Xác định các chỉ tiêu lý – hóa của tinh dầu.
Khảo sát thành phần hóa học trong tinh dầu bằng hệ thống sắc ký khí
ghép khối phổ (GC – MS).
Khảo sát hoạt tính kháng nấm của tinh dầu.
3.2.1 Xử lý nguyên liệu
Mẫu Chanh sau khi thu về sẽ đƣợc xử lý sơ bộ bằng cách loại bỏ các tạp lẫn nhƣ cỏ, lá tạp hoặc các phần không đạt yêu cầu nhƣ quả bị sâu hay lá bị dập, úng. Sau đó, mẫu đƣợc chia thành 2 phần là vỏ và lá rồi rửa sạch và để ráo nƣớc. Tiếp theo, cả 2 mẫu sẽ đƣợc cắt nhuyễn và tiến hành ly trích song song với nhau.
3.2.2 Ly trích tinh dầu bằng phƣơng pháp chƣng cất lôi cuốn hơi nƣớc nƣớc
Quy trình ly trích vỏ và lá Chanh kiên dựa vào quy trình ly trích vỏ và lá Chanh của Stavroula A. Vekiari công bố trên tạp chí khoa học Journal of Agricultural and Food Chemistry [10].
Cân 150 g mẫu Chanh đã đƣợc cắt nhuyễn cho vào bình cầu 1000 mL, rót nƣớc cất vào bình sao cho thể tích nƣớc trong bình không vƣợt quá 2/3 thể tích của bình cầu. Nếu cho nƣớc quá nhiều thì trong quá trình đun xác mẫu trong bình cầu sẽ trào lên bộ phận hứng lấy tinh dầu. Lắp bình cầu vào hệ thống gồm bếp đun hoàn lƣu, ống hứng tinh dầu và ống sinh hàn rồi tiến hành ly trích trong 3 h. Sau khi quá trình ly trích hoàn tất, hỗn hợp tinh dầu thu đƣợc gồm tinh dầu Chanh và nƣớc. Hỗn hợp sẽ đƣợc chiết với diethyl ether để
loại bỏ nƣớc. Làm khan bằng Na2SO4 và làm bay hơi diethyl ether, thu đƣợc tinh dầu Chanh. Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng nấm của mẫu tinh dầu thu đƣợc, đồng thời phân tích thành phần mẫu tinh dầu bằng GC – MS.
Hình 3.1: Quy trình ly trích tinh dầu Chanh bằng phƣơng pháp chƣng cất lôi cuốn hơi nƣớc.
Chanh
Bình chƣng cất
Ly trích bằng lôi cuốn hơi nƣớc
Tinh dầu Chanh Hỗn hợp tinh dầu và nƣớc Khảo sát thành phần hóa học Khảo sát hoạt tính kháng nấm
Loại bỏ mẫu không đạt yêu cầu
Cắt nhuyễn
Chiết với diethyl ether
Làm khan bằng Na2SO4