Các chất kháng sinh như cefotaxim và ampixilin là các chất ức chế mạnh ANAE của các tế bào máu có nhân. Ớ nồng độ trên 12,5 mg/ml trong dung dịch ủ cơ chất các chất này ức chế hầu như hoàn toàn ANAE. Tuy vậy riêng cefotaxim 100% chỉ ức chế ANAE của các tế bào có nhân không thuộc dòng bạch cầu đoạn ưa axit. Như vậy có thể dùng cefotaxim như một chất ức chế chỉ thị để phân biệt dòng bạch cầu đoạn ưa axit.
Gentamycin cho nghiệm pháp hai ống dương tính nên không đánh giá được tác dụng của nó lên quá trình nhuộm.
Đối với các vitamin Bj, B,2 gây ức chế tương đối rõ rệt đối với ANAE của các tế bào máu có nhân. Tuy vậy ANAE nhạy cảm với vitamin Bi2 hơn là Vitamin B, bởi nó có khả năng ức chế ở nồng độ rất nhỏ cỡ 50 |!g/ml. Còn ở nồng độ vitamin Bj khoảng 5-10 mg/ml thì ANAE của hầu hết các tế bào máu có nhân đều bị ức chế.
Ngược lại với vitamin B12 và vitamin B| thì vitamin B6 lại là chất hoạt hoá khi ở nồng độ nhỏ hơn 5 mg/ml. Khi thử nghiệm ở nồng độ cao hơn (lOmglml) vitamin B6 không thấy ảnh hưởng đến hoạt tính xúc tác của ANAE.
Đối với natriazid là một chất bảo quản chống nấm mốc và vi trùng phát triển ớ nồng độ rất thấp cỡ 1%0. Với nồng độ 0,5 mg/ml thì ANAE của các tế bào máu có nhân bị ức chế gần như hoàn toàn.
Cỏn đối với thuốc bảo vệ thực vật:
Nhóm photpho hữu cơ chúng tôi chọn Bili là một chất hiện nằm trong danh mục thuốc bảo vệ thực vật được phép lưu hành tại Việt Nam hiện nay. Khi bổ sung vào dung dịch ủ cơ chất với nồng độ 2,9% thì hầu hết ANAE của tế bào máu có nhân trở lên mất hoạt tính. Kết quả mà chúng tôi thu được cũng phù hợp với kết quả của RD Newcomb và c.s (1997) là ANAE đã bị mất hoạt tính khi bổ sung các hợp chất có chứa photpho hữu cơ vào dung dịch ủ cơ chất [118].
Đối với các chất bảo vệ thực vật thuộc nhóm clo và carbamat hữu cơ thì sự ức chế cũng rất mạnh. Clorothanonil ở nồng độ 0,5 mg/ml và bassa ở nồng độ 2,9% đều cho phản ứng
CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN
o Kết quả tính toán về mặt lượng tử bằng phương pháp tính gần đúng PM3 thuộc phần mềm HYPERCHEM 4.5 đã cho thấy sự phù hợp giữa tính toán lý thuyết và lý thuyết hoá học cơ bản đối với cơ chế động học của phản ứng nhuộm ANAE bằng phương pháp phẩm màu azo. Thông qua tính toán bằng phương pháp hoá học lượng tử đã dự đoán được các yếu tố ảnh hưởng và điều kiện tối un cho phản ứng như sau:
Về mặt nhiệt động học thì phản ứng đi qua một hàng rào thế năng bằng 11,971 kcal/mol và AH°298=-271,647 kcal/mol. pH của dung dịch ủ cơ chất nên tiến hành ở 7-8, tại pH này dạng cân bằng hỗ biến của sản phẩm thuỷ phân cơ chất nằm ở dạng naphtolat và mật độ điện tích electron tại nguyên tử Cị của hợp phần azo bằng -0,313 và nguyên tử N của muối điazo bằng +0,488.
© Kết quả tối ưu hoá thực nghiệm bằng phương pháp đơn hình đã tìm ra được điều
kiện tối ưu cho phản ứng nhuộm ANAE như sau:
Nồng độ cơ chất trong dung dịch nhuộm tối ưu bằng 0,07 mg/ml, pH thu được phù hợp với các tính toán lượng tử ở phần trên và bằng 8. Nhiệt độ tối ưu cho quá trình nhuộm là 37°c. Thời gian nhuộm là một giờ.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT
1. Đặng Như Tại: Cơ sở hoá học lập thể, NXBGD, 1998, tr 28.
2. Đặng Văn Giáp: Liên quan giữa cấu trúc - tác dụng và thiết kế phân tử bằng máy vi tính, NXBGD, 1998, tr 98.
3. Lâm Ngọc Thiềm: Giáo trình hoá học lượng tử cơ sở, NXBKHKT, 1999, tl, tr
79.
4. Lê Đức Ngọc: Động học enzym, Khoa Hoá học trường Đại học Khoa học tự nhiên, 1998, tr 59.
5. Lê Đức Ngọc: Nhập môn thực hành phương pháp nghiên cứu thực nghiệm, ĐHQGHN, 2000, tr 52.
TÀI LIỆU TIẾNG ANH
13. Al-Katib A, Mohammad RM, Khan K, Dan ME, Pettit GR, Sensenbrenner LL: Bryostatin 1-induced modulation of the acute lymphocytesblastic leukemia cell line Reh,./.
Immunother, 1993 Jul, volume 14, issue 1, p.33-42.
14. Atterberry TT, Bumett WT, Chambers JE: Age-related differences in parathion and chlorpyrifos toxicity in male rats: target and nontarget esterase sensitivity and cytochrome P450-mediated metabolism, Toxicol Appl Pharmacol, 1997 Dec, volume 147, issue 2, p.411-8.
15. Awal MD, Saifuddin AK: The effect of long-term exposure to anthio on serum esterases and ruminal microorganisms of male calves, Vet Hum Toxicol, 1994 Jun, volume 36, issue 3, p. 199-202.
16. Bames.A: Acute Leukemias: The F.A.B classification and more, 1998, p.4.
17. Becker A, Bottcher A, Lackner KJ, Fehringer p, Notka F, Aslanidis c, Schmitz G: Purification, cloning, and expression of a human enzyme with acyl coenzyme A: cholesterol acyltransferase activity, which is identical to liver carboxylesterase,
Arterioscler Thromb, 1994 Aug, volume 14, issue 8, p. 1346-
55.
18. Bell A. L, Markey G. M, McCaigue M.D, Middleton. D, McCormick J.A, Wilson A.G, Morris T.C.M.: Heredofamilial deficiency of monocytes esterase in patients with
Morphol, 1993 Sep, volume 31, issue 3, p. 169-73.
22. Blind PJ, Buchler M, Blackberg L, Andersson Y, Uhl W, Beger HG, Hernell O: Carboxylic ester hydrolase. A sensitive serum marker and indicator of severity of acute pancreatitis, hit J Pancreatol, 1991 Jan, volume 8, issue 1, p.65-73.
23. Bogdanffy MS: Biotransformation enzymes in the rodent nasal mucosa: the value of a histochemical approach, Environ Health Perspect, 1990 Apr, volume
85, p. 177-86.
24. Bora PS, Guruge BL, Miller DD, Chaitman BR, Ruyle MS: Purification and characterization of human heart fatty acid ethyl ester synthase/carboxylesterase, J Mol Cell Cardiol, 1997 Jan, volume 29, issue 1, p.425.
25. Brestkin AP, Efimtseva EA, Kuznetsova LP, Nikol'skaia EB, Fridland SV: Features of inhibiting butyrylcholinesterase and carboxylesterase hydrolysis with fluoranhydride esters of beta,beta-diphenylethylphosphonic acid, Biokhimiia, 1996 Mar, volume 61, issue 3, p.472-9.
26. Buat.ML, Landemore.G and Izard.J: Alpha naphtyl acatate estarase activities in guinea pig kurloff cells: a cytochemical and electrophoretic study, , Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 09/01/1988, volume 36, Issue 7, p. 1109.
electron microscopy study of non-specific acid esterase and acid phosphatase activities in human peripheral blood lymphocytes, Scanning Microsc. 1991 Mar, volume 5, issue 1, p. 175-81.
31. Carbone.A, Serra.F.G, Ferrandina.G, Scambia.G, Terrbile.D, Bellantone.R, Piantelli.M, Ranelletti.F.O: Methyl-p-hydroxyphenyllactate-esterase activity in breast cancer: a potentially new prognostic factor in short-term follow-up, Cancer research, 1997, p.5406.
32. Chambers JE, Chambers HW, Snawder JE: Target site bioactivation of the neurotoxic organophosphorus insecticide parathion in partially hepatectomized rats. Life Sci. 1991, volume 48, issue 10, p. 1023-9.
33. Chambers JE, Chambers HW: Time course of inhibition of acetylcholinesterase and aliesterases following parathion and paraoxon exposures in rats, Toxicol Appl Pharmacol. 1990 May, volume 103, issue 3, p.420-9.
34. Champelovier P, Seigneurin D, Bose D, Kolodie L: Image analysis as a tool for quantitative enzyme determination at the cellular level: application for monocytescytic differentiation of the UM-384 cell line, Anal Cell Pathol. 1994 Jul, volume 7, issue 1, p. 11-26.
35. Chaturvedi AK, Kuntz DJ, Rao NG: Metabolic aspects of the toxicology of mixtures of parathion, toxaphene and/or 2,4-D in mice, J Appl Toxicol. 1991 Aug, volume 11, issue 4, p.245-51.
resistant acid phosphatase activity coincides with the in situ expression of osteopontin mRNA, , Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 12/01/1995, volume 43, Issue 12, p. 1193.
40. Cornec.L, Robineau.J, Rolland.J.L, Dietrich.J, Barbier.G: Thermostable esterases screened on hyperthermophilic archaeal and bacterial strains isolated from deep-see hydrothermal vents: Chacterrization of esterase activity of a hypeiTnophilic archaeum, Biotechnol, 1998, p. 104.
41. Dachun W, Jiazhen Z: Localization and quantification of the nonspecific esterase in injured skin for timing of wounds, Forensic Sci Int. 1992 Mar, volume 53, issue 2, p.203- 13.
42. Danks MK, Morton CL, Krull EJ, Cheshire PJ, Richmond LB, Naeve CW, Pawlik CA, Houghton PJ, Potter PM: Comparison of activation of CPT-11 by rabbit and human carboxylesterases for use in enzyme/prodrug therapy, Clin Cancer Res. 1999 Apr, volume 5, issue 4, p.917-24.
43. Diczfalusy MA, Andersson U, Bjorkhem I, Einarsson C, Alexson SE: Microsomal long- chain acyl-CoA thioesterase , issue carboxylesterase ES-4 is regulated by thyroxine, Biochim Biophys Acta. 1999 Jul 9, volume 1439, issue
1, p.40-6.
48. Durrer A, Wernly-Chung GN, Boss G, Testa B: Enzymic hydrolysis of
nicotinate esters: comparison between plasma and liver catalysis, Xenobiotica.
1992 Mar, volume 22, issue 3, p.273-82.
49. Eguchi.M, Furukawa.T, Sugita.K, Ishikawa.K, Mikami.T, Tsunoda.S,
Yoshida.M, Miura.Y: Electron microscopic cytochemical of minimally differentiated acute myeloid leukemia , issue AML-MO, Intematinal Journal of Hematology, 1996, Volum e 64, p. 170.
50. El Shazly AM, Handousa AE, Ibrahem MI: Histochemical and pathological
studies on biopsied materials from patients with Ancylostoma duodenale
infection, J Egypt Soc Parasitol. 1998 Dec, volume 28, issue 3, p.665-72.
51. Farage-Elawar M: Development of esterase activities in the chicken before and after hatching, Neurotoxicol Teratol. 1991 Mar-Apr, volume 13, issue 2, p.147- 52.
Lange Stamford Connecticut, llh edition, 1998, p.7.
58. Gignac SM, Drexler HG: Monocytes-specific esterase isoenzyme demonstrated by isoelectric focusing, Electrophoresis. 1990 Oct, volume 11, issue 10, p.819-
24.
59. Gignac SM, Hu ZB, Denkmann SA, Uphoff CC, Drexler HG: Esterase isoenzyme profiles of 255 leukemia-lymphocytesma cell lines from all hematopoietic cell lineages, Leuk Lymphocytesma. 1996 Jun, volume 22, issue
1- 2, p. 143-51.
60. Gjellesvik DR, Lorens JB, Male R: Pancreatic carboxylester lipase from Atlantic salmon , issue Salmo salar. cDNA sequence and computer-assisted modelling of tertiary structure, Eur J Biochem. 1994 Dec 1, volume 226, issue
2, p.603-12.
61. Goullet P, Picard B: Electrophoretic type B2 of carboxylesterase B for characterisation of highly pathogenic Escherichia coli strains from extra- intestinal infections, J Med Microbiol. 1990 Sep, volume 33, issue 1, p.l 1-6.
62. Graffner-Nordberg M, Sjodin K, Tunek A, Hallberg A. Synthesis and enzymatic hydrolysis of esters, constituting simple models of soft drugs, Chem Pharm Bull , Tokyo. 1998 Apr, volume 46, issue 4, p.591-601.
Association of carboxylesterase B electrophoretic pattern with presence and expression of urovirulence factor determinants and antimicrobial resistance among strains of Escherichia coli that cause urosepsis, Infect Immun. 1991 Jul, volume 59, issue 7, p.2311-5.
76. Kadner SS, Katz J, Finlay TH: Esterase-1: developmental expression in the mouse and distribution of related proteins in other species, Arch Biochem Biophys. 1992 Aug 1, volume 296, issue 2, p.435-41.
77. Kai H, Arai T, Yasuda F: Accomplishment of time-interval activation of esterase A4 by simple removal of pin fraction, Chronobiol Int. 1999 Jan, volume 16, issue 1, p.51-8.
78. Kambarage DM, Bland PW, Stokes CR, Brown P, Skuse AM: Ultrastructural, histochemical and immunohistochemical features of porcine intestinal lamina propria macrophages, peripheral blood monocytes and splenic adherent cells, J Comp Pathol. 1995 Jan, volume 112, issue 1, p.63-77.
79. Kaphalia BS, Fritz RR, Ansari GA: Purification and characterization of rat liver microsomal fatty acid ethyl and 2-chloroethyl ester synthase and their relationship with carboxylesterase, issue pi 6.1, Chein Res Toxicol. 1997 Feb, volume 10, issue 2, p.211-8.
80. Karotam J, Delves AC, Oakeshott JG: Conservation and change in structural and 5' flanking sequences of esterase 6 in sibling Drosophila species, Genetica. 1993, volume 88, issue 1, p. 11-28.
treatment of solid tumors, J Clin Invest. 1998 Apr 15, volume 101, issue 8, p. 1789-96.
84. Kudweis M, Lojda Z, Julis I, Lenhardt L, Marcanik J, Svicky E: Synthesis of nonspecific esterase in small intestine enterocytes during experimental coccidiosis in suckling pigs, Vet Med , issue Praha. 1991 Aug, volume 36, issue 8, p.467-75. Czech.
85. Kugusheva LI, Nesterov VP, Rozengart VI, Dorenskaia GM, Kulieva AM: A comparative study of carboxylesterase in the white mouse and in the caterpillar of the cotton bollworm Heliothes armigera, Zh Evol Biokhim Fiziol. 1994 Sep- Oct, volume 30, issue 5, p. 650-5. Russian.
86. Laguens G, Goni JM Jr, Laguens M, Goni JM, Laguens R: Demonstration and characterization of HLA-DR positive cells in the stroma of human endometrium, J Reprod Immunol. 1990 Sep, volume 18, issue 2, p. 179-86.
87. Langmann T, Aslanidis C, Schuierer M, Schmitz G: Differentiation-dependent expression of a human carboxylesterase in monocytescytic cells and transcription factor binding to the promoter, Biochem Biophys Res Commun. 1997 Jan 3, volume 230, issue 1, p.215-9.
88. Langmann T, Becker A, Aslanidis C, Notka F, Ullrich H, Schwer H, Schmitz G: Structural organization and characterization of the promoter region of a human carboxylesterase gene, Biochim Biophys Acta. 1997 Jan 3, volume 1350, issue 1, p.65- 74.
Jan, volume 26, issue 1, p.60-5.
92. Lee W, Ryu J, Hah J, Tsujita T, Jung CY: Association of carboxyl esterase with facilitative glucose transporter isoform 4 , issue GLUT4 intracellular compartments in rat adipocytes and its possible role in insulin-induced GLUT4 recruitment, J Biol Chem. 2000 Apr 7, volume 275, issue 14, p. 10041-6.
93. Lehnert BE, Valdez YE, Sebring RJ, Lehnert NM, Saunders GC, Steinkamp JA: Airway intra-luminal macrophages: evidence of origin and comparisons to alveolar macrophages, Am J Respir Cell Mol Biol. 1990 Oct, volume 3, issue 4, p.377-91.
94. Lidberg U, Nilsson J, Stromberg K, Stenman G, Sahlin P, Enerback S, Bjursell G: Genomic organization, sequence analysis, and chromosomal localization of the human carboxyl ester lipase , issue CEL gene and a CEL-like , issue CELL gene, Genomics. 1992 Jul, volume 13, issue 3, p.630-40.
95. Long RM, Calabrese MR, Martin BM, Pohl LR: Cloning and sequencing of a human liver carboxylesterase isoenzyme, Life Sci. 1991, volume 48, issue 11, p.PL43-9.
96. Lund-Pero M, Jeppson B, Arneklo-Nobin B, Sjogren HO, Holmgren K, Pero RW: Non- specific steroidal esterase activity and distribution in human and other mammalian tissues, Clin Chim Acta. 1994 Jan 14, volume 224 , issue 1, p. 9-20.
97. Lutty GA, Cao J, McLeod DS. Relationship of polymorphonuclear leukocytes to capillary dropout in the human diabetic choroid, Am J Pathol. 1997 Sep, volume 151,
profiles of esterase activities, Toxicol Sci. 1998 Dec, volume 46, issue 2, p.211-
22.
111. Muderhwa JM, Schmid PC, Brockman HL: Regulation of fatty acid 180 exchange catalyzed by pancreatic carboxylester lipase. 1. Mechanism and kinetic properties, Biochemistry. 1992 Jan 14, volume 31, issue 1, p. 141-8.
112. Mukherjee JJ, Jay FT, Choy PC: Purification, characterization and modulation of a microsomal carboxylesterase in rat liver for the hydrolysis of acyl-CoA, Biochem J. 1993 Oct 1, volume 295 , issue Pt 1, p.81-6.
113. Munger.JS, Shi.GP, Mark.EA, Chin.DT, Gerard.C and Chapman.HA: A serin esterase released by human alveolar macrophages is closely related to liver microsomal carboxylesterases,, Journal Biol chem, 10/05/1991, p.266.
114. Murakami K, Takagi Y, Mihara K, Omura T: An isozyme of microsomal carboxyesterases, carboxyesterase Sec, is secreted from rat liver into the blood, J Biochem , issue Tokyo. 1993 Jan, volume 113, issue 1, p.61-6.
115. Myers MA, Healy MJ, Oakeshott JG: Effects of the residue adjacent to the reactive serine on the substrate interactions of Drosophila esterase 6, Biochem Genet. 1993 Aug, volume 31, issue 7-8, p.259-78.
116. Nagy A, Plonowski A, Schally AV: Stability of cytotoxic luteinizing hormone- releasing hormone conjugate , issue AN-152 containing doxorubicin 14-0- hemiglutarate in mouse and human serum in vitro: implications for the design of preclinical studies, Proc Natl
to pancreatic carboxylic ester hydrolase, Eur J Biochem. 1990 Sep 11, volume 192, issue 2, p.543-50.
120. Nilsson J, Hellquist M, Bjursell G: The human carboxyl ester lipase-like , issue CELL gene is ubiquitously expressed and contains a hypervariable region, Genomics. 1993 Aug, volume 17, issue 2, p.416-22.
121. Okamoto Y, Tanigawa T, Tanaka Y, Kameie T, lino A, Kasagi N, Minami S: Scanning electron microscopic and cytochemical analyses of alveolar and peritoneal macrophages of mice, dogs and cats, J Vet Med Sci. 1998 Oct, volume 60, issue 10, p. 1145-8.
122. Okawa H, Nagasawa M, Morio T, Takase K, Tanaka K, Yata J, Dan K, Nomura T, Sakamaki H, Onozawa Y, et al: Peroxidase-negative and myelomonocytescytic antigen- positive acute leukemia, Int J Hematol. 1992 Apr, volume 55, issue 2, p. 165-71.
123. Omar MS, Raoof AM, al-Amari OM: Histochemical distribution of esterases in adult Onchocerca fasciata , issue Filarioidea: Onchocercidae, Trop Med Parasitol. 1993 Dec, volume 44, issue 4, p.295-8.
124. Ovnic M, Tepperman K, Medda S, Elliott RW, Stephenson DA, Grant SG, Ganschow RE: Characterization of a murine cDNA encoding a member of the carboxylesterase multigene family, Genomics. 1991 Feb, volume 9, issue 2, p.344-54.