Số lần chiết ảnh hưởng đến hiệu suất chiết nguyên liệu. Nhằm tìm ra phương pháp chiết xuất xác định hàm lượng cafein và EGCG trong lá chè xanh, tiến hành khảo sát số lần chiết xuất nguyên liệu với dung môi ethanol 30%.
Tiến hành
Cân chính xác khoảng 200 mg bột lá chè xanh cho vào bình nón dung tích 100 mL, mỗi lần chiết sử dụng 30 mL ethanol 30%, giữ nhiệt độ ở 50°C, trong vòng 30 phút. Dịch chiết mỗi lần được để nguội về nhiệt độ phòng và gạn vào bình định mức 100 mL, bổ sung nước cất đến vạch.
Phân tích HPLC, xác định hàm lượng cafein và EGCG trong lá chè xanh. Kết quả thu được như sau:
Bảng 3.4 Kết quả khảo sát số lần chiết xác định hàm lượng cafein và EGCG trong lá chè xanh
Lần chiết Hàm lượng cafein (mg/g) Hàm lượng EGCG (mg/g) 1 37,3 111,1 2 8,4 1,7 3 0,7 1,1 Nhận xét
Kết quả cho thấy hàm lượng cafein và EGCG chiết được tại lần thứ 3 nhỏ hơn 2% so với tổng hàm lượng hoạt chất chiết được sau 3 lần. Do vậy, để tiết kiệm thời gian chiết và đảm bảo hoạt chất được chiết kiệt, lựa chọn số lần chiết là 2 lần.
Tóm lại
Điều kiện chiết xác định hàm lượng cafein và EGCG trong lá chè xanh trong đề tài này là:
- Phương pháp ngâm nóng. - Dung môi chiết: ethanol 30%.
24
- Số lần chiết: 2 lần, mỗi lần 30 mL ethanol 30% trong 30 phút ở 50°C. Như vậy, nguyên liệu được sử dụng trong nghiên cứu là lá chè xanh có hàm lượng cafein là 45,7 mg/g và hàm lượng EGCG là 112,7 mg/g (tính theo khối lượng dược liệu khô). Hàm lượng này được xem là 100% khối lượng cafein và EGCG chiết được từ mẫu chè trước xử lý với sCO2 để khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình loại cafein từ lá chè xanh bằng sCO2.