Thiết bị
Sử dụng hệ thống đánh giá giải phóng thuốc qua màng Hanson Research . Ngăn cho được cải tiến để chứa được 1 ml mẫu hỗn dịch chứa tiểu phân NP, ngăn nhận chứa môi trường khuếch tán, màng giải phóng được đặt giữa hai ngăn.
Điều kiện giải phóng
- Môi trường khuếch tán: dung dịch đệm PBS ( Phosphat buffered Saline) pH 7,4 - Thể tích môi trường khuếch tán: 7 ml
- Nhiệt độ môi trường khuếch tán: 37oC - Tốc độ khuấy : 400 vòng/phút
- Màng giải phóng:
+ Màng thẩm tích khối lượng phân tử giới hạn 12-14 kDa
+ Giác mạc mắt thỏ: bóc tách từ thỏ trắng có cân nặng từ 2,5 - 3 kg. Sau khi thỏ bị giết bằng các tiêm không khí qua tĩnh mạch vành tai, thời gian từ khi thỏ chết cho tới khi mắt thỏ được bóc tách không quá 2 giờ. Sử dụng các dụng cụ phẫu thuật, lấy mắt, giác mạc được ngâm rửa trong nước muối NaCl 0,9% cho đến khi sử dụng [4].
- Diện tích bề mặt màng khuếch tán : 0,785 cm2
- Lượng mẫu đem thử: 1 ml NP diclofenac sau bào chế (tương ứng 0,1 mg ADC), 1 ml hỗn dịch ADC 1 mg/ml trong nước.
+ Hỗn dịch ADC 1 mg/ml: bào chế bằng phương pháp phân tán. Môi trường phân tán là nước, chất gây thấm là Tween 80.
+ Hỗn dịch NP diclofenac 1 mg/ml: bào chế giống hỗn dịch ADC 1 mg/ml. Lấy mẫu
Lấy mẫu trong 6 giờ, giờ đầu lấy mẫu sau 30 phút, sau đó mỗi giờ lấy mẫu 1 lần, mỗi lần lấy 1 ml rồi bổ sung 1 ml môi trường khuếch tán mới. Lượng dược chất giải phóng được xác định bằng phương pháp HPLC trình bày ở mục 2.3.5.
Cách tính phần trăm dược chất giải phóng tại các thời điểm
- Nồng độ dược chất trong môi trường khuếch tán tại thời điểm t:
Ct = ×Cc Trong đó:
Ct: Nồng độ dược chất trong môi trường khuếch tán tại thời điểm thứ t (µg/ml)
Cc: Nồng độ mẫu chuẩn (µg/ml)
St: diện tích pic của mẫu thử (mAU.giây) Sc: Diện tích pic của mẫu chuẩn (mAU.giây)
- Tổng lượng dược chất đã giải phóng từ NP tại thời điểm thứ t:
Qt = V×Ct + ʋ × ∑
Trong đó:
Qt: tổng lượng dược chất đã giải phóng tính tới thời điểm thứ t (µg). V: thể tích môi trường khuếch tán (ml).
ʋ: thể tích mỗi lần lấy mẫu thử (ml).
Ct: nồng độ dược chất trong môi trường khuếch tán tính tới thời điểm thứ t (µg/ml).
Ci: nồng độ dược chất trong môi trường khuếch tán tại thời điểm ngay trước đó (µg/ml).
- Phần trăm dược chất đã giải phóng từ NP tại thời điểm t:
Trong đó:
Xt: phần trăm dược chất giải phóng tính tới thời điểm thứ t (%). Qt : lượng dược chất đã giải phóng tính tới thời điểm thứ t (mg). m : khối lượng dược chất có trong mẫu thử (mg).
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT