I) I II IV) V)
3.2.2. Định tính cắn phân đoạn n-hexan bằng SKLM
Dịch chấm sắc ký: cắn n-hexan hoà tan hoàn toàn trong methanol. Tiến hành thăm dị với các hệ dung mơi:
Hệ I: Cloroform : methanol (8: 2) Hệ II: Cloroform : methanol (9: 1)
Hệ III: Cloroform : ethyl acetat : n-hexan (19: 1: 1) Hệ IV: Toluen : ethyl aceat : acid formic (5: 3: 1)
Sau khi triển khai sắc kí với các hệ dung mơi trên, kết quả cho thấy hệ III tách tốt nhất. Cắn phân đoạn n-hexan được triển khai với hệ dung môi III và được quan sát ở các điều kiện khác nhau. Kết quả thể hiện trong hình 3.3 và bảng 3.3.
1) 2) 3) 4)
Hình 3.3. Sắc kí đồ cắn phân đoạn n-hexan với hệ dung môi III 1) không phun TT, AST 2) không phun TT, UV254nm
3)không phun TT, UV365nm 4) phun TT, AST
Bảng 3.3. Màu sắc và giá trị Rf cắn phân đoạn n-hexan trên SKLM với hệ dung môi III
STT Khơng có thuốc thử Có thuốc thử
Rf x100 AST UV254nm UV365nm AST 1 Đen+ XD+ Nâu+ 5,00 2 XD+++ 25,00 3 XD++++ Xanh tím++++ 50,00 4 XDT++++ Xanh tím+++ 72,50 Chú thích: +: rất mờ ++: mờ +++: rõ ++++: rất rõ
Khi chưa phun thuốc thử:
Ở ánh sáng thường: khơng thấy có vết nào.
Ở bước sóng 254nm: có 1 vết.
Ở bước sóng 365nm: có 4 vết. Sau khi phun thuốc thử:
Ở ánh sáng thường: có 3 vết.
Trong các vết, nhận thấy một số vết đáng lưu ý:
+ Vết số 2 quan sát được rất rõ ở UV365nm , không thấy xuất hiện ở UV254nm và sau khi phun thuốc thử.
+ Vết số 4 quan sát được rất rõ có màu xanh dương trắng ở UV365nm, màu xanh tím sau khi phun thuốc thử, tuy nhiên không thấy xuất hiện ở UV254nm.