1. NOI DƯNG, ĐỎI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIỀN CỬU:
2.1. Khâo sát và lựa chọn các điều kiện định ỉuọng:
1.2. L Khảo sát sự ảnh hưởng của tá dược tới độ hấp thụ của cặp ion berberin - xanh bromocresoỉ:
- Tá dược: Cân các lượns tá dược như công thức đã trinh bày ở phần 1.3, trộn đểu.
- Dung dịch chuẩn cỏ tá dược: Cân chính xác một lượng berberỉn chlorid chuẩn (hàm lượns 83,3 %) ÍƯƠĨ12 ứng với khoảng 0,1250 g berberin chlorid. Cân lượng tá dược tương đương 0,1250 g berberin Chlorid theo công thức đẫ trình bày ở phẩn 1.3, thêm lượng berberin chlorid chuẩn vừa cân ờ trên, trộn đeu. Thêm 10 ml nước đe thảm đều bột viên, sau đó them 30 ml nước sôi, khuấy kĩ 5 phủt, để nguội rồi chuyển vào bình định mức 50 ml, thêm nước tới vạch lắc đểu (dung dich A). Đem lọc, bỏ 10 ml dịch lọc đầu. Hút 2 ml dịch lọc trẽn pha loãng với nước vừa đủ 50 ml (dung dịch B).
Hình 2.1. Phổ hấp thụ UV- VIS cùa dung dịch cặp ion
berberin -bromocresol trong Chloroform (Berberín chuồn và tá dược).
Dưng dịch chuẩn: Tiến hành tương tự dung dịch chuển có tá dược, cân lượne berberin chlorid chuẩn (hàm lượng; 83,3 %) nhưng khôns, trộn lẫn với tá CỈƯỢC. Đo và ghi phổ hấp thụ của dung dịch sau khi chiết trong giải só-ns từ 230 - 760 nm, thu được phổ ở hình 2.2
Lấy 2 mỉ của dung địch B cho vào bình gạn, thêm 10 mi dung dịch đệm Britton- Rữbittsỏn pH 7,0; 3 ml duns dich xanh bmmỏcresol 10'4M. Lắc đều, chiết 3 lần (6 ml, 6 ml, 5 ml) bằng chloroform, lắc 5 phút, để yên cho phần lớp hoàn toàn rồi gạn dịch chiết. Gộp dịch chiết chloroform vào bình định mức 20 ml, lọc, thêm chloroform vừa đủ đến vạch, lắc đều. Đõ và ghi phổ hấp thụ của dung dịch sau khi chiết trong giải sóng từ 230 - 760 nm, thu dược phổ ở hình 2.1.Abs
Hình 2.2. Phố hấp thụ UV - VIS của duneí dich cặp ion berbẹrin -bromocresol trong
chloroform (Berberin chuẩn).
- Mầu trắng: Tiến hành tương tự dung dịch chuẩn có tá dược, thay 2 mỉ đung dịch B bằn£ 2 ml nước cất.
Độ hếp thụ của dima dịch chuẩn cỏ tá dược và dune dịch chuẩn không có tá dược đã xử lý như trên có 4 cực đại hắp thụ, kết quả được £hi lại ở bảns 2.1.
Bảng 2.1. Các cực đại hấp thụ của cặp ion berberin — xanh bromocresol tron»
Theo phổ của các dung dịch, ta thấy
:Cặp ion berberin - xanh bromoeresol tạo thành từ dung dịch chuần có tá dươc và dung dich chuẩn không có tả dược có 4 cực đại hấp thụ (bảne; 2.1).
- Độ hấp thụ của 2 dịch chiết cặp ion được tạo thành từ dune; dịch chuẩn có tá dược và dune dịch chuẩn khôn» có tá dược ở cực đại 357 nm tương tự nhau. Do đó, chúng tôi kết luân rằng tá dược sử dụnạ ở đây không làm ảnh hưởng tới sự kết cặp ion của berberin và xanh bromocresol.
2.2.2. Kháo sát ảnh hường cùa quá trình ỉọc dưng dịch Á tới độ hấp thụ của dịch chiết cộp ion:
Từ khảo sát 2.2.1, chủng tôi tháy tá dược không làm ảnh hưởrte tớĩ sự kết cặp ion của berberin và xanh bromocresol. nên tiến hành khảo sát ảnh hưửng của quá trình lọc duns; dịch A tới sự kết cặp ion này.
- Tỉến hành tương tự cách tiến hành chiết cặp ion từ dung địch chuẩn có tá dược ở 2.2.1, nhưng không lọc dung dich A mà chỉ để lắne. rồi hút 2 ml dung dịch trong ở phía trên để pha thành dune dịch B.
Ket quả;
Độ hấp thụ của dich chiết cặp ion được tạo thảnh tử quy trình trên ở bước sóng 357 là 0.458 (tươne tự độ hấp thự của 2 dịch chiết cặp ion được tạo thành từ dung dịch chuẩn có tá dược và dung dịch chuẩn khôns cổ tá dược ở mục 2.2.1).
Do đó chúng tôi kết luận rằng quá trình lọc hay không lọc dung dịch A, không có ảnh hưởng gì tới sự kết cặp ion của berberin và xanh bromocresoL
2.2.3 Khảo sát sự phụ thuộc mật độ quang theo thời gian sau khỉ chiết:
Theo dõi biến thiền hấp thụ tại X = 357 nm theo thời gian sau khi chiết. Ket quâ thu được ở bảng 2.2.
Nhận xét: ĩcết quả thu được cho thấy độ hấp thụ cùa cặp ion là ổn định sau
khi chiết được 30 phút ở nhiệt độ phòng.