Khí thoát ra
2.7. Các phƣơng pháp phân tích
Sự phát triển của tế bào được đánh giá bằng khối lượng tế bào khô (dry cell weight - DCW) và mật độ tế bào (opical density - OD600) đo bằng máy đo OD. Khí H2 trong headspace được lấy bởi gas-tight syringe, thể tích mỗi lần hút là 100 µL (Australia) và được xác định bằng phương pháp sắc kí khí GC (7890A; Series: us11501033, USA) được trang bị với một máy dò dẫn nhiệt (TCD) và cột không gỉ cao 2m được bao bởi carboxen 1000, 50/80 mesh (Supelco). Nhiệt độ hoạt động của lỗ chích, lò phản ứng và thiết bị dò lần lượt là 120;60 và 120°C. Argon được sử dụng như khí mang với tốc độ chảy là 55 mL/phút
Acid acetic và acid lactic được xác định bằng hệ thống sắc kí lỏng cao áp được trang bị với một chỉ số phát hiện (Agilent 1100, USA): 50µL của 0.2µm môi trường bề mặt đã được lọc được tách ra trên một Rezex ROA- acid hữu cơ H+ (8%) cột 300 x 7.80 mm (Bio-Rad, USA) và được rửa bằng 0.5 mL/phút với 0.005 M °C ở nhiệt độ phòng. Nồng độ cơ chất còn lại cũng được xác định bằng sắc kí lỏng cao áp (HPLC) :50µL của 0.2µm môi trường bề mặt được lấy và phân tích trên một cột Rezex RCM-Monosaccharide (Bio-Rad) và được rửa với 0.5 mL/phút nước ở 60°C. Phát hiện được thực hiện với một máy dò chỉ số khúc xạ (Agilent 1100, USA). Mỗi phép đo được lặp đi lặp lại ba lần.
36
Kết quả thu được được xử lý bằng phương pháp thống kê sinh ho ̣c.
Hiệu suất tạo hydro bằng số mol hydro được tạo ra trên cơ chất được tiêu thụ, và được tính theo công thức sau:
o YH2 = nH2 /nS
(VớiYH2 là hiệu suất tạo hydro, nH2 là số mol H2 sinh ra, còn nS là số mol cơ chất tiêu thụ)
Tốc độ chảy của số mol hydro được tính theo công thức sau :
(Trong đó: QH2 : tốc độ chảy của số mol hydro (mmol/h), FPH2: tốc độ chảy của thể tích khí từ lò phản ứng (mL/phút), R: Hằng số khí kí tưởng (0.08206 L.atm.mol-1.K-1), T ở 298 OK.)
Lượng hydro sinh ra (mol) tại thời điểm t được tính theo công thức sau:
(Trong đó: NH2 : Lượng hydro sinh ra tại thời điểm t, QH2: Tốc độ chảy của số mol hydro (mmol/h)
37