V. KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ
4.18.Thắ nghiệm lây bệnh nhân tạo nấm B setariae
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 146
Bảng 4.6. đặc ựiểm hình thái, sinh học của một số nấm gây bệnh trên phong lan Tản nấm Bào tử nấm Chỉ tiêu Nấm Màu sắc Tốc ựộ mọc Hình dáng, màu sắc Kắch thước (ộm) đĩa cành
Ạ alternata đen, ựen
xám Chậm -Hình lựu ựạn, ựuôi ngắn, -Nâu ựậm 20-63 x 9-18 - C. gloeosporioides Trắng, trắng xám Nhanh -Hai ựầu trụ tròn, có giọt dầu, -Không màu 3,43 ổ 0,18 x 10,98 ổ 1,12 Xuất hiện F usarium sp Hồng nhạt, hơi tắm Nhanh -Hình lưỡi liềm, - Không màu - Bào tủ nhỏ hình bầu dục 35 - 60 x 3 - 5 -
B. setariae Nâu xám Nhanh
-Bào tử hình sợi dài
-Có từ 6-15 vách ngăn
15-170x7-26 -
Kết quả bảng 4.6 cho thấy sự ựa dạng về ựặc ựiểm của tản nấm và bào tử của các nấm gây bệnh trên lan khi nuôi cấy trong phòng thắ nghiệm (nhiệt ựộ 25 Ờ 28 oC và ẩm ựộ bão hoà), bào tử nấm bắt ựầu nảy mầm sau 2 ngày trên môi trường PGA Nấm Ạ alternata phát triến thành tản nấm và bào tủ có
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 147
màu ựen, ựen xám tốc ựộ mọc chậm bào tủ nấm có hình lựu ựạn, ựuôi ngắn, màu mâu ựậm, kắch thước 20-63 x 9-18 ộm, khi phát triển trên môi trường WA thì có dạng chuỗi nối ựuôi nhaụ Các ựặc ựiểm này phù hợp với các nghiên cứu về nấm Ạ alternata.
Fusarium sp có tản nấm màu hồng nhạt, hơi tắm, tốc ựộ phát triển của nấm nhanh, quan sát trên kắnh hiển vi có hình lưỡi liềm, không màụ Bào tử nhỏ hình bầu dục kắch thước từ 35 - 60 x 3 - 5ộm.
đối với nấm B. setariae trên môi trường nấm phát triển nhanh có màu nâu xám, bào tử hình sợi dài, có từ 6-15 vách ngăn, kắch thước bào tử nấm là 15-170x7-26ộm.
Nấm C. gloeosporioides trên phong lan cũng có ựặc ựiểm hình thái giống với các ựặc ựiểm ựặc trưng của loài nấm C. gloeosporioides. Bào tử hình bầu dục có hai ựầu tròn, có hai giọt dầu không màu, hình thành ựĩa cành.
4.4. Một số kết quả nghiên cứu về nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp. setariae và Fusarium sp.
Những ựiều kiện môi trường và nhiệt ựộ cũng như những tác nhân gây bất thuận cho nấm bệnh như nấm ựối khángẦ.. điều này rất quan trọng cho sự phát triển và gây hại lớn hay không lớn của nấm bệnh. Trong phạm vi ựề tài nghiên cứu chúng tôi tiến hành thắ nghiệm xác ựịnh ảnh hưởng của yếu tố môi trường và nhiệt ựộ ựối với sự phát triển của nấm bệnh.
4.4.1. Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng nhân tạo ựến sự sinh trưởng của nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp. của nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp.
Môi trường thắch hợp là môi trường ở ựó nấm sinh trưởng, phát triển mạnh và có màu sắc ựiển hình ựồng thời sinh sản nhiều bào tử. Với mục ựắch chọn ra môi trường thắch hợp cho sự sinh trưởng của sợi nấm cũng như sự
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 148
hình thành bào tử, chúng tôi tiến hành nuôi cấy nấm trên 3 loại môi trường PGA, PCA và WẠ
Bảng 4.7a: Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng ựến sự sinh trưởng của nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp.
Kắch thước tản nấm (mm) sau cấy
Nấm Môi trường 1 3 5 7 9 WA 0,00 5,70 15,70 24,00 36,20 PGA 2,70 15,70 34,00 56,10 78,30 Ạalternata PCA 2,30 12,30 32,30 54,70 71,70 WA 0,70 12,70 24,30 36,70 53,30 PGA 5,70 25,00 45,30 64,30 87,30 C. gloeosporioides PCA 4,70 18,30 38,30 59,70 77,70 WA 2,30 12,30 25,30 40,30 55,30 PGA 6,30 24,70 50,70 77,10 90,00 Fusarium sp. PCA 4,30 22,70 45,0 68,30 82,30 WA 2,00 12,00 18,60 26,50 39,00 PGA 5,00 25,00 46,00 69,60 88,60 B. setariae PCA 3,00 23,00 38,20 58,40 76,30 Kết quả nghiên cứu thu ựược từ bảng 4.7a cho thấy các loại nấm gây bệnh trên phong lan ựều có thể sinh trưởng và phát triển tuy nhiên sự phát triển của nấm trên các môi trường là không ựồng nhất. Môi trường PGA là môi trường thắch hợp nhất cho khả năng phát triển sợi nấm và sự hình thành bào tử của nấm Ạ alternatạ, C. gloeosporioides, Fusarium sp. B. setariaẹ
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 149
Sau 9 ngày cấy nấm thì kắch thước tản nấm trên ựĩa petri là lớn nhất cụ thể lần lượt là 78,30; 87,30; 90,00 và 88,6mm
Môi trường WA tốc ựộ phát triển của nấm là thấp nhất, kắch thước tản nấm Ạ alternatạ, C. gloeosporioides, Fusarium sp. và B. setariae trên ựĩa petri lần lượt là 36,20; 53,30; 55,30; 39 mm
Kết quả bảng cho thấynấm Ạ alternata phát triển ựược trên cả 3 loại môi trường, tuy nhiên có sự sai khác rõ rệt của nấm giữa các môi trường. Sợi nấm sinh trưởng tốt nhất trên môi trường PGA, tản nấm ựạt 78.30 sau 9 ngày nuôi, tiếp theo là các môi trường PCA kém nhất là trên môi trường WA nấm chỉ ựạt 36.2mm
Từ kết quả bảng cũng cho thấy nấm C. gloeosporioides phát triển ựược trên cả 3 loại môi trường, tuy nhiên có sự sai khác rõ rệt của nấm giữa các môi trường. Sợi nấm sinh trưởng tốt nhất trên môi trường PGA, tản nấm ựạt 87,30 mm sau 9 ngày nuôi cấy, tiếp theo là các môi trường PCA, kém nhất là trên môi trường WA kắch thước tản nấm sau 9 ngày là 53,30 mm.
đối với nấm Fusarium sp. nấm cũng phát triển ựược trên cả 3 loại môi trường, và cũng có sự sai khác rõ rệt của nấm giữa các môi trường. Sợi nấm sinh trưởng tốt nhất trên môi trường PGA (tản nấm ựạt 90,00mm sau 9 ngày nuôi cấy) tiếp theo là các môi trường PCA, kém nhất là trên môi trường WA kắch thước tản nấm sau 9 ngày là 55,30 mm.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 150
Bảng 4.7b: Ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng ựến sự phát triển tản nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Nấm Môi
trường đặc ựiểm tản nấm
WA sợi nấm thưa, mọc sát bề mặt môi trường, có màu ựen nhạt
PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, màu nâu ựen
Ạalternata
PCA tản nấm mỏng, màu sắc mờ nhạt
WA Sợi nấm mọc thưa, ép sát bề mặt môi trường.
PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, sợi nấm màu trắng
C. gloeosporioides
PCA
tản nấm mỏng, màu trắng phớt hồng, trên bề mặt xuất hiện nhiều khối bào tử màu vàng nâu
WA tản nấm thưa, màu trắng
PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, sợi nấm màu hồng nhạt
Fusarium sp.
PCA tản nấm mỏng màu trắng xám hoặc nâu WA tản nấm thưa, màu nâu nhạt
PGA tản nấm mịn màu nâu xám
B. setariae
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 151
Ngoài sự khác biệt về kắch thước tản nấm chúng tôi còn nhận thấy sự khác nhau về ựặc ựiểm phát triển, màu sắc của tản nấm, trên 3 loại môi trường nuôi cấy nấm.
đối với nấm Ạ alternata: Trên môi trường PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, màu nâu ựen. Trên môi trường PCA tản nấm mỏng, màu sắc mờ nhạt hơn, còn trên môi trường WA sợi nấm thưa, mọc sát bề mặt thạch, có màu ựen nhạt.
Nấm C. gloeosporioides Trên môi trường PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, sợi nấm màu trắng. Trên môi trường PCA tản nấm mỏng, màu trắng phớt hồng, trên bề mặt xuất hiện nhiều khối bào tử màu vàng nâu, còn trên môi trường WA sợi nấm thưa, mọc sát bề mặt thạch, có màu trắng.
Nấm Fusarium sp: Trên môi trường PGA tản nấm mọc dày, xốp, vồng lên ở giữa và xẹp dần về mép, sợi nấm màu hồng nhạt. Trên môi trường PCA tản nấm mỏng, màu trắng xám hoặc nâu, còn trên môi trường WA tản nấm thưa, màu trắng.
đối với nấm B. setariae trên môi trường nấm phát triển nhanh và có màu nâu xám.
Với kết quả thu ựược chúng tôi nhận thấy môi trường PGA là môi trường thắch hợp nhất cho khả năng phát triển sợi nấm và sự hình thành bào tử của nấm Ạ alternatạ, C. gloeosporioides, Fusarium sp và B. setariae. Vì vậy chúng tôi chọn môi trường PGA ựể tiến hành những thắ nghiệm tiếp theọ
4.4.2.Ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến sinh trưởng và phát triển của nấm Ạ alternate, C. gloeosporioides, B. setariae và Fusarium sp.
Nhiệt ựộ là một trong những yếu tố ngoại cảnh quan trọng ảnh hưởng tới sự phát sinh, phát triển và gây hại của nấm bệnh. để tìm hiểu ảnh hưởng của
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 152
nhiệt ựộ ựến sự sinh trưởng của nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides, Fusarium sp. chúng tôi tiến hành thắ nghiệm nuôi cấy nấm ở 4 ngưỡng nhiệt ộ khác nhau 200C, 250C, 300C, 350C.
Bảng 4.8. Ảnh hưởng của nhiệt ựộ ựến sự sinh trưởng của nấm Ạ alternate, C. gloeosporioides và Fusarium sp.
Kắch thước tản nấm (mm) sau cấy (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Nấm t0 1 3 5 7 9 200C 1,30 13,70 25,30 46,30 53,10 250C 6,30 13,70 32,00 52,70 75,70 300C 4,00 15,00 35,70 54,10 80,30 Ạalternata 350C 1,70 6,70 15,70 29,30 42,00 200C 5,30 13,70 24,00 37,30 49,70 250C 5,70 22,70 38,70 57,70 83,30 300C 7,20 24,30 41,30 68,70 88,00 C. gloeosporioides 350C 4,30 7,50 15,70 24,30 37,50 200C 6,70 13,00 27,10 54,7 64,70 250C 8,30 25,70 58,70 72,30 86,70 300C 8,00 22,30 43,00 65,30 90,00 Fusarium sp. 350C 5,00 9,30 18,30 26,60 43,70 200C 7,00 13,90 27,70 54,80 75,70 250C 8,70 16,7 29,90 45,00 56,10 300C 12,30 2,50 36,30 60,60 82,00 B. setariae 350C 9,10 13,3 21,70 35,30 45,30
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 153
Với kết quả thu ựược từ bảng 4.8 chúng tôi nhận thấy ở nhiệt ựộ 300 C là thắch hợp nhất cho khả năng phát triển sợi nấm và sự hình thành bào tử của nấm Ạ alternatạ, C. gloeosporioides, Fusarium sp. và B. setariaẹ Sau 9 ngày cấy nấm thì kắch thước tản nấm trên ựĩa petri là lớn nhất lần lượt là 80,30; 88,00; 90,00 và 82,0mm. Ở nhiệt ựộ 35oC sự phát triển của tản nấm Ạ alternatạ, C. gloeosporioides, Fusarium sp. B. setariae trên ựĩa petri là chậm nhất lần lượt là 42,00; 37,50; 43,70 và 45,3 mm
Ở các mức nhiệt ựộ 250C Ờ 300C sự phát triển của sợi nấm và sự hình thành bào tử là tốt nhất, kắch thước tản nấm ựạt 75,70 mm và 80.30mm sau 9 ngày nuôi cấy ựối với nấm Ạ alternatạ Ở nhiệt ựộ 200C sự phát triển tản nấm chỉ ựạt 42,00 mm sau 9 ngày nuôi cấỵ
Mức nhiệt ựộ 350C, sự phát triển của tản nấm kém nhất chỉ ựạt 40.00 mm sau 9 ngày nuôi cấỵ Như vậy nấm Ạ alternata gây bệnh ựốm lá trên cây phong lan sinh trưởng và phát triển tốt trong ựiều kiện nhiệt ựộ 250C Ờ 300C và tốt nhất là ở 300C, Kết quả này có thể giải thắch vì sao cháy lá gây hại trên cây phong lan thường gây hại mạnh vào những tháng có nhiệt ựộ cao trung bình trên dưới 300C,
đối với nấm C. gloeosporioides tôi nhận thấy ở các mức nhiệt ựộ 250C Ờ 300C sự phát triển của sợi nấm và sự hình thành bào tử là tốt nhất, kắch thước tản nấm ựạt lần lượt là 83,30 và 88,00 mm sau 9 ngày nuôi cấy. Ở nhiệt ựộ 200C sự phát triển tản nấm ựạt 49,70 mm sau 9 ngày nuôi cấỵ Mức nhiệt ựộ 350C, sự phát triển của tản nấm kém nhất chỉ ựạt 37,50mm sau 9 ngày nuôi cấỵ
Còn ựối với nấm Fusarium sp. chúng tôi cũng nhận thấy sự phát triển của tản nấm cũng tương tự như các nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides ở các mức nhiệt ựộ 250C Ờ 300C sự phát triển của sợi nấm và sự hình thành bào tử là tốt nhất: kắch thước tản nấm ựạt 86,7 và 90mm sau 9 ngày nuôi cấy ựối
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 154
với nấm Fusarium sp. Mức nhiệt ựộ 350C, sự phát triển của tản nấm kém nhất chỉ ựạt 43,7mm sau 9 ngày nuôi cấy
Kết quả tương tự cũng ựược ghi nhận ở nấm B. setariae, chúng tôi cũng nhận thấy sự phát triển của tản nấm cũng tương tự như các nấm Ạ alternata, C. gloeosporioides ở các mức nhiệt ựộ 300C sự phát triển của sợi nấm và sự hình thành bào tử là tốt nhất: kắch thước tản nấm ựạt 82,0 và 90mm sau 9 ngày nuôi và Mức nhiệt ựộ 350C, sự phát triển của tản nấm kém nhất chỉ ựạt 45,3mm sau 9 ngày nuôi cấy
Như vậy nấm Ạ alternata gây bệnh ựốm lá, C. gloeosporioides gây bệnh thán thư và Fusarium sp. gây bệnh cháy lá và B. setariae trên cây phong lan sinh trưởng và phát triển trong ựiều kiện nhiệt ựộ 250C Ờ 300C và tốt nhất là ở 300C, kết quả này có thể giải thắch vì sao bệnh nấm hại trên cây phong lan thường xuất hiện và gây hại mạnh vào những tháng có nhiệt ựộ cao trung bình trên dưới 300C, nắng mưa thất thường, mưa nhiều, và giảm mạnh trong ựiều kiện có nhiệt ựộ không khắ thấp
4.5. Nghiên cứu khả năng gây bệnh của một số loài nấm hại trên cây phong lan phong lan
4.5.1. Thời kỳ tiềm dục và mức ựộ nhiễm bệnh của lá cây phong lan ựối với nấm Ạ alternatạ
để tìm hiểu khả năng nhiễm bệnh của lá phong lan chúng tôi tiến hành lây bệnh nhân tạo trên lá phong lan khoẻ và sạch bệnh ựể tìm hiểu thời kỳ tiềm dục của nấm trên lá phong lan, chúng tôi tiến hành theo phương pháp có sát thương và không sát thương.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 155
Bảng 4.9. Thời kỳ tiềm dục và mức ựộ nhiếm bệnh do nấm Ạ alternate
trên lá loài lan Dendrobium nobile L Chỉ tiêu Công thức
TKTD (ngày) TLB (%) KTVB sau 7 ngày (mm)
Có sát thương 4,5 100 12x30 Không sát thương 6,5 25 12x10
đC 0 0 0
Qua bảng 4.9 chúng tôi thấy rằng thời kỳ tiềm dục và khả năng nhiễm bệnh của lá phong lan có sự khác nhau rõ rệt ở cả hai phương pháp có gây sát thương và không gây sát thương. Với nấm Ạ alternatạ TKTDlà 4,5 ngày (có sát thương) và 6,5 ngày ựối với (không sát thương) và tỷ lệ bệnh của lá phong lan là 100% (có sát thương) và 25% (không sát thương) ựồng thời kắch thước vết bệnh cũng ựược biểu hiện rõ ràng sau 7 ngày cấy trở lại là 12x30 mm (có sát thương) và 12x10 mm (không sát thương). Như vậy khi có sát thương nấm
Ạ alternate gây bệnh nhanh hơn, và mức ựộ biểu hiện bệnh cũng lớn hơn.
4.5.2. Thời kỳ tiềm dục và mức ựộ nhiễm bệnh của lá cây phong lan ựối với nấm C. gloeosporioides. nấm C. gloeosporioides.
để tìm hiểu khả năng nhiễm bệnh của lá phong lan ựối với nấm C. gloeosporioides chúng tôi ựã tiến hành lây bệnh nhân tạo trên lá phong lan sạch bệnh và khoẻ mạnh ựể tìm hiểu thời kỳ tiềm dục và TLB(%) trên lá phong lan, theo phương pháp có sát thương và không sát thương.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 156
Bảng 4.10. Thời kỳ tiềm dục và mức ựộ nhiễm bệnh do nấm
C. gloeosporioides trên lá loài lan Dendrobium nobile L
Chỉ tiêu Công thức
TKTD (ngày) TLB (%) KTVB sau 7 ngày(mm)
Có sát thương 3,5 100 20x40 (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Không sát thương 4,5 25 15x10
đC 0 0 0
Qua bảng 4.10 chúng tôi thấy rằng thời kỳ tiềm dục và khả năng nhiễm bệnh của lá phong lan có sự khác nhau rõ rệt ở cả hai phương pháp có gây sát thương và không gây sát thương do nấm C. gloeosporioides của lá phong lan
Dendrobium nobile L. TKTD là 3,5 ngày (có sát thương) và 4,5 ngày (không sát thương), và tỷ lệ bệnh của lá phong lan là 100% (có sát thương) và 25% (không sát thương). Trong ựó kắch thước vết bệnh ở công thức có sát thương ựạt 20x40 mm và không có sát thương là 15x10 mm.