (n phụ thuộc vào thể tích mẫu thu hồi). Có thể chƣng cất mẫu một lƣợng nhỏ hơn [36].
Giai đoạn 3: Thƣ̣c hiện phản ƣ́ng màu
Lấy V1 ml dung dịch X b chuyển vào bình định mứcVx1= 100ml, thêm 2,5ml dung dịch NH3 0,5M; 2,0ml hỗn hợp đệm K 2HPO4 và KH2PO4; 1,0 ml dung dịch 4- aminoantipyrin 0,1M; 50ml nƣớc cất ; 1,0ml dung dịch K 3Fe(CN)6 0,25M; lắc đều và định mức đến vạch bằng nƣớc cất thu đƣợc dung dịch X1. Phức antipyrine màu nâu đỏ , ổn định, cƣờng độ màu tỉ lệ với hàm lƣợng phenol có trong mẫu.
Giai đoạn 4: Thƣ̣c hiện đo quang và tính toán kết quả
Mang dung dịch X1 thu đƣợc ở trên thƣ̣c hiện đo quang bằng má y UV-VIS Varian Cary 50 series ở bƣớc sóng lí thuyết 500nm. Xác định nồng độ phenol nhờ đƣờng chuẩn.
Tính nồng độ phenol trong mẫu dung dịch X0 theo công thức: 1 1 1 1 . .1000 (12) x x C V C V Trong đó:
C là nồng độ phenol trong mẫu dung dịch Xo (ban đầu), (mg/l). A là nồng độ phenol xác định nhờ đƣờng chuẩn, (mg/l).
vo là thể tích mẫu đem phân tích để tạo phản ứng màu (ml). n là hệ số nồng độ pha loãng.
1000 là hệ số chuyển đổi milít sang lít.
Phƣơng pháp này cho phép xác định phenol trong nƣớc uống, nƣớc mặt, nƣớc ngầm, nƣớc biển, nƣớc thải công nghiệp và nƣớc thải sinh hoạt trong phạm vi từ 0,05 – 1,5 mg/l [36].