quả táo cho nuôi cấy in vitro
- Nước dừa: Là chất lỏng, trong, chứa trong quả dừa. Khi quả dừa già đi,
nước dừa được thay thế bởi cùi dừa và không khí. Quả dừa non chứa rất ít cùi dừa, và lóp cùi này mỏng, rất mềm và khá trong. Chứng tỏ việc sử dụng nước dừa từ quả bánh tẻ đã được ứng dụng trong nghiên cứu.
- Nước chiết từ mầm ngô: Hạt ngô được sử dụng cho gieo lấy mầm là hạt
giống của ngô lai. Tiến hành ngâm và ủ ngô ở nhiệt độ thích họp cho nảy mầm. Ngâm hạt trong nước ấm: 2 sôi 3 lạnh từ 3 - 5h, sau đó ủ trong khăn ẩm hoặc tra trực tiếp xuống đất cát rồi giữ ẩm 3 - 4 ngày đến khi mầm mọc khỏi mặt đất. Khi ngô đã nảy mầm, tiến hành thu mầm và chiết lấy nước.
-
- Hình 2.3. Mầm ngô đã tách khỏi hạt
- Nước chiết từ quả táo: Táo được sử dụng trong thí nghiệm là táo Gala (vỏ đỏ,
chứa nhiều tinh bột, thịt táo mềm, nhiều nước). Tiến hành gọt vỏ, bổ miếng nhỏ sau đó cho vào xay. Khi thịt táo đã được xay nhuyễn, tiếp tục cho vào lọc, vắt lấy nước. Nước ép táo thu được này sẽ được sử dụng đế nuôi cấy mô cúc CNO1.
2.1.3. Thời gian và địa điếm nghiên cứu
3 2
- Hình 2.2. Hạt ngô đem gieo cho nảy mầm
- Thí nghiệm được tiến hành tại Phòng Thí nghiệm Sinh lý thực vật, Trung tâm Hỗ trợ Nghiên cứu Khoa học và Chuyển giao Công nghệ, trường Đại học Sư phạm Hà Nội 2 từ ngày 10/03/2014 - 15/04/2015.
2.1.4. Dụng cụ và thiết bị thí nghiệm
- a. Thiết bị
-
- cấy,...
2.1.5. Môi trường nuôi cấy
- Các thí nghiệm nuôi cấy in vỉtro đều sử dụng môi trường dinh dưỡng cơ bản (Murashige và Skoog, 1962) [18]: MS + 30g/l đường sacharose + 7,5g/l agar và các dịch chiết hữu cơ thực vật.
- pH môi trường: 5,8.
- Tên thiêt bị - Hãng sản xuât
- Cân kĩ thuật - GM612, Đức
- Tủ lạnh sâu - FRIGO
- Máy đo pH - HM30G/TOA, Đức
- Nôi hâp khử trùng - HV - 110/HIRAYAMA, Nhật
- Tủ lạnh Hitachi - 31AG5D, Thái lan
- Máy cât nước hai lân - Trung Quôc
- Buông cây vô trùng - AV - 110/TELSTAR - Máy khuây từ gia nhiệt - ARE/VELP, Italia
- Cân phân tích - CP224S, Đức
- Buông khí hậu nhân tạo - E8OO/AXYOS, Đức - m fẢ
- Tủ âm - UNIVERSAL 320R/ HETTICH, Đức
- b. Dụng cụ
- Môi trường được khử trùng trong nồi khử trùng ở nhiệt độ 117°c
trong 15 phút.
2.1.6. Điều kiện nuôi cấy
- Các thí nghiệm đều được thực hiện trong điều kiện nhân tạo. - Ánh sáng: các mẫu đều được nuôi cấy với cường độ chiếu sáng 3000
- lux.
- Quang kì: 16 giờ/ngày. - Nhiệt độ phòng: 25°c - 27°c.
- Độ ẩm trung bình: 70% - 74%.