3. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn
3.5. Rèn luyện cây invitro thích nghi với điều kiện môi trường
Khi cây in vitro đạt chiều cao từ 3 - 4cm, có từ 3 - 5 rễ sẽ được chuyển sang môi trường ngoài: trên giá thể xơ dừa + phun dung dịch N:P:K với nồng độ 1-2%, trên giá thể trấu hun + dung dịch N:P:K nồng độ từ 1-2 %. Thời gian 10 ngày phun vào dung dịch N:P:K nồng độ từ 1-2 %. Cây lan trong quá trình này rất dễ bị nhiều bệnh nên chậu và thành chậu phải được xử lý Formalin, với cây lan con có thể phun thường xuyên Boocđô hay Zinep nồng độ 1% hoặc Casuran 1%. Sau 2 tuần xác định tỉ lệ sống sót (%).
a b
c d
Hình 3.5. Cây in vitro sau 2 tuần rèn luyện
(a. Cây in vitro rèn luyện trên giá thể xơ dừa; b. Sau 2 tuần rèn luyện trên giá thể xơ dừa; c. Cây in vitro rèn luyện trên giá thể trấu hun; d. Sau 2 tuần rèn luyện trên giá thể trấu hun)
Quy trình nhân giống in vitro lan Mokara
Đoạn thân chứa mắt ngủ của lan Mokara
(1) Khử trùng mẫu
Ảnh 1: lan Mokara
Mẫu sạch
(2) Tái sinh và nhân nhanh
Ảnh 2: Mẫu vô trùng
Cụm chồi in vitro
(3) Ra rễ - tạo cây hoàn chỉnh
Ảnh 3: Nhân nhanh chồi
Cây hoàn chỉnh
(4) Rèn luyện cây con
Ảnh 4: Ra rễ tạo cây hoàn chỉnh
Cây con in vitro đã qua rèn luyện
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1.Kết luận
Dựa vào những kết quả thu được từ thí nghiệm, tôi xin rút ra một số kết luận sau:
- Môi trường khử trùng phù hợp với giống lan Mokara là xử lí sơ bộ kết hợp với javen 15% trong vòng 6 phút.
- Môi trường tái sinh chồi in vitro thích hợp nhất là MS cơ bản có bổ sung BAP 1mg/l.
- Môi trường nhân nhanh phù hợp nhất là MS cơ bản có bổ sung BAP 1,5mg/l kết hợp với NAA 0,2mg/l.
- Môi trường ra rễ - tạo cây hoàn chỉnh thích hợp nhất là MS cơ bản có bổ sung IAA 0,75mg/l.
- Giá thể rèn luyện cây con in vitro có trạng thái tốt nhất là trên giá thể
2. Kiến nghị
- Tiếp tục nghiên cứu, rèn luyện cây giống lan Mokara trong điều kiện tự nhiên.
- Nghiên cứu sự sinh trưởng, phát triển của cây con in vitro lan Mokara đến khi ra hoa
DANH MỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
1. Đặng Xuân Viên, 2011, “Nhân nhanh in vitro hoa Lan Mokara”, Luận văn tốt nghiệp, trường Đại học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh.
2. GS.TS. Phạm Hoàng Hộ, “Cây cỏ Việt Nam”, tập 3
3. Hồ Thị Nga, Bùi Thanh Hòa, Trần Văn Minh (2017), Vi mô của nhiệt đới Mokara bằng kỹ thuật nuôi cấy hoa, Tạp chí International Journal of Current
Research, 9 (04): 49135-49138.
4. Ngô Quang Vũ (2002), “Những con số hấp dẫn thị trường lan cắt cành thế
giới”, trang 10, Tạp chí Hoan cảnh.
5. Nguyễn Đức Minh Hùng, Trần Văn Minh (2014), Nghiên cứu nguồn sáng
đèn LED xanh và đỏ đến sinh trưởng và phát triển hoa lan mokara và cây hông ( Paulownia) trong nuôi cấy mô Nhân giống cây hoa hồng bằng kỹ thuật nuôi cấy invitro, Tạp chí Nông nghiệp và Phát triển nông thôn, (21): 38-44.
6. Nguyễn Thị Sơn, Từ Bích Thủy, Đặng Thị Nhàn, Nguyễn Thị Lý Anh, Hoàng Thị Nga, Nguyễn Quang Thạch (2014) “NHÂN GIỐNG IN VITRO LAN DENDROBIUM OFFICINALE KIMURA ET MIGO (Thạch Hộc Thiết Bì”, Tạp chí Khoa học và Phát triển, Vol 12, No 8, 1274 – 1282.
7. Nguyễn Thiện Tịch, (2006), “Kỹ thuật nuôi trồng hoa Lan” Nxb Nông Nghiệp TpHCM.
8. Nguyễn Văn Mã, La Việt Hồng, Ong Xuân Phong (2013), Phương
pháp
nghiên cứu sinh lý học thực vật, NXB Đại học Quốc gia Hà Nội.
9. Vương Thị Hồng Loan, Kha Nữ Tú Uyên, Nguyễn Thị Điệp, Lê Thị Thủy Tiên (2016), Khảo sát khả năng nhân nhanh protocorm like bodies và tái sinh chồi lan mokara vàng chanh trong hệ thống ngập chìm tạm thời rita, Tạp chí
Tiếng nước ngoài
10. CBI (2007), The cut flower and floliage market in the EU, CBI market
survey report, 1-20.
11. CR Li, LJ Gan, KXia, X., CSHew (2008) “Responses of carboxylating
enzymes, sucrose metabolizing enzymes and plant hormones in a tropical epiphytic CAM orchid to CO2enrichment” Plant, Cell & amp; Environment, Vol 25, Issue 3.
12. Dagawa Y and Kunisaki JT (1982), “Clonal propagation of orchid by tissue culture”, Plant tissue culture, 8:683-684.
13. Dyah Widiastoety (2014) “Pengaruh Auksin dan Sitokinin Terhadap Pertumbuhan Planlet Anggrek Mokara”, Indonesian Center for Horticulture
Research and Development, Vol 24, Issue 3 , 230-238
14. Ho Thi Nga, Bui Thanh Hoa and Tran Van Minh April (2017), International Journal of Current Research, Micropropagation of tropical
Mokara by flower-stalk culture techunique, Vol. 9, Issue, 04, pp.49135-49138,
15. Jun Yamazaki, Kazamitsu Miyoshi (2006), In vitro Asymbiotic Germination of Immature Seed and Formation of Protocorm by Cephalanthera falcata (Orchidaceae), Annals of botany, 98 (6): 1197-1206.
16. Ken Tokuhara and Masahiro Mii(2001), Induction of embryogenic callus and cell suspension culture from shoot tips excised from flower stalk buds of phalaenopsis (orchidaceae), Society for In Vitro Biology,
17. Maridass M, Mahesh R, Raju G, Benniamin A, Muthuchelian (2010), “
In vitro Propagation of Dendrobium nanum through rhizome bud culture”,
18. Morel G (1964), “A new means ofclonal propagation of orchids”, Am
19. Morel G (1960). “Producing virus-free Cymbium, Am”, Orchid Soc
Bull,
29:495-497
20. Pan-Chi Liou (2005), Marching toward the Market – the Business Potential for Agricultủal Biotechnology in Taiwan, Horticultural Division Agricultural Research Institute, Council of Agriculuture Executive Yuan. Taichung Hsien, 89.
21. Scully R (1967), “Aspects of meristem of meristem culture in the Cattleya alliance, Amer”, Orchid Soc Bull, 36:103-108.
22. USDA (United State Department of Agriculture) (2004), Economic
Research Service, Briefing Room – Floriculture crops, 18-26.
Tài liệu internet
23. https://khoahoc.tv/cat-canh-nhan-giong-lan-co-loi-lon-39887
24. https://vi.wikipedia.org/wiki/H%E1%BB%8D_Lan
25. https://www.academia.edu/17138132/K%E1%BB%B9_thu%E1%BA%ADt_nh