Kiểm tra hiệu lực của vacxin là yêu cầu cần thiết ựối với mỗi lô sản xuất. Có nhiều phương pháp kiểm tra, nhưng hiệu lực của vacxin dùng trong thú y nên ựược chứng minh bằng phương pháp công cường ựộc trên bản ựộng vật, với những con ở lứa tuổi mẫn cảm nhất, thực hiện dưới những ựiều kiện tiêu chuẩn và trên những ựộng vật có huyết thanh âm tắnh.
Trong trường hợp có các phương pháp thử khác thay thế có giá trị tin tưởng, người ta sẽ hạn chế sử dụng phương pháp công cường ựộc. Vì vậy, việc áp dụng các nguyên lý thay thế, giảm hoặc chọn lọc các kiểm tra trên ựộng vật (nguyên lý 3R - Replace, Reduce và Refine animal test) ựược khuyến khắch sử dụng nếu có thể ựược.
- Phương pháp công cường ựộc:
để thực hiện phương pháp này, người ta cần phải có giống vi sinh vật cường ựộc tiêu chuẩn có các chỉ số sinh học ổn ựịnh, ựặc biệt là chỉ số LD50 với bản ựộng vật và ựộng vật thắ nghiệm thay thế.
Tiến hành gây miễn dịch cho nhóm ựộng vật thắ nghiệm bằng liều vacxin sử dụng khi có miễn dịch chắc chắn (khoảng 2 - 3 tuần) tiến hành gây nhiễm giống cường ựộc tiêu chuẩn với liều chắ tử (thường là 100 LD50 - 1.000 LD50), có bố trắ lô ựộng vật ựối chứng không ựược tiêm vacxin.
Tiêu chuẩn của ựộng vật thắ nghiệm trong thử thách cường ựộc là khoẻ mạnh, có phản ứng huyết thanh âm tắnh với loại vi sinh vật có trong vacxin ựem thử. Theo dõi những biểu hiện lâm sàng và tỷ lệ chết của cả 2 lô thắ nghiệm và ựối chứng.
Thắ nghiệm ựạt ựược khi ở lô ựối chứng ựộng vật mang thử chết 100% với triệu chứng và bệnh tắch ựiển hình của bệnh. Tắnh tỷ lệ phần trăm sống sót ở lô thắ nghiệm, tỷ lệ này phải ựạt ắt nhất 80% thì lô vacxin mới ựạt ựược chỉ tiêu hiệu lực. Dĩ nhiên, tỷ lệ này càng cao càng tốt.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 33 Cũng có thể tiến hành thắ nghiệm trên thực ựịa bằng cách tiêm vacxin với liều sử dụng cho một quần thể ựộng vật ngoài thực ựịa, sau một thời gian khi miễn dịch ựược thành lập chắc chắn, bắt ngẫu nhiên một lượng cá thể ựủ lớn rồi tiến hành thử thách cường ựộc, xác ựịnh tỷ lệ bảo hộ.
Cần chú ý rằng: việc tiến hành công cường ựộc phải ựược thực hiện trong phòng thắ nghiệm chuyên biệt ựể kiểm nghiệm vacxin ựộng vật, phải ựảm bảo ựộ an toàn sinh học tuyệt ựối, có nghĩa là khi tiến hành công cường ựộc, các vi sinh vật cường ựộc không ựược gây ô nhiễm ra môi trường bên ngoài.
- Các phương pháp thử hiệu lực thay thế:
. Phương pháp thử hiệu lực lâm sàng
Phương pháp này có thể sử dụng ựể thiết lập hiệu lực khi các nghiên cứu công cường ựộc không thể thực hiện ựược. Theo dõi khả năng miễn dịch ở quần thể ựã sử dụng vacxin.
Do ựó, ở một số loại vacxin, yêu cầu xác ựịnh hiệu lực bằng cả hai phương pháp: thử nghiệm hiệu lực trong phòng thắ nghiệm và thử nghiệm lâm sàng.
. định lượng kháng nguyên
Với một số loại vacxin, việc ựánh giá hiệu lực có thể ựược thực hiện bằng phương pháp ựịnh lượng kháng nguyên.
Với các vacxin virus, người ta tiến hành ựịnh lượng theo phương pháp in vitro.
. định lượng kháng thể trong huyết thanh
Tiêm vacxin cho ựộng vật thắ nghiệm, tại thời ựiểm có miễn dịch chắc chắn, tiến hành lấy mẫu huyết thanh ựể ựịnh lượng kháng thể. Thông qua chỉ số trung hoà (NI) hoặc hiệu giá của phản ứng HI (với virus gây ngưng kết hồng cầu) ựể ựánh giá hiệu lực của vacxin.