3. Cơ sở lý thuyết của sắc kớ điện di mao quản
3.4.2. Pha tĩnh trong HPCEC
Pha tĩnh thực
Pha tĩnh thực chủ yếu là được chế tạo trờn nền của silica đó được hoạt húa và biến tớnh để cú tớnh chất sắc ký của sự hấp phụ, sự trao đổi ion, hoặc là rõy phõn tử. Nú bao gồm cỏc loại silica trung tớnh trờn bề mặt cú cỏc nhúm –OH, hay silica trung tớnh đó được alkyl húa cỏc nhúm –OH trờn bề mặt hạt pha tĩnh bằng cỏc nhúm alkyl loại mạch cacbon C1, C3, C8, C18, hoặc nhúm phenyl (-C6H5) như pha tĩnh của HPLC.
Hỡnh 5. Sự ankyl húa bề mặt pha tĩnh
Đú là cỏc hạt pha tĩnh cú lỗ xốp, chịu nhiệt, chịu ỏp, cú kớch thước nhỏ từ 2-5àm.
Cỏch nhồi nú vào ống mao quản cũng tương tự như cột mao quản của sắc ký khớ. Vỡ thế nú là một lớp màng pha tĩnh bỏm vào thành mao quản, cú độ dày từ 5-15àm, tựy cỡ hạt
của pha tĩnh. Như thế, loại pha tĩnh này là được giữ cố định trờn thành của ống mao quản.
Trong kiểu Gel-CE, pha tĩnh là cỏc chất cao phõn tử hữu cơ, được chế tạo trờn nền của polyme hữu cơ, nú thường là cỏc keo xốp cao phõn tử, cú độ xốp thớch hợp, để thực hiện quỏ trỡnh tỏch của cỏc chất phõn tớch theo cơ chế điện di rõy phõn tử.
Pha tĩnh giả
Đối với hệ MEKC, khi điện di trong ống mao quản luụn cú xuất hiện pha tĩnh giả, đú là cỏc tiểu phõn Micell. Nú được hỡnh thành từ cỏc chất hoạt động bề mặt, như chất SDS trong pha động điện di với nồng độ thớch hợp (nồng độ giới hạn hỡnh thành cỏc tiểu phõn Micell). Trong quỏ trỡnh điện di, cỏc chất tan cũng phõn bố vào pha tĩnh này. Nghĩa là giữa pha tĩnh và pha động cú một cõn bằng phõn bố cỏc chất tan và chỳng cú hệ số phõn bố Ki nhất định. Cỏc tiểu phõn micelle sẽ dẫn dắt và đúng gúp thờm khả năng của quỏ trỡnh tỏch sắc kớ điện di trờn chất nền của dung dịch đệm và chất điện li trong mao quản.
Hỡnh 6. Micell và HPCEC với mao quản cú pha tĩnh loại micell