Mâu thü là cao dàc flavonoid toàn phân hoà tan trong ethanol 90°.
2.1. Bàng phân ümg hoâ hoc
+ Phân rïng vôi hai amoniac dâm dàc: Nhô mot giot mâu thü lên giây loc, dé khô roi ha lên miêng lo amoniac dàm dàc thây màu vàng dàm lên.
+ Phân üng vôi dung dich NaOH 10%: lây khoâng 1ml mâu thü cho vào ong nghiêm. Thêm vài giot dung dich NaOH 10% vào thây tüa màu vàng dâm xuât hiên, cho thêm mot thë tich nuôc tuang duang, lâc dêu, tüa tan hoàn toàn và cho dung dich màu vàng.
+ Phân ifng vôi dung dich FeCl3 5%: cho vào ong nghiêm 1ml mâu thü, thêm tùng giot dung dich FeCl3 5%, thây xuât hiên tüa den.
+ Phân ûng cyanidin (phân üng khü hoâ): Cho 1 ml mâu thü vào ong nghiêm, thêm mot ît bot Mg kim loai và vài giot HC1 dàc, dung dich tù màu vàng chuyën dân sang màu hông, néu dun nông câch thüy xuâ't hiên màu dô dâm.
Két quâ cüa câc phân üng trên chüng tô trong ché phâm thü cô flavonoid.
2.2. Bàng SKG và SKLM- Bàng SKG: - Bàng SKG:
+ Bàng SKG mot chiêu
Chüng tôi sü dung SKG mot chiêu tù duôi lên vôi giây Whatmann sô 1 cô kfch thuôc 30 x 5 cm. Khai triën trong hê dung môi:
Acid acetic: nuôc ( 15 : 85 ).
Câc vêt chât duac quan sât bang huÿnh quang duôi ânh sang tü ngoai ( X = 366nm ) truôc và sau khi cho tâc dung vôi hai amoniac. Két qüa cho thây 5 vêt chât mang tmh chât cüa flavonoid ( Bâng 1 ).
Bàng 1 : Kêt quâ SKG mot chiêu cûa Ftp trong hê dung môi : Acid acetic: nuôc (15: 85)
Sô thu” tu vêt chât
RfxlOO
Màu câc vêt châ't
UV u v + n h3
1 15,8 Nâu Vàng
2 25,1 Nâu Vàng
3 33,0 Nâu dâm Vàng dâm
4 60,5 Xanh lo Xanh sang
5 67,0 Xanh nhat Xanh lo
+ SKG 2 chiêu:
Giây sàc kÿ vôi kich thuôc 32 x 32. Sâc kÿ duoc khai triên trong 2 hê
. . on
dung môi:
Chiêu 1 chay bàng hê Acid acetic : nuôc (15 : 85)
Chiêu 2 là hê n - Butanol : Acidacetic : nuôc ( 4 : 1 : 5), lây pha trên
Acid Acetic : nuôc ( 15: 85 )
Bâng 2: Két quâ dinh tmh flavonoid toàn phân bâng SKG 2 chiêu
So thir tu vét chât Màu câc vêt chât (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
UV - 366nm UV + n h3 1 Nâu Vàng dâm 2 Nâu Vàng dâm 3 Nâu Vàng dâm 4 Nâu Vàng dâm 5 Nâu Vàng dâm 6 Nâu Vàng dâm
7 Xanh lo Xanh sang
8 Xanh lo Xanh sang
9 Không màu Xanh lo
Két quâ thu duoc cho thây so vét chât flavonoid trong ché phâm thü chàc chàn là 6 ( ttr vét so 1 dén so 6 ), 3 vét con lai (7, 8 , 9) su thay doi màu không rô rêt khi cho tâc dung vôi hoi amoniac. Két quâ dinh tmh cüa chüng tôi hoàn toàn phù hop vôi két quâ thu duoc cüa câc tâc giâ dâ nghiên cüu truôc dây [1, 10, 14].
- Bàng SKLM.
+ Chon hê dung môi:
De lua chon hê dung môi cô khâ nâng tâch tôt nhât doi vôi hôn hop flavonoid toàn phân trong cây Cân tây bàng SKLM, chüng tôi dâ chay sâc kÿ thü trên 1 0 hê dung môi khai triën khâc nhau, dô là:
Hê 1: Toluen: EtOAc: Acid Formic (5:6:1) Hê 2: CHC13: MeOH (5:1)
Hê 3: EtOAc: Acid acetic: H20 (20:2:2) Hê 4: EtOAc: Acid formic: CHC13 (2:1:2) Hê 5: EtOAc: Acid formic: H20 (4:1:1)
Hê 6 : Toluen: EtOAc: Aceton: Acid formic (5:2:2:1) Hê 7: EtOAc: BuOH: Acid acetic: H20 (5:3:1:1) Hê 8 : EtOAc: Acid acetic: H20 (20:3:4), lây pha trên. Hê 9: EtOAc: EtOH: H20 (10: 2: 1 )
HêlO: n-Hexan: EtOAc (3 :1 )
Két quâ cho thây hê so 5 và 8 cô khâ nâng tâch tôt hon câ và 2 hê dêu cho sô luong vét chât tuong tu nhau ( 6 vét). Két quâ thë hiên trong bâng 3, hïnh 10 ( hê dung môi sô 5 ) và bâng 4, hïnh 11 ( hê dung môi sô 8 )
Bâng 3 : Két quâ dinh tmh flavonoid toàn phân bàng SKLM trong hê: Ethylacetat: Acid formic: Nuôc (4 :1 :1 )
STT
vét chât R fx 100
Dâm dô
Màu câc vêt chât UV (254 nm) UV (366nm) n h3 as thuông A1C13 3%/côn
1 20,5 +++ Nâu Nâu Nâu Vàng dâm
2 28,9 ++ Nâu Nâu Nâu nhat Vàng
3 38,6 ++ Nâu Vàng Nâu Vàng
4 50,6 ++++ Nâu Nâu Xanh xâm Xanh xâm
5 57,8 ++++ Nâu Nâu Nâu dâm Nâu dâm
Bàng 4: Két quâ dinh tmh flavonoid bàng SKLM trong hê EtOAc: CH3COOH: H20 (20: 3: 4). STT vêt chât RfxlOO Dâm Dô
Màu sâc câc vét UV (254nm) UV (366nm ) n h3 as thuông AICI3 3%/côn
1 1 2 , 0 ++ Nâu Nâu Nâu Vàng
2 15,7 +++ Nâu Nâu Nâu Vàng
3 22,9 ++++ Nâu Nâu Xanh xâm Xanh xâm
4 36,1 ++++ Nâu Vàng Nâu dâm Vàng
5 39,8 ++++ Nâu Nâu Nâu dâm Nâu dâm (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
6 47,0 ++ Nâu Nâu Hong Vàng
Nhu vây chüng tô SKLM cüng cô khâ nâng tâch tôt câc thành phân flavonoid trong Càn tây. Phuong phâp tien hành don giân lai cho két quâ nhanh hon nhiêu so vôi SKG. Do dô chüng tôi dâ sü dung 1 trong 2 hê dung môi này cho SKLM dë kiëm tra câc phân doan trong quâ trinh phân lâp flavonoid bàng SKC và dô tinh khiét cüa câc chât phân lâp duoc.