trường nước thải.
Quan sát tế bào
Dùng kính hiển vi quang học vật kính 100, quan sát sau 24 giờ bằng cách nhuộm bào tử. Thực hiện tiêu bản giọt ép từ canh trường trong các môi trường GYS lỏng có giống vi khuẩn đã tăng sinh hoặc từ ống giống thạch nghiêng và sinh khối ở môi trường nuôi cấy là nước thải sau khi tiến hành gây shock nhiệt 800C trong 10 phút, đặt lên băng 5 phút và cuối cùng là ly tâm 8000 vòng/phút, nhiệt độ 40C trong 20 phút. Sau khi có tiêu bản giọt ép, thực hiện nhuộm bằng thuốc nhuộm xanh metylen để quan sát đại thể bào tử vi khuẩn. [1]
Các bước thực hiện
Pha dung dịch nhuộm xanh methylen: pha 0,1g xanh methylen vào 10 ml methanol 96% hòa vào dung dịch 0,01% KOH.
Bước 1: Làm vết bôi và nhuộm tiêu bản
- Dùng que cấy vô trùng lấy một ít bào tử vi khuẩn vào 1 giọt thuốc nhuộm xanh metylen ở giữa lam kính làm khô trong không khí hoặc ngược lại.
- Cố định vết bôi bằng cách đặt nhẹ nhàng phiến kính lên, đậy lá kính sao cho chân của lá kính chạm vào giọt nước hay giọt màu, nghiêng một góc 45o và hạ lá kính xuống để không có bọt khí.
Bước 2: Quan sát tiêu bản trên kính hiển vi quang học với vật kính dầu (x100) Đặt phiến kính lên bàn mẫu, hạ tụ quang, đóng bớt chắn sáng, dùng ốc chỉnh thô nâng bàn vật mẫu chạm tới vật kính, đặt mắt vào quan sát, dùng ốc chỉnh thô hạ bàn mẫu xuống cho đến khi thấy ảnh VSV rồi dùng nút chỉnh vặn để xem rõ ảnh. Trên bàn mẫu, dùng ốc di chuyển mẫu vật di chuyển phiến kính đến vùng muốn quan sát. [1, 26]