Những nghiên cứu của Skoog cho thấy tỷ lệ auxin/cytokinin ở mức độ cân bằng sẽ thuận lợi cho sự hình thành mô sẹo.
Theo Dmitrieva (1972) giai đoạn đầu của quá trình phân bào đợc cảm ứng bởi auxin còn trong các giai đoạn tiếp theo thì cần tác động đồng thời của cả hai chất kích thích sinh trởng. Với mục đích nghiên cứu sự tơng hỗ giữa auxin và cytokinin lên quá trình hình thành mô sẹo, chúng tôi đã tiến hành cấy mẫu trên môi trờng tạo mô sẹo MS cải tiến + 2% đờng sucrose + 10% nớc dừa + 0,8% agar + 0,4g/l casein + tổ hợp auxin và cytokinin ở các nồng độ khác nhau Mẫu cấy đợc nuôi trong phòng tối với nhiệt độ ổn định.
Kết quả đợc trình bày ở bảng 3.
Bảng 3. ảnh hởng của tỷ lệ auxin/ cytokinin lên khả năng tạo mô sẹo sau 7, 9, 12 ngày. Công thức 2,4D (mg/l) BAP (mg/l) NAA (mg/l) Số mẫu cấy
Tỷ lệ tạo mô sẹo (%) sau 7 ngày 9 ngày 12ngày
TM7 2 1 1 21 42,86 66,67 100
TM8 3 1 1 21 47,62 76,19 100
TM10 1 2 1 21 33,33 66,67 100 TM11 1 3 1 21 28,57 61,90 100 TM12 1 4 1 21 23,81 57,14 100 TM13 1 1 2 21 33,33 71,43 100 TM14 1 1 3 21 38,09 76,19 100 TM15 1 1 4 21 71,43 100 100
Từ kết quả thu đợc chúng tôi có nhận xét: Khi bổ sung tổ hợp auxin và cytokinin ở nồng độ khác nhau thì thời gian hình thành mô sẹo là khác nhau. Sau 7 ngày nuôi cấy chúng tôi nhận thấy: Khi tăng nồng độ 2,4D: 2 - 4mg/l, tỷ lệ tạo mô sẹo tăng 42,86 – 76,19% và nồng độ NAA tăng từ 2 – 4mg/l thì tỷ lệ tạo mô sẹo cũng tăng từ 33,33 – 71,43%. Với BAP khi tăng nồng độ từ 2 – 4mg/l tỷ lệ tạo mô sẹo giảm 33,33% - 23,81%. Các auxin khác nhau (2,4D và NAA) thì tỷ lệ hình thành mô sẹo là khác nhau nhng sau 9 ngày nuôi cấy ở công thức TM9 và TM15 cho tỷ lệ tạo mô sẹo là 100%, trong khi đó TM7 đạt 66,67%, TM8 đạt 76,19%, TM10 đạt 66,67%, TM11 đạt 61,90%, TM12 đạt 57,14%, TM13 đạt 71,43%, TM14 đạt 76,19%. Sau 12 ngày 100% mẫu cấy đều hình thành mô sẹo.
Nh vậy, ở các tỷ lệ auxin/cytokinin (2,4D/NAA/BAP) khác nhau cho tỷ lệ tạo mô sẹo khác nhau. ở công thức TM9 (4mg/l 2,4D +1 mg/l BAP + 1mg/l NAA) và TM15 (1mg/l 2,4D + 1mg/l BAP + 4mg/l NAA) cho khả năng tạo mô sẹo tốt nhng công thức TM9 cho khả năng tạo mô sẹo sớm và tốt nhất (76,19% sau 7 ngày và 100% sau 9 ngày).