1.Xác định tổng số vi khuẩn hiếu khí trong thực phẩm
Tổng số vi khuẩn hiếu khí là một chỉ tiêu cơ bản của thực phẩm, qua đó người ta có thể đánh giá khái quát về tình trạng vệ sinh của thực phẩm cũng như dự đoán thời gian bảo quản của thực phẩm.
Tùy thuộc vào loại thực phẩm mà giá trị tổng số vi khuẩn hiếu khí cho phép trong sản phẩm khác nhau, cao nhất là 5.10 4 khuẩn lạc/g sản phẩm.
1.1 Nguyên tắc
Sử dụng môi trường thạch tryptone glucose (còn gọi là Plate Count Agar - PCA) để nuôi cấy vi sinh vật trong mẫu thực phẩm trong điều kiện hiếu khí ở nhiệt độ 30oC - 35oC trong 48-72 giờ.
1.2 Thiết bị và dụng cụ
Thiết bị: Nồi hấp tiệt trùng, tủ ấm, tủ sấy, tủ cấy, bể điều nhiệt
Dụng cụ: Ống nghiệm, bình tam giác, hộp petri, que cấy gạt, pipet, cân,... 1.3 Môi trường
Sử dụng môi trường thạch tryptone glucose 1.4 Cách thực hiện
Chuẩn bị mẫu
Mẫu ở dạng rắn cần xay trong bình xay vô khuẩn, sử dụng nước peptone hoặc nước cất để pha loãng mẫu.
Cấy mẫu
Mỗi mẫu cần được nuôi cấy ít nhất với ba độ pha loãng khác nhau sử dụng hai hộp petri cho mỗi độ pha loãng. Sử dụng phương pháp hộp đổ hoặc phương pháp cấy gạt để gieo cấy. Nuôi cấy
Nuôi cấy ở nhiệt độ 30oC trong 48-72 giờ. Sau thời gian nuôi cấy, đếm số khuẩn lạc rồi tính tổng số vi khuẩn hiếu khí có trong 1g hoặc 1ml mẫu.
1.5 Cách tính kết quả
Tiến hành đếm khuẩn lạc trên các hộp petri
Chọn tất cả các hộp petri có từ 25 đến 250 khuẩn lạc để tính kết quả. Công thức tính:
Trong đó: N là số khuẩn lạc có trong 1ml mẫu huyền phù ban đầu
C1, C2 là số khuẩn lạc đếm được trên 2 hộp petri ở độ pha loãng đã chọn d là hệ số pha loãng mẫu.