SVD các phân đoạn: cao tổng chiết bằng dung môi ethanol 70%, phân đoạn cao chiết bằng dung môi n - butanol, phân đoạn cao chiết bằng dung môi ethyl acetat và phân đoạn cao chiết bằng dung môi ete. Mẫu nghiên cứu thân rễ SVD (Panax bipinnatifidus Seem.) đƣợc thu hái ở Sapa, Lào Cai vào tháng 3 - 2016 và đƣợc giám định thực vật học bởi chuyên gia thực vật học, Khoa Tài nguyên Dƣợc liệu, Viện Dƣợc liệu. Mẫu tiêu bản (PB - 001/2016) đƣợc lƣu giữ tại Khoa Y - Dƣợc, ĐHQGHN.
Hình 2.1. Sơ đồ chiết thu các phân đoạn SVD
TTH các phân đoạn: cao tổng chiết bằng dung môi ethanol 70%, phân đoạn cao chiết bằng dung môi n-butanol, phân đoạn cao chiết bằng dung môi
n-hexan và phân đoạn cao chiết bằng dung môi nƣớc.Thân rễ TTH đƣợc thu hái tự nhiên ở sƣờn đông bắc dãy Hoàng Liên Sơn và một vài nhánh phụ cận kề, thuộc địa phận của 6 xã thuộc huyện Bát Xát và Sa Pa của tỉnh Lào Cai. Mẫu đƣợc giám định tên khoa học là TTH - Panax stipuleanatus H. T. Tsai et
Mẫu khô (500g)
1. Ngâm cồn 70%, nhiệt độ phòng
2. Chiết cồn 70%, 3h/lần; DL/DM: 1/7, (70o
C) 3. Thu hồi dung môi dƣới áp suât giảm
Cao tổng (95,8 g; 19,2%)
1. 95g cao tổng. Hòa nƣớc
2. Chiết lần lƣợt với các dung môi ete, ethyl acetat, n-butanol (3 lần x 500ml/lần)
3. Thu hồi dung môi dƣới áp suất giảm
Ete (5,82 g; 6,1%) Ethyl acetat (2,7 g; 2,8 %) n-butanol (21,7 g; 22,8%)
26
K. M. Feng bởi chuyên gia thực vật học, Khoa Tài nguyên Dƣợc liệu, Viện Dƣợc liệu.
Hình 2.2. Sơ đồ chiết thu các phân đoạn TTH
Dƣợc liệu SVD và TTH sau khi sơ chế, làm khô, ngâm cồn 70% trong 3 ngày - 2 tuần ở nhiệt độ phòng. Chiết hồi lƣu bằng cồn 70% 3 lần, mỗi lần 3h, tỷ lệ 1: 7 (dƣợc liệu: dung môi) đối với SVD và tỷ lệ 1:8 (dƣợc liệu: dung môi) đối với TTH, ở nhiệt độ 70oC. Dịch chiết đƣợc gom lại và lọc qua giấy lọc. Cô quay dƣới áp suất giảm đến kiệt thu đƣợc cao tổng SVD (ký hiệu: PBT), cao tổng TTH (ký hiệu PST). Cho cao tổng dƣợc liệu khuếch tán vào nƣớc cất. Chiết phân bố lần lƣợt với từng loại dung môi là ete, ethyl acetat và
n-butanol (3 lần) đối với SVD và n-hexan, n-butanol, nƣớc (3 lần) đối với
Mẫu khô (1kg)
1. Ngâm cồn 70%, 2 tuần, nhiệt độ phòng 2. Chiết cồn 70%, 3h/lần; DL/DM: 1/8, (70o
C) 3. Thu hồi dung môi dƣới áp suất giảm
Cao tổng
(475 g, 4,75%, độ ẩm: 0,263%)
1. Hòa nƣớc
2. Chiết lần lƣợt với các dung môi n-hexan, n- butanol, nƣớc.
3. Thu hồi dung môi dƣới áp suất giảm
n-hexan (4,74 g, 0,47% Độ ẩm: 0,179%) n-butanol (65,9, 6,6%g, Độ ẩm: 0,148%) Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác đinh độ ẩm Nƣớc (397,8 g, 39,8%): không xác định độ ẩm 1. 350g PĐ nƣớc 1. 350g PĐ nƣớc 1. 350g PĐ nƣớc 1. 350g PĐ nƣớc 1. 350g PĐ nƣớc 2. CC. Diaion 3. Rửa giải bằng nƣớc PĐ nƣớc (295 g, 0,61%, Độ ẩm: 0,369%)
27
TTH. Các dịch chiết mỗi phân đoạn đƣợc gom lại, cô quay dƣới áp suất giảm để loại dung môi đến khối lƣợng không đổi thu đƣợc các phân đoạn cao chiết tƣơng ứng.
Các phân đoạn tƣơng ứng của SVD là phân đoạn cao chiết bằng dung môi ete (ký hiệu: PBEt), phân đoạn cao chiết bằng dung môi ethyl acetat (ký hiệu: PBEA) và phân đoạn cao chiết bằng dung môi n-butanol (ký hiệu:
PBBt). Các phân đoạn cao chiết SVD đƣợc tiến hành tại khoa Y- Dƣợc, ĐHQGHN, do TS. Nguyễn Hữu Tùng cung cấp (Hình 2.1).
Các phân đoạn tƣơng ứng của TTH là phân đoạn cao chiết bằng dung môi n-hexan (ký hiệu: PSnH), phân đoạn cao chiết bằng dung môi n- butanol (ký hiệu: PSBt), phân đoạn chiết với nƣớc tiếp tục chạy sắc kí Diaion và rửa giải bằng nƣớc để thu phân đoạn cao chiết bằng dung môi nƣớc (ký hiệu: PSW). Các phân đoạn dịch chiết TTH đƣợc tiến hành tại khoa Hóa thực vật viện Dƣợc liệu, do PGS.TS. Đỗ Thị Hà cung cấp (Hình 2.2).