Sơ đồ phản ứng:
Tiến hành phản ứng:
Hòa tan 0,20 g NaOH (5 mmol) vào 10ml nước cất trong bình cầu một cổ dung tích 50 ml, làm lạnh. Cho 0,92 g curcumin (2,5 mmol) vào bình cầu trên, khuấy trong 5 phút. Sau đó, thêm 5 ml anhydrid acetic (0,053 mol) vào hỗn hợp trên, khuấy hỗn hợp phản ứng ở nhiệt độ phòng. Theo dõi quá trình phản ứng bằng SKLM với hệ dung môi dicloromethan: methanol = 30: 1 để xác định diễn biến phản ứng và thời gian thu được sản phẩm với hiệu suất cao nhất.
Sau 3h, kết thúc phản ứng, trên SKLM cho 2 vết dự đoán là 4-O-acetyl curcumin và 4,4’-di-O-acetyl curcumin (Ia) với tỉ lệ khoảng 0,5: 9,5, không còn vết nguyên liệu curcumin.
Xử lý phản ứng:
- Chiết lấy sản phẩm trong hỗn hợp với dicloromethan:
Hỗn hợp phản ứng được chuyển sang bình chiết dung tích 100 ml, chiết 3 lần với dicloromethan với thể tích lần lượt là: 20 ml, 15 ml và 10 ml. Gộp dịch chiết dicloromethan và rửa với nước cất, kiểm tra pH pha nước đến khi đạt pH khoảng 6-7 thì dừng.
Pha dung dịch NaOH 0,001M ,làm lạnh dung dịch NaOH trong tủ lạnh. Tiến hành rửa dịch chiết dicloromethan 3 lần với thể tích NaOH lần lượt là 30 ml, 30 ml, 15 ml. Theo dõi hiệu quả rửa trên SKLM bằng cách chấm 2 pha DMHC và pha nước lên cùng 1 bản mỏng, chạy trong hệ dung môi dicloromethan: methanol = 30: 1 thì sau 3 lần rửa với dung dịch NaOH, pha DMHC còn lại chỉ 1 vết đúng như dự kiến.
Sau khi rửa loại tạp, tiếp tục rửa loại kiềm dư bằng nước cất đến khi pH pha nước ̴ 7 thì dừng lại.
Làm khan dịch chiết dichloromethan bằng 2g Na2SO4 trong 1h. Sau đó lọc, đem cất loại dung môi bằng máy cất quay chân không ở nhiệt độ khoảng 40 ͦC.
- Kết tinh, thu sản phẩm:
Hòa tan cắn thu được vào một lượng nhỏ cồn tuyệt đối, để kết tinh trong ngăn mát tủ lạnh. Sau 24h, lọc hút chân không thu tinh thể, sấy 30 phút dưới đèn hồng ngoại.
Kết quả:
m = 1,01 g.
Cảm quan : tinh thể hình kim, màu vàng rơm.
Hiệu suất : 89%.
Nhiệt độ nóng chảy : 169,3 ͦC - 170,5 ͦC.
Khả năng hòa tan trong các dung môi: tan tốt trong các dung môi CH2Cl2, CHCl3, tan ít trong methanol, kém tan trong cồn, rất khó tan trong nước.
Sơ bộ kiểm tra độ tinh khiết bằng SKLM với hệ dung môi dicloromethan: methanol = 30: 1 thấy vết rõ dưới ánh sáng đèn tử ngoại, Rf = 0,73 (CHCl3: MeOH = 20:1).