2. .3 Phương pháp nghiên cứu
3.5.1.Mô tả quy trình
Chiết xuất theo quy trình chiết xuất và tinh chế nêu trên (hình 3.10). Do thời gian có hạn và điều kiện thiết bị hạn chế, thực nghiệm này bỏ qua quá trình cất tinh dầu. Tiến hành với 3 mẻ dược liệu, cỡ mẻ là 2kg. Qua thực nghiệm, các thông số của quá trình được lựa chọn theo bảng 3.12.
Bảng 3.12. Các thông số của quá trình chiết tách và phân lập acid shikimic với cỡ mẻ 2kg
Đại lượng Giá trị
Khối lượng dược liệu (kg) 2
Thể tích dung môi chiết (L) V1 = 14, V2 = V3 = 10
Số lần chiết 3
Thời gian chiết tính từ thời điểm sôi (giờ) 1 Thể tích ethanol 96% (L) 1,6 Thể tích IPA trong giai đoạn tạo tủa thô (L) 1
Khối lượng bột talc (g) 100
Thể tích IPA trong giai đoạn kết tinh lại (L) 1
Khối lượng than hoạt (g) 60
3.3.1.2. Mô tả quy trình
Giai đoạn 1:Chuẩn bị nguyên liệu
Đại hồi được loại bỏ tạp, sấy ở 500C trong 2 giờ. Xác định độ ẩm (a); kết quả: a = 3,26 %. Cân 2 kg dược liệu thô.
Tiến hành theo phương pháp ngâm nóng, dung môi là nước. Các thông số kĩ thuật của quá trình chiết xuất được thể hiện trong bảng 3.12 nêu trên.
Cách tiến hành: Cho dược liệu cho vào bể chiết. Cho thêm 14L nước, đun sôi 1 giờ, lọc thu lấy dịch chiết lần 1. Bã còn lại được tiếp tục chiết thêm 2 lần nữa, mỗi lần 10L và đun sôi trong 1 giờ. Gộp các dịch chiết, lọc qua giấy lọc loại tạp cơ học.
Giai đoạn 3: Tinh chế + Bước 1: Tạo sản phẩm thô
Dịch chiết được cô cho đến khi thành cao đặc. Thêm 1,6L ethanol 96%, để lắng 2 giờ ở nhiệt độ phòng. Lọc thu dịch. Tủa được rửa lại 2 lần, mỗi lần 300mL ethanol 96%, lọc lấy dịch. Gộp dịch lọc và dịch rửa, cô đến cao đặc.
Hòa cao đặc vào 1L isopropanol, đun cách thủy, khuấy liên tục trong 30 phút. Để lắng, gạn lấy dịch. Phần tủa keo tiếp tục tiến hành 2 lần nữa, mỗi lần 400mL isopropanol, đun cách thủy, khuấy liên tục trong 30 phút. Gạn lấy dịch. Gộp các dịch gạn.
Thêm 100g bột talc, đun cách thủy, khấy trộn 10 phút, để ở nhiệt độ phòng 2 giờ, sau đó đem lọc qua giấy lọc trên phễu có hút chân không. Dịch lọc được cô bớt dung môi đến khi còn 400mL. Để kết tinh ở nhiệt độ phòng. Sau 5 ngày, lọc lấy tủa. Rửa tủa 3 lần, mỗi lần bằng 100mL isopropanol. Sấy thu được sản phẩm thô.
+Bước 2: Kết tinh lại
Từ sản phẩm thô, đem hòa tan vào 1L isopropanol, thêm 30g than hoạt, đun cách thủy trong 15 phút. Lọc lấy dịch lọc, dịch lọc cô bớt đến còn khoảng 400mL, để kết tinh 5 ngày ở nhiệt độ phòng. Sản phẩm kết tinh được lọc và
rửa 3 lần bằng isopropanol, mỗi lần khoảng 100mL. Sấy khô thu được sản phẩm kết tinh màu trắng (hình 3.11).
Hình 3.11. Sản phẩm acid shikimic