Để tìm hiểu tác dụng hạ đường huyết của các dịch chiết từ rễ củ loài Trạch Tả, chúng tôi tiến hành lấy mẫu máu chuột và xác định chỉ số glucose trong huyết thanh chuột bằng máy đo đường huyết tự động One Touch Ultra và que thử. Kết quả đo được thể hiện trong bảng 3.10 dưới đây:
39
Bảng 3.10. Kết quả nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột sau 21 ngày điều trị.
Lô chuột điều trị
Nồng độ glucose huyết lúc đói (mmol/l) Tỷ lệ % (sau 21 ngày so với trƣớc ĐT) Trƣớc ĐT 7 ngày ĐT 14 ngày ĐT 21 ngày ĐT Lô 1(Đối chứng) 6,61 ± 0.48 6,68 ± 0,34 6,73 ± 0,47 6,64 ± 0,26 ↓ 0,45 % Lô 2 (Không ĐT) 22,34 ± 3,70 23,07 ± 1,38 24,18 ± 1,30 25,02 ± 1,42 ↑ 11,99 % Lô 3 ( EtOH) 21,58 ± 3,28 18,08* ± 1,46 14,55* ± 2,06 11,19* ± 1,32 ↓ 48,15 % Lô 4 (n-hexan) 23,19 ± 2,63 19,67* ± 2,60 15,54* ± 2,14 11,87* ± 1,68 ↓ 48,81 % Lô 5 (Cloroform) 22,75 ± 3,45 20,32* ± 2,35 17,46* ± 2,47 14,24* ±2,49 ↓ 37,41 %
40
Hình 3.7. Biểu đồ biểu thị tác dụng của các cao phân đoạn dịch chiết lên nồng độ glucose huyết lúc đói của các lô chuột sau 21 ngày điều trị.
Trong đó: Lô 1: Nuôi bình thường.
Lô 2: ĐTĐ type 2 khômg điều trị.
Lô 3: ĐTĐ type 2 điều trị bằng cao phân đoạn EtOH
Lô 4: ĐTĐ type 2 điều trị bằng cao phân đoạn n-hexan
Lô 5: ĐTĐ type 2 điều trị bằng cao phân đoạn CHCl3
Từ kết quả bảng 3.10, biểu đồ hình 3.7 chúng ta thấy rằng:
Ở lô chuột thường (lô đối chứng âm) uống nước cất nồng độ glucose huyết hầu như không thay đổi nhiều (p > 0,05). Tuy nhiên ở lô chuột ĐTĐ type 2 không điều trị (lô đối chứng dương) nồng độ glucose đã có sự tăng từ 22,34 mmol/l ở ngày thứ 0 điều trị lên 25,02 mmol/l ở ngày thứ 21 điều trị (tăng tương ứng 11,99% so với trước
41
khi ĐT), hiện tượng này cho thấy là chuột ĐTĐ type 2 không được điều trị thì hàm lượng đường huyết ngày càng tăng nghiêm trọng hơn.
Về tác dụng điều trị của các phân đoạn dịch chiết từ rễ củ loài Trạch Tả đến khả năng hạ đường huyết cho thấy rằng: với cùng liều uống 2000 mg/kg thể trọng tất cả các cao phân đoạn đều có tác dụng giảm mạnh đường huyết sau 21 ngày điều trị.
Cao phân đoạn n- hexan cho thấy có tác dụng giảm mạnh nhất với nồng độ glucose huyết sau 21 ngày điều trị là 11,87 mmol/l (giảm tương ứng 48,81% so với trước ĐT),thứ 2 là phân đoạn EtOH (11,19 mmol/l (giảm tương ứng 48,15% so với trước ĐT) với mức ý nghĩa (p< 0,05). Cao phân đoạn CHCl3 giảm ít nhất từ 22,75 mmol/l xuống 14,24 mmol/l (tương ứng giảm là 37,41% so với trước ĐT).
Từ kết quả trên ta có thể thấy được trong rễ củ loài Trạch Tả có chứa nhiều hợp chất thứ sinh có tác dụng giảm glucose huyết. Trong các phân đoạn dịch chiết thì cao phân đoạn EtOH và n-hexan là có tác dụng giảm đường huyết rõ nét hơn trong điều trị ĐTĐ type 2. Tuy nhiên muốn phát triển thực phẩm chức năng chữa ĐTĐ từ rễ củ loài Trạch Tả cần có thêm nhiều nghiên cứu sâu hơn về các hợp chất trong mỗi phân đoạn dịch chiết đặc biệt là trong phân đoạn EtOH và n-hexan đã thể hiện hiệu quả tốt hơn.
3.5.3.Tác dụng đến chuyển hóa lipid trên mô hình chuột ĐTĐ type 2
Để đánh giá ảnh hưởng của các phân đoạn dịch chiết đến một số chỉ số lipid trong huyết thanh của chuột ĐTĐ type 2 thì vào ngày cuối cùng của thời gian điều trị (ngày thứ 21) sau khi cho nhịn đói qua đêm chúng tôi chọn hai lô chuột có chỉ số đường huyết thấp là lô 3 (lô điều trị bằng cao phân đoạn EtOH) và lô 4 (lô điều trị bằng cao phân đoạn n-hexan) rồi tiến hành lấy máu tổng số và phân tích một số chỉ số lipid: cholesterol, triglycerid, HDL-c, LDL-c. Kết quả được trình bày trong bảng 3.11 và hình 3.8 sau đây:
42
Bảng 3.11. Tác dụng của cao PĐ EtOH và n-hexan lên một số chỉ số lipid ở chuột ĐTĐ type 2 sau điều trị 21 ngày
Chỉ số hóa sinh (mmol/l)
Trƣớc ĐT
Sau 21 ngày điều trị Cao PĐ EtOH Cao PĐ n-hexan TC 5,42 ±0,24 4,23 ± 0,20 4,56 ± 0,19 ↓ 21,95 % ↓ 15,87 % TG 2,81 ± 0,20 1,45 ± 0,24 1,67 ± 0,18 ↓ 48,40 % ↓ 40,57 % HDL-c 0,85 ± 0,18 2,16 ± 0,21 2,03 ± 0,28 ↑ 154,12 % ↑ 138,83 % LDL-c 1,09 ± 0,24 0,72 ± 0,38 0,81 ± 0,23 ↓ 33,94 % ↓ 25,69 %
43
Hình 3.8. Biểu đồ so sánh tác dụng của cao PĐ EtOH và n-hexan lên một số chỉ số lipid ở chuột ĐTĐ type 2 sau điều trị 21 ngày
Từ kết quả bảng 3.11 và hình 3.8 ở trên chúng ta thấy:
Sau khi uống phân đoạn EtOH và phân đoạn n-hexan rễ củ loài Trạch Tả với liều 2000 mg/kg thể trọng trong 21 ngày với p < 0,05 thì chỉ số cholesterol và triglycerid có xu hướng giảm xuống rõ rệt so với trước khi điều trị.
Lô điều trị bằng EtOH hàm lượng cholesterol giảm từ 5,42 mmol/l xuống 4,23 mmol/l (tương ứng giảm 21,95% so với trước khi điều trị), tỷ lệ này giảm mạnh hơn so với lô điều trị bằng cao phân đoạn n-hexan (giảm 15,87% so với trước khi điều trị).
Hàm lượng triglycerid ở lô điều trị EtOH giảm 48,40% mạnh hơn so với lô điều trị bằng phân đoạn n-hexan giảm 40,57% so với trước khi điều trị với p < 0,05.
Sau 21 ngày điều trị cao phân đoạn EtOH và n-hexan thì chỉ số LDL-c trong máu chuột giảm xuống lần lượt là 33,94% và 25,69% so với trước khi điều trị. Như
44
vậy lô chuột điều trị bằng cao phân đoạn EtOH giảm mạnh hơn với p < 0,05. Trong khi đó chỉ số HDL-c trong máu chuột có chiều hướng tăng lên, lô điều trị phân đoạn EtOH tăng 154,12% so với chỉ số trước điều trị, còn lô điều trị bằng phân đoạn n-hexan tăng 138,82% so với chỉ số trước điều trị có ý nghĩa với p < 0,05.
Kết quả bước đầu cho thấy dịch chiết các phân đoạn EtOH và phân đoạn n- hexan có tác dụng giảm cholesterol toàn phần, triglycerid và LDL-c tương đối tốt. Mặt khác chỉ số HDL-c lại có xu hướng tăng mạnh nhất là ở lô điều trị bằng phân đoạn EtOH, chỉ số HDL-c tăng cũng giải thích tại sao lượng cholesterol toàn phần, triglycerid giảm.
45
KẾT LUẬN
Từ những kết quả thu được trong quá trình thực nghiệm, chúng tôi thu được những kết luận sau:
1. Thành phần các hợp chất trong rễ củ Trạch Tả khá phong phú, có đầy đủ các nhóm hợp chất tự nhiên phổ biến như flavonoid, tannin, alkaloid và glycoside.
2. Một số phân đoạn dịch chiết từ rễ củ Trạch Tả có khả năng hạ đường huyết trên mô hình chuột ĐTĐ. Hàm lượng glucose huyết của lô chuột uống phân đoạn cao EtOH tổng số giảm 48,15%; lô chuột uống cao n-hexan giảm 48,81% và lô chuột uống cao CHCl3 giảm 37,41%. Kết quả điều trị cho thấy lô chuột uống phân đoạn n-hexan có tác dụng hạ đường huyết tốt nhất.
3. Với liều uống 2000mg/kg thể trọng chuột ĐTĐ, sau 21 ngày điều trị chỉ số Cholesterol toàn phần giảm, cụ thể: Lô uống cao phân đoạn EtOH cho kết quả giảm khối lượng cơ thể chuột mạnh nhất 9,62%, các lô điều trị bằng phân đoạn n- hexan, CHCl3 giảm lần lượt là 8,14%; 6,51%.
4. Tác dụng chống rối loạn trao đổi lipid được thể hiện ở hàm lượng cholesterol, triglycerid, LDL-c của lô chuột uống phân đoạn EtOH lần lượt giảm 21,95 %; 48,40 %; 33,94 % còn đối với lô chuột uống cao phân đoạn n-hexan lần lượt giảm 15,87 %; 40,57 %; 25,69 % so với trước khi điều trị. Trong khi đó chỉ số HDL-c ở cả 2 lô uống cao EtOH và cao n-hexan đều tăng lần lượt là 154,12 %; 138,83 % so với trước khi điều trị. Kết quả điều trị cho thấy tác dụng điều trị của cao phân đoạn EtOH chống rối loạn trao đổi lipid là tốt nhất.
46
KIẾN NGHỊ
1. Tiếp tục đi sâu tìm hiểu cơ chế hóa sinh làm giảm khối lượng, giảm lipid máu, hạ glucose huyết hay tăng dung nạp glucose của các phân đoạn dịch chiết từ rễ củ loài Trạch Tả (Alisma phantago-aquatica L.).
2. Tiếp tục nghiên cứu thành phần và xác định cấu trúc hóa học của một số chất trong phân đoạn dịch chiết từ rễ củ loài Trạch Tả (Alisma phantago-aquatica L.)
47
TÀI LIỆU THAM KHẢO
Tài liệu tiếng việt
1. Báo cáo tổng kết, “Nghiên cứu sử dụng các hợp chất polyphenol trong một số giống chè ở Việt Nam“, Liên hiệp các hội Khoa học và Kỹ thuật Việt Nam, Trung tâm nghiên cứu và phát triển công nghệ hóa sinh, tr 4-10.
2. Đỗ Huy Bích, Đăng Quang Chung, Bì Xuân Chương, Nguyễn Thượng Dong,
Đỗ Trung Đàm, Phạm Văn Hiển, Vũ Ngọc Lộ, Phạm Duy Mai, Phạm Kim Mãn, Đoàn THị Nhu, Nguyễn Tập, Trần Toàn (2004), Cây thuốc và động vật làm thuốc ở Việt Nam,tập 2, NXB Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội.
3. Tạ Văn Bình (2006), Dịch tễ học bệnh đái tháo đường ở Việt Nam - Các phương pháp điều trị và biện pháp phòng chống, Nxb Y học, Hà Nội.
4. Tạ Văn Bình (2007), “Những nguyên lý nền tảng bệnh đái tháo đường và tăng glucose máu”, Nxb Y học, Hà Nội.
5. Tạ Văn Bình, Trần Đức Thọ, Thái Hồng Quang, Mai Thế Trạch (2007), Báo cáo toàn văn các đề tài khoa học hội nghị khoa học toàn quốc chuyên ngành nội tiết và chuyển hóa lần thứ 3, Nxb Y học, Hà Nội.
6. Võ Văn Chi (1999), Từ điển cây thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Hà Nội. 7. Nguyễn Thị Hà (2000), Chuyển hóa lipid- Hóa sinh, Nxb Y học, Hà Nội.
8. Nguyễn Công Khẩn (2007), “Thừa cân - béo phì và một số yếu tố liên quan ở người trưởng thành Việt Nam 25-64 tuổi, chiến lược quốc gia về dinh dưỡng giai đoạn 2001-2010”, Nxb Y học, Hà Nội.
9. Đỗ Tất Lợi (2003), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXb Y học, Hà Nội.
10. Nguyễn Kim Lương ( 2001), “Nghiên cứu rối loạn chuyển hoá lipid ở bệnh nhân đái tháo đường týp 2 có và không tăng huyết áp”, Luận án Tiến sĩ y học, Học viện Quân Y.
11. Trần Thị Chi Mai (2007), “Nghiên cứu tác dụng của polyphenol Chè xanh (Camellia sinensis) lên các chỉ số lipid và trạng thái chống oxy hóa trong máu chuột cống trắng đái tháo đương thực nghiệm”, Luận án Y học.
48
12. Thái Hồng Quang (1989), “Góp phần nghiên cứu một số biến chứng mạn tính trong bệnh đái tháo đường”, Tóm tắt luận án PTS khoa học Y dược, Học viện Quân Y.
Tài liệu tiếng anh
13. Chitra Shenoy, MB Patil, Ravikumar, and Swati Patil, (2009), “Preliminary phytochemical activity of Allium Capa Linn (Liliaceae)”, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, India.
14. Hisashi M., Tadashi K., Iwao T., Toshiyuki M., Akinobu K., and Masyuki Y. (1999), “Effects of sesquiterpenes and triterpenes ffrom the rhizome of Alisma orientale on nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated macrophages: Absolute stereostructures of alismaketones-B 23-acetate and – C 23-acetate”,
Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol 9, issue 21, pp. 3081-3086. 15. Jung U.J., Park Y.B. (2006), “Effect of citrus flavonoids on lipid metabolism and glucoza-regulating enzyme mARN level in type 2 diabetic mice”, The International Journal of Biochemistry &Cell biology, Vol 38 (7), pp. 1134-1145. 16. Lenzen, S.(2008). “The mechanism of alloxan-and streptozotocin- induced diabetes”. Diabetologia 51: 216-226.
17. Lifescan INC., Johnson & Johnson company (1996), “Glucose testing and reagent chemistry”, Lifes can learning modules, pp. 1-26.
18. Lorke D. A. (1983), “A new approach to practical acute toxicity testing”,Arch Toxicol , Vol 54, pp. 275-287.
19. Srinivasan K., Viswanad B., Asrat L., Kaul C. L., Ramarao P. (2005), “Combination of high-fat-diet-fet and low-dose STZ treated rat: A model for type 2 diabetes and pharmacological screening”, Department Pharmacological Reseach, 52, pp. 313-320.