M : Trọng lượng mẫu (g)
0,0014 : Số gam nitơ ứng với 1ml H2SO4 0,1N dùng chuẩn độ.
A.5. Phương pháp phân tích tổng vi sinh vật hiếu khí
Giới hạn cho phép tổng số vi sinh vật hiếu khí trên sản phẩm cá tra philê trong chế biến đơng lạnh là 106 cfu/g. Phân tích bằng phương pháp điếm khuẩn lạc.
Luận văn tốt nghiệp trường Đại học Cần Thơ Ngành Chế biến thủy sản
Vi khuẩn hiếu khí là những vi sinh vật tồn tại và phát triển trong trường thạch dinh dưỡng, ở nhiệt độ 370C sau khoản thời gian nuơi cấy 24-72 giờ. Tiến hành:
Chuẩn bị đĩa Petri sạch và gĩi lại bằng giấy bạc.
Pha mơi trường Plate Count Agar (PCA) trong chai chịu nhiệt. 22.5g/1 lít nước cất.
Muối sinh lý NaCl 8,5g/1 lit nước cất.
Đem thanh trùng cùng với đầu col ở nhiệt độ1210C trong vịng 60 phút, và sau khi nhiệt độ máy hạ xuống 500C là tắt máy thanh trùng và bắt đầu đỗ đĩa.
Nguyên tắc:
Nơi lấy mẫu phải sạch và được xịt cồn 700C và cồn đốt 900C, khi cấy phải đeo đầy đủ các dụng cụ cần thiết khi kiểm vi sinh vật.
Trên mỗi miếng cá lấy ngẫu nhiên nhiều nơi lấy khoang trên 1gam, nghiền nhỏ và cân 1 gam mẫu
Đồng nhất mẫu với 9ml nước muối sinh lý bằng máy vatex, tiếp tục pha lỗng nồng độ mẫu đến nồng độ thích hợp.
Ở mỗi nồng độ thích hợp, chuyển 1ml dịch mẫu đã pha lỗng vào đĩa Petri, và đỗ mơi trường vào và lắc vơng cùng, ngược kim đồng hồ rồi để yên cho đơng đặc lại. Ủ mẫu trong điều kiện hiếu khí ở nhiệt độ 370C và thời gian 24-72 giờ. Sau đĩ, tính số vi sinh vật hiếu khí phát hiện được trên 1 gam mẫu. Cách tính:
Đếm khuẩn lạc: Nên chọn các đĩa cĩ số khuẩn lạc nằm trong khoảng 25 – 250 để đếm
Tính kết quả:
Trường hợp chung: Các đĩa cĩ số khuẩn lạc thuộc khoảng 25 – 250.
Số khuẩn lạc được tính trên một gam mẫu (ml mẫu) tính theo cơng thức sau: N V n Cn d ) 1 , 0 ( 2 1 + = ∑ Trong đĩ:
Luận văn tốt nghiệp trường Đại học Cần Thơ Ngành Chế biến thủy sản
N: Số vi khuẩn hiếu khí cĩ trong mẫu thử (cfu/g).
∑C : Tổng số khuẩn lạc trên các đĩa ở 2 nồng độ pha lỗng kế tiếp nhau, mỗi đĩa cĩ số khuẩn lạc nằm trong khoảng 25-250.