Dược chất giải phóng từ hệ NP và dược chất có trong hệ NP được định lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu nâng cao HPLC [5].
Điều kiện
- Pha tĩnh: cột C8 kích thước 150 mm × 4,6 mm, hạt nhồi 5 µm
- Pha động: hỗn hợp methanol và dung dịch đệm phosphat pH 2,5 với tỉ lệ 75/25, lọc qua màng cellulose acetat 0,45 µm, siêu âm 15 phút.
- Tốc độ dòng: 1 ml/phút. - Thể tích tiêm mẫu: 20 µl.
- Detector UV bước sóng: 276 nm. Mẫu chuẩn
Cân chính xác một lượng ADC (hoặc NaD) khoảng 10 mg, hòa tan hoàn toàn bằng methanol trong bình định mức 50 ml, bổ sung thể tích vừa đủ, thu được dung dịch gốc nồng độ 200 µg/ml.
Pha loãng dung dịch gốc 5 lần với methanol để thu được mẫu chuẩn có nồng độ 40 µg/ml. Lọc qua màng lọc 0,45 µm.
Mẫu thử
Định lượng dược chất giải phóng qua màng: 1 ml mẫu lấy từ môi trường khuếch tán trực tiếp đem đi phân tích.
Định lượng dược chất có trong mẫu NP: hòa tan hoàn toàn mẫu NP diclofenac vào methanol, sau đó pha loãng mẫu 200 lần với pha động, lọc qua màng 0,45 µm.
Công thức tính:
- Nồng độ dược chất trong mẫu thử
Ct =
Trong đó:
Cthu: Nồng độ dược chất trong mẫu thử (mg/ml) mchuan: khối lượng dược chất cân ban đầu (mg) Sthu: Diện tích pic của mẫu thử (mAU.giây)
Schuan: Diện tích pic của mẫu chuẩn (mAU.giây)
- Phần trăm dược chất chứa trong mẫu NP được tính như sau
H =
Trong đó:
Cthu : Nồng độ dược chất trong mẫu thử (%) Cnano: Nồng độ dược chất trong NP bào chế (%).
