- Thu hoạch, xử lý và bảoquản hỗn dịch kháng nguyên:
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.7.1. Nghiên cứu chọn lọc môi trường thích hợp để bảoquản virus viêm gan vịt nhược độc DH EG
-860C trong ba năm cao, hàm lượng kháng thể có khả năng trung hòa hết hàm lượng virus cốđịnh ở liều tiêm.
Như vậy, qua kết quả nghiên cứu chúng tôi khẳng định hỗn dịch kháng nguyên nhược độc viêm gan vịt chế từ chủng DH - EG - 2000 được bảo quản dưới dạng tươi ở -860C hoàn toàn vô trùng có độ an toàn và hiệu lực cao.
3.7. Nghiên cứu điều kiện bảo tồn virus viêm gan vịt nhược độc DH - EG - 2000 DH - EG - 2000
3.7.1. Nghiên cứu chọn lọc môi trường thích hợp để bảo quản virus viêm gan vịt nhược độc DH - EG - 2000 gan vịt nhược độc DH - EG - 2000
Để chọn lọc được môi trường bảo quản thích hợp, chủng virus viêm gan vịt nhược độc DH - EG - 2000 bảo tồn 3 năm ở -860C, sau khi hoàn nguyên được chúng tôi bảo quản trong những môi trường khác nhau (môi trường nước trứng vịt, nước trứng gà, Glycerol 50%, tế bào xơ phôi vịt và tế bào xơ phôi gà).
Đối với môi trường Glycerol 50% chúng tôi sử dụng nước trứng gà bổ sung glycerol với tỷ lệ 1:1 đóng vào ampoul. Với môi trường tế bào xơ phôi gà (vịt), chúng tôi tiến hành nuôi cấy tế bào xơ phôi gà (vịt) một lớp. Đến khi tế bào mọc kín đáy chai nuôi thì cấy virus gốc và theo dõi đến khi bệnh tích tế bào đạt tỷ lệ 70% (thường từ 72 - 96 giờ sau khi gây nhiễm). Thu tế bào, bảo quản ở -200C. Sau 24 giờ lấy ra giải đông. Dùng máy lắc để làm vỡ tế bào, thu hỗn dịch đóng vào ampoul.
Bảo quản mẫu ở -860C trong 12 tháng, tiến hành kiểm tra chỉ số ELD50 của các mẫu virus bảo quản trong các môi trường.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 51 Kết quảđược trình bày trong bảng 3.9.
Bảng 3.9. Kết quả kiểm tra chỉ số ELD50 của chủng virus viêm gan vịt nhược độc DH - EG - 2000 sau thời gian bảo quản bằng những
môi trường khác nhau ở -860C Môi trường Đợt kiểm tra Nước trứng gà Nước trứng vịt Glycerol 50% Tế bào xơ phôi gà Tế bào xơ phôi vịt I 10-4,42 10-4,22 10-4,20 10-5,22 10-4,79 II 10 -4,64 10 -4,42 10 -4,18 10 -5,12 10 -4,63 Tổng hợp 10 -4,53 10 -4,32 10 -4,19 10 -5,17 10 -4,71
Kết quả bảng 3.9 cho thấy, sau thời gian bảo quản, chất lượng giống DH - EG - 2000 bảo quản ở các môi trường khác nhau thông qua chỉ tiêu ELD50 vẫn giữ ổn định. Chỉ số này của virus trong nước trứng gà dao động từ 10-4,42 đến 10-4,64, trong nước trứng vịt là từ 10-4,22 đến 10-4,42, trong Glycerol 50% là từ 10-4,18 đến 10-4,20, trên tế bào xơ phôi gà là từ 10-5,12 đến 10-5,22 và trên tế bào xơ phôi vịt là từ 10-4,63 đến 10-4,79. Như vậy, các môi trường này đều phù hợp cho việc bảo quản virus viêm gan vịt nhược độc DH - EG - 2000.