Tiến hành: dùng que cấy lấy một phần khuẩn lạc trải lên dĩa giấy oxidase. Nếu vi khuẩn có khả năng tiết oxidase sẽ có sự đổi màu trong 10-20 giây, là phản ứng dương tính, kết luận là Micrococci. Nếu đĩa giấy oxidase không có sự đổi màu là phản ứng âm tính, kết luận là Staphylococci.
• Thử nghiệm Coagulase: Men coagulase hiện diện dưới 2 dạng: coagulase dạng liên kết (bound coagulase hoặc clumping factor) và coagulase dạng tự do (free coagulase), được phát hiện khi gặp huyết tương gây nên hiện tượng lợn cợn hoặc đông đặc huyết tương. Đây là thử nghiệm quan trọng nhất để phân biệt Staphylococci coagulase (+) với các loại Staphylococci coagulase (-) khác.
Tiến hành:
Trên lame (tìm coagulase liên kết): nhỏ một giọt nước cất lên lame, lấy vài khúm vi khuẩn quậy đều với giọt nước cất để tạo nên huyền dịch vi khuẩn. Sau đó, nhỏ một giọt huyết tương bên cạnh rồi trộn đều huyết tương và vi khuẩn. Quan sát trong 10 giây, nếu thấy xuất hiện những hạt lợn cợn là thử nghiệm coagulase dương tính.
Lưu ý: nếu để lâu quá 10 giây có thể cho phản ứng dương tính giả. Không lấy vi khuẩn làm thử nghiệm từ những môi trường có nồng độ muối cao như MSA vì có thể cho phản ứng dương tính giả. Nếu thử nghiệm coagulase trên lame âm tính đều phải làm lại trên ống nghiệm để xác định kết quả [2].
Trên ống nghiệm (tìm coagulase tự do): huyết tương được pha loãng 1/5 rồi trộn với canh cấy vi khuẩn cùng thể tích, ủ ở 37P
o P
C. Một ống nghiệm khác đựng huyết tương trộn với một chất lỏng vô khuẩn ủ ở 37P
o P
C để làm chứng. Sau 1-4 giờ, nếu có hiện tượng đông đặc huyết tương là thử nghiệm coagulase dương tính. Nếu