Chuột nhắt trấng dòng Swiss, con đực, 5 - 8
(1 tuổi năng trung bình 20 - 22 g mua ở Viện vệ
1 dịch tễ học Trung ương. Chuột phân thành 3Đối chứng sinh học (Đ C SH : 'Không uống Linh Đối chứng sinh học (Đ C SH : 'Không uống Linh , không chiếu xạ); đối chứng chiếu xạ (Đ C C X : Sng uổng Linh chi có chiếu xạ); thí nghiẹm ỉ: có uống Linh chi có chiếu xạ). M ỗi lồ có 20 I và tổng SỐ chuột dùng dể nghiên cứu là 180 I. Bột Linh chi là sản phẩm cùa để tài nghiên I, sản xuất các chế phẩm có hoạt tfnh'sinh học lấm Linh chi G anoderm a ỉu c id u m do bộ mổn
ĐOÀN SƯY NGIŨ
Trường (iợi học Khoa học Huế. Oại học H uế
TRỊNH XUÂN HẬU, NGUYÊN THỊ KIM NGÂN
Trường dại học Khoa học tự nhiéti - DHQG Hủ N ộ i
V i sinh, khoa Sinh học - DHKJHTN Hà Nội bào chế. Bột Linh chi được pha bàng nước đun sôi để nguội, dùng bơm tiêm có kim tiẽm đạc dụng để bơm dung dịch Linh chi liổu 0,3ml/con/ngày, tương đương 5g/kg thể trọng. Ở lô Đ C SH và Đ C C X cũng dùng bom tiêm bưm nước đun sôi để nguội cho chuột uổng với liểu giớng như khi cho chuột uống Linh chi. Cho chuột uống vào 8 giờ sáng hàng ngày, trong 7 ngày liển Irước khi đem chuột ở lô Đ C C X và T N đi chiếu xạ liéu 750R trôn máy CH1SOBALT ở Bệnh viện K -H à Nội.
SỔ lượng hổng cẩu, bạch cáu, công thức bạch cáu được đo bẳng máy H em acell-V420 (Nhạt Bản).
Lấy máu ở động mạch cổ chuồi vào Irong rtng nghiộm định mức Im l chứa sẵn chất chống đông (10 dơn vị quốc tế Heparin/ Im l) vào 8h sáng ngày trước khi chiếu xạ. Lấy máu chuột ờ lô
ĐGSH tiếp vào các ngày 10, 20, 30 sau dó. Ở lô Đ C C X và T N lấy máu chuột vào các ngày 3, 7, 10, 15, 20, 30 sau chiếu xạ. Mảu máu dược đưa vào máy có gắn Computer do và in ra kết quả.
I I - K Ế T Q U Ả VÀ BÀN LU Ậ N
1. Xác định số lượng hồng cầu máu ngoại vichuột nhát tráng: chuột nhát tráng:
Số lượng hổng cáu máu ngoại vl chuộl nhát tráng lô ĐCSH, ĐCCX và TN (dơn vị 1012/ I) B ả n g 1 V . Ngày 3 7 10 15 20 30 > Sổ' lượng hổng cáu Đ C S H 7,58 ± 0,08 (100% ) Đ C C X 4,51 ± 0 ,2 2 4,04 ± 0,24 4,26 ± 0,23 3,53 ± 0,25 3,01 ± 0 ,2 2 Từ vong ICCX (% ) >CSH 59,3 53,1 56,0 46,4 39,6 T N 5,72 ± 0,20 6,05 ± 0 , 1 9 6,28 ± 0,20 6,40 ± 0,18 6,51 ± 0 , 1 9 6,85 ± 0 , 1 8 T N (% ) )CSH 75,2 79,6 82,6 84,2 85,6 90,1
Từ bảng 1 cho thấy, số lượng hổng cầu cùa luột bị chiếu xạ so với ĐCSH giảm sau 3 ngày in 59,3%; Sau 7 ngày còn 53,1% . Sang ngày 10 Sng cáu có tãng lên đạt 56,0% nhưng lại giảm to ngày 15 và giảm thấp nhất vào ngày 20 chỉ in 39,6% so với ĐCSH. Chứng tỏ khi bị chiếu xạ ểu cao hổng cầu khó hồi phục và chuột đã bị từ )ng sau 20 ngày kể từ khi chiếu xạ. Chuột ở lô N dược uống Linh chi trước khi chiếu xạ nên có c dụng hạn chế sự giảm số lượng hồng cẩu hơn ) với chuột không được uống Linh chi. Điểu này lể hiện vào ngày 3 sau chiếu xạ hổng cầu giảm lấp nhất vản còn 75,2% so với ĐCSH. Ngày 7 Sng cầu bắt đầu íãng lên 79,6% . Ngày 10, 15, 20 Sng cẩu tiếp tục tãng dần đến ngày 30 sau chiếu Ị đạl được 90,1% so với Đ C SH . Chứng lỏ Linh ũ đã kích thích quá trình tạo máu nên sự khôi lục sổ lượng hồng cẩu diễn ra sớm hơn so vói một không dược uống Linh chi. Chính sự khồi lục số lượng hổng cầu do tác đụng của Linh chi i góp phần kéo dài ihời gian sổng cho chuột ở lô N hưn so với chuột ở lô Đ C C X không được uống inh chi Irưổc khi chiếu xạ.
2. X á c d ịn h sổ lượng bạch cầu ở m áu ngoạivi chu ộ t n h á t trá n g : vi chu ộ t n h á t trá n g :
Kết quả nghiên cứu được trình bày ở bảng 2. Số lượng bạch cáu cũng Iihư hồng cáu cùa chuôt khoè mạnh ổn dịnh theo Ihời gian. Nhưng khi chuột bị chiếu xạ thì sau 3 ngày bạch cầu giảm Iihiểu hcm so với hồng cắu chì còn 43% so với ĐCSH. Sau đó bạch cầu tăng lên đạt 65,6% vào ngày 7 và từ ngày 10 trở đi bạch cẩu tãng mạnh đến ngày 20 sau chiếu xạ đạt tới 119,1% (tăng 19,1%) so với ĐCSH. Điểu này chứng tỏ tia phóng xạ đã gây ra phản ứng oxi hoá, peroxit hoá lipit tạo ra nhiểu sản phẩm độc tô nên kích thích sinh bạch cầu do vậy làm cho bạch cầu tăng cao. Tia phóng xạ gây tổn thương hệ tạo máu dản tới hổng cáu giảm thấp còn bạch cầu tăng cao góp phần làm cho chuột tử vong sớm sau 20 ngày chiếu xạ. Ở lô T N chuột được uống Linh chi trước khi chiếu xạ nôn vào ngày 3 sau chiếu xạ bạch cẩu cũng bị giảm còn 66,5% so với Đ C S H . Sau đó sô' lượng bạch cẩu lăng dán íheo xu hướng hồi phục trở vổ giá trị gán với mức bình thường chứ không tâng Iihaiili và vưựi cao hơn như ở chuôi
Jug uống Linh chi lnr<fc khi chiếu xạ. Điểu này dạt dơợc 95,3% so với ĐCSH. Chứng tỏ Linh chi
hiện vào ngày 7 bạch cẩu ting lên dạl 683% cổ lác dụng làm số lượng bạch cầu giảm ít và sớm liếp tục hổi phục đéh ngày 30 sau chiếu xạ dã trò vổ giá tri đạc Irưng cho cơ thể khoẻ manh.
B ớ n g 2
SỐ lupig bạch dtu máu ngoại vl chuột nhát tráng lồ ĐCSH, ĐCCX và TN (đơn vị 1 0 7 1) S. Ngày 3 7 10 15 20 30 X SÒ lượng bạch cẩu ĐCSH 7,17 ± 0 ,1 2 (1 0 0 % ) Đ C C X 3,09 ± 0,09 4,71 ± 0,10 7,41 ± 0,11 8,01 ± 0,09 8,54 ± 0,20 Tử vong •OCX (% ) ►CSH 43,0 65,6 103,3 111,7 119,1 t T N 4,77 ± 0 ,1 3 4,9 0 ± 0 ,1 4 5,28 + 0,13 5,70 ± 0,09 6,14 ± 0 ,1 2 6,84 + 0,14 TN (% ) CSH 66,5 68,3 73.6 79,4 85,6 95,3 Xác dịnh cóng thức bạch cầu:
Cỡng thức bạch cẩu là lì lê % các loại bạch u dối với lổng số bạch cáu Irong máu gồm bạch u lympho (L ) bạch cáu (rung tính (N ), bạch cẩu n nhân (M ), bạch cẩu ưa axit và Ưa kiểm (E+B ). ở chuột khoẻ mạnh (lô Đ C S H ) cồng Ihức ch cẩu là ổn đính, trong dó bạch cáu lytnpho iếm SỐ lượng nhiểu nhất, liếp dến bạch cẩu >ng tính rổi bạch cẩu đơn nh&n còn íl nhất là ch cẩu ưa axit và ưa kiềm. Khi chuột bị chiếu , công thức bạch cáu máu ngoại vi dẵ bị phá vỡ. lể hiện số lượng bạch cầu trung (ính tang lẽn p vị trí thứ nhất còn bạch cáu lympho giảm lổng ờ vị trí thứ 2, tiếp dến bạch cầu đơn nhan, ch cẩu ưa axil và ưa kiểm.
Từ bảng 3 cho Ih íy tỷ lô giữa bạch cáu Ining ih và bạch cđu lympho (N /L ) cùa chuột bị chiếu lien lục tang cao từ 1,12 vào ngày Ihứ 3 đến