Phương pháp nuơi cấyđỉnh sinh trưởng sử dụng phần nhỏ nhấtở chồi đỉnh của thân làm mẫu nuơi cấy. Phần này gồm mơ phân sinh và vài phác thể lá. Việc tách và nuơi cấy đỉnh sinh trưởng nhằm tạo các cây sạch bệnh. Mẫu cấy càng nhỏ khả năng tạo cây sạch
bệnh càng cao. Ví dụ, mơ phân sinh từ 0,1 đến 0,15 mm cĩ thể cĩ 100% sạch virus. Tuy nhiên mẫu cành nhỏ khảnăng sống sĩt càng thấp. Do vậyngười ta thường sử dụng mẫu
cấy từ 0,25 đến 1 mm.
- Đỉnh sinh trưởng được tách dưới kính lúp cĩ độ phĩng đại từ 10 đến 40 lần được
làm vơ trùng bằng cách lau cồn thật sạch thân kính và bàn để mẫu tách. Trong quá trình tách luơn chuẩn bị một tấm bơng tẩm cồn trên bàn mang mẫuđể tiện việc vơ trùng và làm nguội dao.
- Gắp mẫu lên bàn đặt mẫu, dùng mũi dao mổ tách bỏ hết những lá ngồi, chỉđể lại
hai lá nguyên thủy. Tách các lá lần lượt từ ngồi vào trong, trách để lưỡi dao làm tổn thương phần chồiđỉnh.
- Sau khi tách bỏ hết các là ngồi, dùng mũi dao mổ nhọn cắt lấy phần đỉnh sinh
trưởng cĩ hai phác thể lá cĩ kích thước 0,6mm. Giữ nguyên đỉnh sinh trưởng trên mũi
dao để chuyển vào mơi trường nuơi cấy.
4.3 - Nuơi cấyđỉnh sinh trưởng
Đối với những loại cây tiết nhiều phenol thường nên được nuơi cấy trên mơi
trường cĩ bổ sung than hoạt tính. Mơi trường nuơi cấy đỉnh sinh trưởng Dạ Yên Thảo thường bổ sung BA 2mg/lít, NAA 0,1mg/lít. Mơi trường cĩ thể là đặc hoặc lỏng (cĩ cầu
giấy).
- Đỉnh sinh trưởng sau khi tách xong để nguyên trên lưỡi dao mổ.
- Đưa lưỡi dao mổ vào mơi trường nuơi cấy, đâm xuyên lưỡi dao mổ vào bề mặt
mơi trường, đỉnh sinh trưởng sẽđược giữ ngay ngắn trên bề mặt mơi trường nuơi cấy. - Đỉnh sinh trưởngđược nuơi cấyở nhiệtđộ 250C , ánh sáng 3000 lux.
Nếu đỉnh sinh trưởng tiết nhiều phenol thì nên cấy chuyền liên tục trong quá trình nuơi cấy.