Faust E. C. và cs (1929) [24] đã lập nên một phân giống là Spirometra trong giống Diphyllobothrium. Muller (1935) [29] đã mô tả loài Diphyllobothrium
mansonoides trên mẫu vật tìm được từ chó và mèo ở vùng Syracus (New York). Đến năm 1937 Muller đề xuất giống Spirometra và thống nhất đổi tên loài
Diphyllobothrium mansonoides thành loài Spirometra mansonoides.
Rudolphi (1918) đã phát hiện ấu trùng của sán dây loài Spirometra ericnaice trên loài nhím ở châu Âu. Faust E. C. và cs (1929) [24] cũng đã phát hiện ấu trùng loài này trên nhím ở Trung Quốc và dạng sán trưởng thành ở chó. Khi nghiên cứu về hệ enzym của loài Spirometra erinacei ở Nhật Bản và ở Australia, Fukumoto S. và cs (1992) [25] nhận xét rằng hai loài sán này là giống nhau.
Cysticercus tenuicollis với số lượng lớn ký sinh gây ra viêm gan, hoại tử, thoái hoái dạng hạt, viêm phổi (Nath S. và cs 2010) [30].
Theo kết quả nghiên cứu của Dalimi A. và cs (2006) [22], kiểm tra 83 chó ở các tỉnh phía tây của Iran cho thấy: có 38,55% chó nhiễm Dipylidium caninum; 53,01% chó nhiễm Taenia hydatigena; 7,23% chó nhiễm Taenia ovis; 4,82% chó nhiễm Multiceps multiceps; 13,25% chó nhiễm Echinococcus granulosus.
Một kết quả nghiên cứu khác của Dubna S. và cs (2007) [23] cho thấy, tỷ lệ nhiễm sán dây Dipylidium caninum dao động từ 0,7% - 1,3%, thấy nhiều ở vùng nông thôn. Kết quả nghiên cứu trước đó của Oliveira Sequeira T. (2002) cũng tương tự.
Theo kết quả nghiên cứu của Yotko K. và cs (2009) [28], tỷ lệ nhiễm
loài Taenia hydatigena của chó ở vùng Tây Bắc Bulgaria là 47,85%.
Tylkowska A. và cs (2010) [34] đã kiểm tra 763 mẫu phân chó thu thập ở phía tây của Pomerania (648 mẫu được thu từ khu vực thành phố, 115 mẫu được lấy từ các khu vực nông thôn) từ năm 2006 - 2007 cho thấy, 34,84% chó nhiễm các loài ký sinh trùng, trong đó nhiễm sán dây Dipylidium caninum là 4,07%.
Tuzer E. và cs (2010) [33] đã nghiên cứu hiệu quả của thuốc praziquantel tiêm để điều trị sán dây ở chó. Tác giả đã tiến hành thí nghiệm trên 26 chó nhiễm sán dây, trong đó có 14 chó nhiễm Dipylidium caninum,
8 chó nhiễm Taenia spp, 2 chó nhiễm Echinococcus granulosus và 2 chó nhiễm cả hai loài Dipylidium caninum, Taenia spp. với liều 0,1 ml/ kg thể trọng. Thí nghiệm được theo dõi chặt chẽ, nhốt riêng từng chó để kiểm tra sự thải phân. Kết quả, sau 2 hoặc 3 ngày dùng thuốc không thấy mẫu phân nào còn đốt sán, không có phản ứng phụ nào xảy ra, hiệu quả tẩy trừ là 100%.
Phần 3
ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1. Đối tượng, vật liệu, thời gian, địa điểm nghiên cứu
3.1.1. Đối tượng nghiên cứu
- Chó, lợn nuôi tại một số địa phương của Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên. - Bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra.
3.1.2. Vật liệu nghiên cứu
* Các loại mẫu dùng trong nghiên cứu:
- Mẫu ấu trùng sán dây Cysticerscus tenuicollis thu thập từ lợn. - Mẫu sán dây ký sinh ở đường tiêu hóa chó.
* Dụng cụ, thiết bị và hóa chất:
- Kính hiển vi quang học, kính lúp.
- Lọ đựng hoá chất, lamen, lam kính, đĩa petri, chậu thủy tinh, cốc thủy tinh, chén nhuộm, ống đong, giá đựng tiêu bản,...
- Hóa chất gồm: glyxerin, axit lactic, thuốc nhuộm carmin, cồn (từ 70o đến 100o), nước cất, xylen, baume-canada,...
3.1.3. Thời gian và địa điểm nghiên cứu
* Thời gian nghiên cứu: từ ngày 9/6/2011 đến ngày 24/11/2014 * Địa điểm nghiên cứu:
- Đề tài được thực hiện ở một số xã thuộc Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên. - Địa điểm xét nghiệm mẫu:
+ Phòng thí nghiệm Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên.
3.2. Nội dung nghiên cứu
3.2.1. Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn tại một số xã thuộc Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên
3.2.1.1. Tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn tại một số xã thuộc Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn tại các
địa phương.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn theo tuổi. - Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn theo tính biệt. - Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn theo các tháng.
3.2.1.2. Nghiên cứu mối tương quan giữa tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn với tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó tại một số
xã thuộc Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên
- Sự phân bố các loài sán dây ký sinh ở đường tiêu hóa chó.
- Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán dây Taenia hydatigena chó tại một số xã thuộc Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên.
- Xác định tương quan giữa tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó với tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn.
3.2.2. Nghiên cứu bệnh học bệnh Cysticercus tenuicollis
- Triệu chứng lâm sàng của lợn bị bệnh.
- Vị trí ký sinh và khối lượng của ấu trùng Cysticercus tenuicollis. - Bệnh tích đại thể ở các khí quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh.
3.3. Bố trí thí nghiệm và phương pháp nghiên cứu
3.3.1. Bố trí điều tra và phương pháp xác định tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn Cysticercus tenuicollis ở lợn
3.1.1.1. Bố trí thu thập mẫu
Bố trí thu thập mẫu theo phương pháp lấy mẫu phân tầng. Cụ thể như sau: Địa phương (xã/phường) Số lợn mổ khám (mẫu) Mỏ Chè 194 Phố Cò 179 Bá Xuyên 215 Tính chung 588
3.3.1.2. Phương pháp xác định tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn
Mổ khám bằng phương pháp mổ khám phi toàn diện, kiểm tra nội tạng lợn
và thu thập ấu trùng Cysticercus tenuicollis.
Bộc lộ xoang ngực và xoang bụng lợn: phát hiện ấu trùng Cysticercus
tenuicollis ký sinh trên bề mặt gan, lách, màng treo ruột, màng mỡ chài… Thu thập, đếm số lượng ấu trùng/lợn và bảo quản ấu trùng trong cồn 70º (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2011) [8].
3.3.1.3. Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng Cysticercus tenuicollis gây ra ở lợn
Những yếu tố cần xác định liên quan đến tình hình nhiễm ấu trùng
- Tuổi lợn: Tuổi lợn được phân ra 3 lứa tuổi: + ≤ 6 tháng
+ > 6 - 12 tháng + > 12 tháng
- Tháng: Các tháng được theo dõi gồm từ tháng 6 - 10/2014.
3.3.2. Bố trí điều tra và phương pháp xác định tình hình nhiễm sán dây ở chó
3.3.2.1. Bố trí điều tra tình hình nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó
Bố trí thu thập mẫu sán dây ở đường tiêu hoá của chó theo phương pháp lấy mẫu phân tầng. Mẫu được thu thập tại các địa phương có lợn được mổ khám kiểm tra ấu trùng sán dây Cysticercus tenuicollis.
3.2.2.2. Phương pháp xác định tình hình nhiễm sán dây ở chó - Phương pháp mổ khám thu thập sán dây ở chó
Để tìm sán dây ký sinh ở đường tiêu hoá, tiến hành mổ khám chó theo phương pháp mổ khám không toàn diện cơ quan tiêu hoá của Skrjabin (1928), thu thập mẫu sán dây ký sinh ở ruột của chó.
Sán dây sau khi thu thập được làm chết tự nhiên trong nước lã, sau khi làm sạch bằng nước cất, bảo quản trong cồn 70º. Phân loại sơ bộ các loài sán dây đã thu thập được dưới kính lúp và kính hiển vi, căn cứ vào hình thái, cấu tạo của sán dây trưởng thành theo khoá định loại của Phan Thế Việt và cs (1977) [17], Nguyễn Thị Kỳ (2003) [5]. Việc xác định chính xác thành phần loài sán dây ở đường tiêu hoá chó được thực hiện ở Viện sinh thái và Tài nguyên sinh vật.
- Định loại sán dây: Định loại sán dây theo hệ thống phân loại của Schulz
và Gvozdev (1970) trên tiêu bản nhuộm carmin (Phan Thế Việt và cs, 1977
[17]; Nguyễn Thị Kỳ, 2003 [5]).
Làm tiêu bản tạm thời (làm tiêu bản trong): Sử dụng hỗn hợp dung dịch gồm: glyxerin + axit lactic + nước cất theo tỷ lệ 1:1:1. Phương pháp này có thể quan sát cấu tạo sơ bộ của đầu, giúp cho việc định loại sán dây được nhanh chóng.
Làm tiêu bản cốđịnh:
Quy trình nhuộm như sau:
+ Tách mẫu: tách những sán cơ thể có đầy đủ các bộ phận (đầu, cổ, thân). + Chọn những mẫu đẹp nhất có cấu tạo đầy đủ (đầu, cổ, thân, đốt già) + Rửa mẫu trong nước cất với thời gian 10 - 15 phút.
+ Ép mẫu: đặt mẫu vào giữa hai lam kính để ép cho mẫu thẳng, các mẫu khác làm tương tự, sau đó đặt các mẫu chồng lên nhau, ngâm trong nước với thời gian 15 phút, sau đó mở ra từ từ.
Trường hợp mẫu tươi: thu mẫu, rửa nhẹ nhàng cho sạch, gắp từng con đặt cẩn thận lên lam kính cho thẳng rồi đặt lam kính khác lên; tiếp tục với những mẫu khác như vậy. Sau đó đặt chồng lên nhau trong một chậu nhựa có nắp đậy, cho cồn 70o vào ngập mẫu, để trong 10 ngày, sau đó nhấc ra cho vào chậu nước 5 - 10 phút để sán tự bong ra, gắp cho vào cồn 70o
, sau 1 tuần đem nhuộm.
+ Mẫu sán lấy ra từ cồn 70º được ngâm trong thuốc nhuộm carmin từ 10 - 15 phút, rồi chuyển lần lượt sang cồn 70º, 80º, 96º, 100º với thời gian 15 - 30 phút (tùy kích thước từng mẫu); rồi làm trong bằng xylen.
+ Chuẩn bị lamen và lam kính, nhỏ 1 - 2 giọt baume-canada lên lam kính, sau đó lấy que gắp gắp sán đặt lên giọt baume-canada, đậy lamen lên. Sau một ngày lấy ra soi kính hiển vi.
+ Sau khi làm xong mẫu, điền đầy đủ thông tin về mẫu lên một đầu lam kính.
- Phương pháp xác định cường độ nhiễm sán dây Taenia hydatigena
Cường độ nhiễm sán dây được xác định bằng số lượng sán dây ký sinh/chó bằng phương pháp mổ khám, thu thập và đếm số lượng sán ký sinh ở mỗi chó.
3.3.3. Phương pháp nghiên cứu tương quan giữa tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis lợn với tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó Cysticercus tenuicollis lợn với tỷ lệ nhiễm sán dây Taenia hydatigena ở chó
Xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn và tỷ lệ nhiễm
sán dây Taenia hydatigena ở chó tại các địa phương; sau đó nhập số liệu vào
phần mềm Minitab 14.0 để xác định hệ số tương quan và vẽ đồ thị.
3.3.4. Phương pháp nghiên cứu bệnh học bệnh Cysticercus tenuicollis
- Phương pháp nghiên cứu vị trí ký sinh, khối lượng của ấu trùng
Cysticercus tenuicollis trên lợn: Sau khi mổ khám lợn, xác định vị trí của ấu
trùng Cysticercus tenuicollis, đếm số lượng ấu trùng tại các vị trí khác nhau,
thu thập ấu trùng, xác định khối lượng ấu trùng bằng cân điện tử.
- Phương pháp nghiên cứu triệu chứng lâm sàng, bệnh tích đại thể và những biến
đổi vi thể ở các cơ quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh trên lợn:
Triệu chứng lâm sàng được thống kê qua quan sát những biểu hiện của lợn như thể trạng, lông, da, niêm mạc, ăn uống …
Bệnh tích đại thể được xác định bằng cách quan sát những tổn thương ở các cơ quan có ấu trùng Cysticercus tenuicollis ký sinh.
3.4. Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu thu được được xử lý bằng phương pháp thống kê sinh học (Nguyễn Văn Thiện, 2008) và trên phần mềm Minitab 14.0.
PHẦN 4
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
4.1. Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh do ấu trùng Cysticercus
tenuicollis gây ra ở lợn tại Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên
4.1.1. Tình hình nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn tại Thị xã Sông Công, tỉnh Thái Nguyên Sông Công, tỉnh Thái Nguyên
4.1.1.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn tại các địa phương
Đề cập đến tác hại do sán dây gây ra, Phạm Sỹ Lăng (2002) [10], Vương Đức Chất và Lê Thị Tài (2004) [1] cho biết: Sán dây là một bệnh phổ biến ở chó, thể cấp tính nếu như không được chăm sóc điều trị kịp thời, tỷ lệ chết có thể lên tới 60 - 70 %.
Tuy nhiên, tác hại do sán dây gây ra ở chó không chỉ dừng lại ở giai đoạn sán trưởng thành. Về vai trò gây bệnh ấu trùng sán dây, đã có nhiều tác giả nghiên cứu và cho thấy tác hại nguy hiểm của ấu trùng sán dây chó.
Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [6]: ấu trùng của sán dây Taenia
hydatigena ký sinh ở lợn, trâu, bò, dê, kể cả ở người, gây bệnh ấu sán cổ nhỏ, hiện vẫn chưa có thuốc điều trị.
Để xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis tại 3 xã, phường của Thị xã Sông Công chúng tôi đã mổ khám 588 con lợn. Kết quả được trình bày ở bảng 4.1 và hình 4.1.
Bảng 4.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis ở lợn tại các địa phương
Địa phương (xã/phường) Số lợn mổ khám (con) Số lợn nhiễm (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Cường độ nhiễm (ấu trùng/con) Mỏ Chè 194 18 9,28 1 – 9 Phố Cò 179 26 14,53 2 – 12 Bá Xuyên 215 35 16,28 1 – 18 Tính chung 588 79 13,43 1 – 18 9,28 14,53 16,28 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 Mỏ Chè Phố Cò Bá Xuyên Địa phương Tỷ lệ (%)
Kết quả bảng 4.1 và hình 4.1 cho thấy: - Về tỷ lệ nhiễm:
Trong tổng số 588 lợn mổ khám ở 3 xã, phường: Mỏ Chè, Phố Cò, Bá Xuyên có 79 lợn nhiễm ấu trùng Cysticercus tenuicollis, tỷ lệ nhiễm chung là 13,43%; biến động từ 9,28% - 16,28%. Phường Mỏ Chè mổ khám 194 lợn có 18 lợn nhiễm, phường Phố Cò mổ khám 179 lợn có 26 lợn nhiễm và xã Bá Xuyên mổ khám 215 lợn có 35 lợn nhiễm, tỷ lệ lần lượt là 9,28%; 14,53%; 16,28%.
Theo Trịnh Văn Thịnh và cs (1977) [15], sự phân bố theo vùng của các loài giun, sán quyết định phần lớn tình hình nhiễm bệnh giun, sán ở gia súc.
Đặc điểm kinh tế xã hội cũng ảnh hưởng lớn tới tỷ lệ nhiễm ấu trùng
Cysticercus tenuicollis ở lợn. Ở xã Bá Xuyên và phường Phố Cò hầu hết người dân chăn nuôi với quy mô nông hộ nhỏ, nuôi lợn với thời gian dài, vệ sinh chăm sóc chưa được chú trọng. Còn ở phường Mỏ Chè chăn nuôi lợn phần lớn theo phương thức chăn nuôi công nghiệp, người dân đã có ý thức tốt trong về vấn đề vệ sinh chuồng trại và phòng bệnh ký sinh trùng nên làm giảm đáng kể tỷ lệ nhiễm bệnh ở gia súc.
Trong vòng đời của sán dây Taenia hydatigena có giai đoạn ấu trùng
Cysticercus tenuicollis. Lợn bị bệnh do nuốt phải trứng sán dây Taenia
hydatigena. Điều này liên quan tới số lượng chó nuôi ở các địa phương. Qua khảo sát, chúng tôi thấy bà con ở xã Bá Xuyên nuôi nhiều chó hơn ở phường Mỏ Chè và Phố Cò. Đó là lí do giải thích tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus
tenuicollis ở lợn tại xã Bá Xuyên cao hơn so với phường Mỏ Chè và phường Phố Cò.
Như vậy, điều kiện tự nhiên và xã hội có ảnh hưởng tới sự tồn tại và phát triển của các loài giun, sán, trong đó có sán dây Taenia hydatigena và ấu trùng của nó.
- Về cường độ nhiễm:
Tính chung, lợn nhiễm từ 1 - 18 ấu trùng/con, trong đó lợn ở xã Bá Xuyên nhiễm ấu trùng Cystiecrcus tenuicollis với cường độ cao nhất (1 - 18 ấu trùng/ con), sau đó đến phường Phố Cò (2 - 12 ấu trùng/con), thấp nhất là phường Mỏ Chè (1 - 9 ấu trùng/con).
Kết quả nghiên cứu của chúng tôi về tỷ lệ nhiễm ấu trùng Cysticercus
tenuicollis thấp hơn so với kết quả nghiên cứu của Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2012) [9]. Qua điều tra tại Phú Thọ, tác giả cho biết tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán dây biến động từ 10,28 - 37,66%, cường độ từ 1 – 56 ấu trùng/con. Theo chúng tôi, sự khác nhau này là do khác nhau về điều kiện tự nhiên và xã hội, đặc biệt là số lượng chó nuôi ở các địa phương.
Công tác vệ sinh thú y có ý nghĩa quan trọng trong việc hạn chế sự lây lan,
