Đây là một chỉ tiêu rất quan trọng trong phương pháp định lượng artesunat, vì hầu hết các phương pháp định lượng artesunat hiện đang áp dụng đều có tính đặc hiệu không cao. Điều này có thể giải thích là trong quá trình tổng hợp và bảo quản artesunat có lẫn các tạp chất, trong đó chủ yếu là DHA và acid succinic. Hai tạp chất này ảnh hưởng rất lớn đến kết quả định lượng. Do vậy trong đề tài này chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu để xây dựng một phương pháp định lượng artesunat mà sự có mặt của DHA và acid succinic không ảnh hưởng tới kết quả định lượng.
Để khảo sát tính đặc hiệu của phương pháp chúng tôi đã tiến hành như sau: + Trong bình định mức 25ml cân chính xác khoảng 0,lg artesunat chuẩn hoà tan và thêm MeOH vừa đủ đến vạch.
+ Trong bình định mức 25ml cân chính xác khoảng 0,lg DHA hoà tan và thêm MeOH vừa đủ đến vạch.
+ Trong bình định mức 25ml cân chính xác khoảng 0,05g acid succinic hoà tan và thêm MeOH vừa đủ đến vạch.
+ Trong bình định mức 25ml cân chính xác khoảng 0,lg artesunat chuẩn; 0,lg DHA và 0,05g acid succinic hoà tan và thêm MeOH vừa đủ đến vạch.
Cho hệ thống sắc ký chạy ổn định với pha động trong khoảng 30 phút
sau đó tiêm 20 ịi 1 lần lượt các dung dịch đã chuẩn bị vào hệ thống sắc ký và
tiến hành sắc ký theo chương trình đã chọn ở mục 3.1.2. Ghi các sắc ký đồ thu được. Tính đặc hiệu của phương pháp được biểu thị bằng thông số thời gian lưu của các chất trên sắc ký đồ và được biểu thị ở hình 6,7,8,9.
Sắc ký đồ hình 6 cho thấy artesunat được rửa giải ở khoảng 7,2 phút, pic
sắc ký đồ hình 7 cho thấy 1 pic duy nhất của DHA với thời gian lưu khoảng 27,5 phút.
Sắc ký đồ hình 8 cho thấy acid succinic có 2 pic với thời gian lưu khoảng 2,7 và 3,5 phút.
Hình 9 là sắc ký đồ hỗn hợp của artesunat + DHA + acid succinic, pic của artesunat tách rời hẳn các pic của DHA và acid succinic. Như vậy phương pháp định lượng mới xây dựng rất đặc hiệu cho artesunat.
Hìnhó: sắc ký đồ của Artesunat
Hình 8: sắc ký đồ của Acid Succinic