PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Một phần của tài liệu khảo sát hiệu quả của việc sử dụng dung dịch kiềm trong quá trình tinh chế betaglucan từ bã men bia (Trang 32)

Thí nghiệm sẽ đƣợc tiến hành qua các giai đoạn nhƣ sau: - Chuẩn bị vách tế bào men bia

Bã men bia từ nhà máy đem về đƣợc chia làm ba phần: phần thứ nhất sẽ tiến hành pha loãng đến 15% chất khô; phần thứ hai sẽ pha loãng đến 15% chất khô, pH = 4, ủ ở nhiệt

độ 50o

C, 24 giờ; phần thứ ba sẽ pha loãng đến 15% chất khô, pH = 5, ủ ở nhiệt độ 50oC,

24 giờ. Sau công đoạn này đem 3 phần đó đi gia nhiệt ở 80oC trong 15 phút, tiếp theo làm

nguội đến nhiệt độ phòng (26-30oC) rồi đem đi ly tâm với tốc độ là 1500 vòng/phút

khoảng 15 phút tại nhiệt độ phòng. Tiến hành loại bỏ phần dịch bên trên và thu hồi vách

tế bào nấm men bên dƣới. Đem 3 phần vách tế bào này trữ ở 4oC cho đến khi sử dụng.

- Chuẩn bị đồng hóa vách tế bào men bia

Ba phần vách tế bào men bia đƣợc khuấy đục lại trong nƣớc cất để thu đƣợc ba huyền phù bao gồm 15% hàm lƣợng chất khô. Ba huyền phù này đƣợc đem đi đồng hóa ở 300 at, 10 passes.

- Giai đoạn trích ly β-glucan

Ba loại huyền phù vách tế bào đồng hóa này đƣợc đem đi trích ly trong môi trƣờng kiềm và sau đó rửa với nƣớc cất và ly tâm (lặp lại quá trình rửa và ly tâm khoảng 3 lần cho đến khi sạch kiềm) sau quá trình này ta thu đƣợc sản phẩm là khối nhão chứa glucan.

Ta tiến hành thí nghiệm 1 là tìm tỉ lệ trích ly với NaOH 1N tốt nhất đối với 3 loại huyền

phù này ở 80oC trong 2 giờ (ta chọn tỉ lệ trích ly mà hàm lƣợng protein còn lại trong sản

phẩm thấp nhất).

Sau khi có đƣợc tỉ lệ trích ly thích hợp cho từng loại huyền phù ta tiếp tục tiến hành thí nghiệm 2 là khảo sát ảnh hƣởng của nhiệt độ trích ly và nồng độ NaOH đến hiệu quả của quá trình trích ly kiềm đối với từng loại huyền phù ở tỉ lệ trích ly hiệu quả cho từng loại huyền phù mà ta có đƣợc ở thí nghiệm 1.

Rút ra đƣợc từ hai thí nghiệm trên ta có thể có đƣợc tất cả các yếu tố tối ƣu cần thiết để quá trình trích ly kiềm đạt hiệu quả cao nhất nhằm có thể áp dụng vào trong sản xuất.

Một phần của tài liệu khảo sát hiệu quả của việc sử dụng dung dịch kiềm trong quá trình tinh chế betaglucan từ bã men bia (Trang 32)